共聚焦激光扫描显微镜在外阴硬化萎缩性苔藓与白癜风鉴别中的应用

邹云敏 吴秀娟 康晓静 张德志 于世荣 刘建勇 吴曹英 普雄明

共聚焦激光扫描显微镜在外阴硬化萎缩性苔藓与白癜风鉴别中的应用

邹云敏 吴秀娟 康晓静 张德志 于世荣 刘建勇 吴曹英 普雄明*

目的： 明确皮肤共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）在外阴部位硬化萎缩性苔藓与白癜风鉴别中的应用价值。方法： 选取硬化萎缩性苔藓患者8例和白癜风患者16例的典型皮损做CLSM检查，然后组织病理学检查验证。结果： 硬化萎缩性苔藓患者CLSM图像显示：表皮变薄、真表皮界线不清、真皮浅层折光度增加、单一核细胞浸润，与组织病理学特征一致。白癜风患者CLSM图像显示有白斑区色素完全缺失，或局部残留，与组织病理性特征一致。结论： CLSM有助于硬化萎缩性苔藓与白癜风的鉴别与诊断。

白癜风； 硬化萎缩性苔藓； 共聚焦激光扫描显微镜

近年来，在体共聚焦激光扫描显微镜（confocal laser scanning microscopy，CLSM）已成为一种非侵人性皮肤病检查工具。它可以快速获得实时、动态的皮肤微解剖图像，减少不必要的皮肤活检。国内外学者利用CLSM对正常皮肤以及色素障碍性皮肤病、皮肤肿瘤、皮肤癌前病变1、斑驳病2、急性刺激性接触性皮炎和急性变应性接触性皮炎3、落叶型天疱疮4、斑秃5等疾病进行观察。早期的硬化萎缩性苔藓，尤其发生在外阴部位者难易区别于白癜风，我们利用CLSM技术对白癜风与硬化萎缩性苔藓的特征进行研究，对二者进行鉴别，从而为早期的硬化萎缩性苔藓与白癜风的诊断与鉴别提供有利的帮助。

1　资料与方法

1.1一般资料 研究对象：选取2013年10月至

2014年10月到我院皮肤科的发生于外阴部位疑诊为硬化萎缩性苔藓（图1a）和白癜风（图1b）的患者筛选出符合下列标准的：同意进行CLSM和皮肤组织病理检查，并经组织病理检查确诊为相应疾病诊断标准的患者。入选患者24例，其中白癜风组16例，男12例，女4例，年龄6～54岁，平均年龄29.8岁；硬化萎缩性苔藓组8例，男2例，女6例，年龄7～47岁，平均年龄25.8岁。

1.2方法

1.2.1CLSM检测 CLSM仪（Viva1500系统，美国Lucid公司）。选择典型皮损，取适当体位，皮损部位涂少量蒸馏水，以B超润滑剂为介质，分别对每例患者进行扫描。

1.2.2皮肤组织病理 选取进行CLSM检查的同一部位皮损，常规组织病理活检后用HE染色，然后读片。

2　结果

图1　a：硬化萎缩苔藓临床图片 b：白癜风的临床图片

硬化萎缩性苔藓组：8例患者组织病理均示（图2a）：表皮变薄，表皮突减少或消失，真皮上部出现水肿，胶原均质化，均质化浅表真皮的下方，有不同程度的炎细胞浸润。有5例显示灶状的基底细胞空泡化或基底细胞液化变性。有6例显示黑素细胞缺失。CLSM扫描图像中：有8例均显示：棘层扫描厚度较周围正常皮肤变薄（因是横断面扫描，图像无法显示），真皮浅层折光度增加（对应胶原均质化，图2c），单一核细胞浸润（对应炎症细胞浸润）。有4例显示：真表皮界线不清（基底细胞液化变性，图2b），有6例显示基底层环状结构消失（对应黑素细胞缺失）。

白癜风组：16例患者组织病理（图3a）均显示：基底层黑素细胞及黑素颗粒明显减少乃至消失，免疫组织化学染色S-100阴性。图像（图3b）：16例均显示有白斑区色素环完全缺失，或局部残留。

图2　a：硬化萎缩性苔藓的组织病理：角化过度，表皮变薄，表皮突减少，基底层细胞液化变性，真皮上部出现水肿，胶原均质化，均质化浅表真皮的下方，有炎细胞浸润（HE，×100） b：CLSM图像：真表皮界限不清，散在单一核细胞浸润 c：CLSM图像：真皮浅层折光度增加，散在单一核细胞浸润

图3　a：白癜风患者组织病理：基底层黑素细胞及黑素颗粒明显缺失（HE，×200） b：白癜风CLSM图像：白斑区色素环完全缺失，或局部残留 c：正常皮肤CLSM图像：基底层色素环完整

3　讨论

硬化萎缩性苔藓主要发生在月经前儿童或绝经期女性，男女发病之比为1∶10，绝经期女性约占所有病例的60%。6，7好发于外阴，可伴有女阴及肛周皮肤萎缩。男性常见于有包茎或包皮龟头炎而未行包皮环切者，在包皮内侧、龟头、尿道口、冠状沟出现群集的瓷白色或象牙色的多角形丘疹或斑块，羊皮纸样外观，损害可由于刺激而发生糜烂和皲裂，严重者可引起包皮不能上翻、龟头粘连、甚至尿道口狭窄、偶有癌变者。硬化萎缩性苔藓是一种动态变化的皮肤病，有多种组织学表现与临床表现。在临床工作中，临床医师对其认识不足，有些病例缺乏病理诊断技术或经验等原因，容易将硬化萎缩性苔藓与白癜风相混淆。白癜风多后天发生，可开始于任何年龄，或青年人多见，无明显性别差异。可发生于任何部位，少数患者泛发全身。典型皮损为乳白色色素脱失斑，大小不等、数目不定、形态各异、中央可见散在的色素岛。病理改变为表皮中黑素细胞及黑素颗粒明显减少乃至消失。

