鸡传染性喉气管炎的病理组织学观察

李 均

(射洪县畜牧食品局太乙畜牧兽医站，629211)

鸡传染性喉气管炎（AvianInfectiousLaryngotracheitis，AILT）是一种接触性、急性上部呼吸道传染性疾病，是由传染性喉气管炎病毒引发的。鸡传染性喉气管炎会导致蛋鸡的产蛋率下降，严重者则会应窒息而出现死亡。

1 材料与方法

1.1 材料

随机选取6例患有鸡传染性喉气管炎症状的病鸡作为研究对象，采取常规实验室方法对病鸡的症状进行确诊。并随机选取6例健康鸡作为对照。所使用的试验器皿、实验仪器主要包括：三角烧杯、模具、玻璃板、打孔器、微量加样器、滴管、玻璃搅拌、石蜡切片机、恒温箱、离心机、烘片机、摊片机等。所使用的试剂主要包括：巴比妥缓冲液、磷酸盐缓冲液、酒精溶液、青霉素、链霉素、传染性喉气管炎病毒阳性血清、传染性喉气管炎阴性血清、苏木素伊红染液、石蜡二甲苯、琼脂糖以及鸡胚绒毛尿囊膜等。

1.2 方法

1.2.1 琼脂免疫扩散试验

对病鸡的气管粘膜、喉结粘膜及分泌物进行采样，按1:5的比例将其放置到磷酸盐缓冲液中（pH值为7.2），对其进行研磨，最终成为匀浆，对其进行3次以上的解溶。之后分别加入适当的青霉素、链霉素。在温度为4摄氏度的冷藏室中放置4小时，之后取出放到离心机内进行20分钟的离心处理，速度每分钟为3700转，取上清液作为病毒分离材料。遵循实验室的相关标准，制作病毒抗原。将分离材料通过使用鸡胚绒毛尿囊膜制备成抗原，再将传染性喉气管炎病毒阳性血清、传染性喉气管炎阴性血清分别与抗原放到0.45摩尔每升pH值为7.2的巴比妥缓冲液所制备的百分之一的琼脂板上。按常规方法依次进行打孔与加样，之后再将其放置到37摄氏度的恒温箱中使其慢慢进行扩散反应。24小时后观察实验结果。

1.2.2 制作病理组织石蜡切片

对病鸡的喉结、气管进行采样并按照相关操作标准制作成石蜡切片。具体步骤如下：第一，将采样放置到浓度为百分之四的甲醛溶液中，对喉结、气管组织进行固定，采用梯度酒精脱水法对其进行脱水处理，使用二甲苯进行透明处理，再将其包埋到60摄氏度的石蜡中，将石蜡块进行连续切片处理，采用H.E.染色方法对石蜡切片进行染色。分别在100倍光学显微镜、400倍光学显微镜下观察病理组织变化，并进行详细记录。

2 结果

2.1 实验结果

观察结果显示：阳性血清与抗原间出现了一条比较清晰的沉淀线。阴性血清与抗原间没有发生反应沉淀，由此可判定出该病毒为鸡传染性喉气管炎病毒。在光学显微镜观察下，正常粘膜层组织细胞上层纤毛排列整齐、管粘膜、粘膜下层以及外膜各层清晰。而病变气管粘膜上皮组织脱落、坏死有的出现肿胀现象，还大量渗出纤维素性物质及炎性细胞侵润，粘膜上层纤毛萎缩、紊乱，粘膜下层血管出血导致黏膜层间界线比较模糊。

如图所示，中间孔为抗原，1-6号孔分别为：阴性血清、阳性血清阳性血清、阳性血清、阳性血清、阳性血清。

2.2 观察结果

在光学显微镜的观察下，正常喉结粘膜完整，粘膜细胞、表面纤毛整齐排列，粘膜层腺体结构也比较明显。而喉结粘膜病变条件下上皮细胞脱落、坏死、崩解，粘膜层细胞比较疏松，对原有腺体结构产生了破坏，其喉结组织结构、气管组织结构均会有比较明显的膨胀、肿大及脱落现象出现，还会伴有炎性浸润现象。

3 讨论

喉结、气管部位是鸡传染性喉气管炎的主要病变位置，其主要的临床症状有呼吸困难、用力咳嗽、带有喘鸣声、发出湿性啰音以及尽力张嘴呼吸等，严重者会咳出带血粘液甚至血块。随着养殖业的不断发展，鸡养殖成为农村人员的重要经济来源之一，鸡传染性喉气管炎具有接触性传染性，导致蛋鸡的产蛋率下降，严重者则会应窒息而出现死亡，从而给养鸡户带来了非常大的经济损失。因此，加强对鸡传染性喉气管炎的防治具有一定的必要性。

[1]张涛杰,王聪,阿依木古丽,扎西英派.鸡传染性喉气管炎的病理组织学观察[J].西北民族大学学报(自然科学版),2015,01:43-47.

[2]石玉祥,张登荣,王雪敏,王哲,王艳梅.鸡人工感染传染性喉气管炎病毒后气管病理组织学观察[J].安徽农业科学,2008,29:12710-12711.