CLSM是利用新一代反射模式的共聚焦激光显微镜原理，在计算机辅助下，对皮肤病变部位进行扫描成像的新型诊断技术。CLSM具有8① 无创性，患者的依从性较高；②可实时动态地对皮损进行检测，成像迅速；③数据易于存储和输出；④可进行光学断层观察，被形象地称“细胞CT”，可实现立体三维重建；⑤可进行定量观察，提供显微测量参数的优点。其穿透力强，可获得200～350μm深度细胞水平的活体皮肤图像，可分析未经脱水、固定、组织染色的活体样本，能对皮肤的血管进行三维分析，具有“无创、实时”的优势。这也是其在临床应用中的最大优点，有别于传统的皮肤组织病理检查。目前已经被广泛用于皮肤科肿瘤性疾病（基底细胞癌、日光角化病、黑素细胞瘤等）、炎症性疾病（银屑病、接触性皮炎等）以及色素性疾病（白癜风、无色素性痣、黄褐斑等）。本文对8例硬化萎缩性苔藓患者的皮损分别进行组织病理及共聚焦激光扫描检查，并将两种结果进行对比，共聚焦激光扫描结果显示：角质层中可见较大的较高折光的无核角质形成细胞、棘层的扫描厚度较周围正常皮肤变薄、真皮浅层折光度增加、单一核细胞浸润、真表皮界线不清、基底层环状结构消失，这与刘华绪等9研究图谱中结果一致。16例的白癜风患者共聚焦激光扫描检查示：白斑区色素完全缺失，或局部残留，这与意大利Ardigo等10对白癜风的RCM评估一致。因此，利用CLSM技术可以很容易的将临床难以区分的硬化萎缩性苔藓与白癜风区别。很大程度减轻了发生于外阴部位硬化萎缩性苔藓及白癜风患者因行皮肤活检术带来的痛苦。

CLSM作为一项新发展的技术，它的非侵入性检查特点在皮肤科领域将有广阔的应用前景，CLSM正被广泛的认识和应用，相信随着这一技术的不断完善和发展，必将促进对某些难治性皮肤病病因、发病机制的研究，为诊断和治疗提供新的有效的方法，推动皮肤科学的发展。

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2李颖，项蕾红，牛振民，等.斑驳病一家系c-kit基因突变检测及共聚焦激光扫描显微镜皮损观察.中华皮肤科杂志，2008，41（1）：15-18.

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4 Angelova-Fischer I，Pfeuti T，Zillikens D，et al.In vivo confocal laser scanning m ficmscopy for noii-invasive diagnosis of pemphigus foliaeeus.Skin Res Technol，2009，15（1）：40-44

5后桂荣，肖艳，曾抗.斑秃共聚焦激光扫描显微镜影像学特征分析.中华皮肤科杂志，2012，45（4）：246-248.

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7 Tasker GL，Wojnarowska F.Lichen sclerosus.Clin ExpDermatol，2003，28（1）：128-133.

8刘华绪，郑志忠，任秋实.基于光学共聚焦原理的皮肤在体三维成像系统及应用.中华皮肤科杂志，2006，39（10）：616.

9刘华绪，林燕，于世荣，等.反射式共聚焦显微镜皮肤病图谱.人民卫生出版社，2013.86-88.

10Ardigo M，Malizewsky I，Ortonne JP，et al.Preliminary evalution of vitiligo using in vivo reflectance confocalmicroscopy.J Eur Acad Dermatol Venereol，2007，21（10）：1344-1350.

（收稿：2014-12-13 修回：2015-03-14）

The role of confocal laser scanningm icroscopy in the identification of atrophic lichen sclerosis and vitiligo on vulva

ZOU Yun-min，WU Xiu-juan，KANG Xiao-jing，et al.People's Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Urumchi，830001

Objective：To determine the value of confocal laser scanning microscopy in identification between atrophic lichen sclerosis and vitiligo on vulva.M ethods：The lesions from 8 patients with atrophic lichen sclerosis and 16 patientswith vitiligo on vulva were exam ined under confocal laser scanningmicroscopy，and then，the histopathologic examination of the lesionswas performed.Results：The image of atrophic lichen sclerosis lesions under CLSM showed that the thin epidermis，the obscured boundaries between derm is and epidermis，and the high diopter in the superficial layer of dermis and the infiltration ofmononuclear cells.All above was in accordance with the histopathologic features of atrophic lichen sclerosis.The image of vitiligo lesions under CLSM showed melanin was completely or partly absent，which was in accordance with the histopathologic features of vitiligo.Conclusion：CLSM is helpful in the differential diagnosis of atrophic lichen sclerosis and vitiligo.

vitiligo；atrophic lichen sclerosis；confocal laser scanningmicroscopy

新疆维吾尔自治区卫生厅青年科技人才科研项目（编号：2014Y07）

新疆维吾尔自治区人民医院，乌鲁木齐，830001