两个群体巴马小型猪血液生理生化指标比较

杨李厂，丁　隽，周新初，任伯民，谢　东，杨伟敏

（1. 上海睿智化学研究有限公司，上海 201203；2. 上海交通大学农业与生物学院，上海 200240；3. 江苏省吴江田宇生物科技有限公司，苏州 215222）

两个群体巴马小型猪血液生理生化指标比较

杨李厂1，丁隽1，周新初2，任伯民3，谢东1，杨伟敏1

（1. 上海睿智化学研究有限公司，上海 201203；2. 上海交通大学农业与生物学院，上海 200240；3. 江苏省吴江田宇生物科技有限公司，苏州 215222）

目的比较两个群体巴马小型猪血液生理和生化学指标。方法分别选取两个群体4～8月龄的巴马小型猪40头（雌雄各半），测定其血液生理生化指标，并进行比较。结果对两个群体巴马小型猪血常规指标比较，有9项指标［红细胞比积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均血红蛋白浓度（MCHC）、血小板数（PLT）、中性粒细胞数（NE）、淋巴细胞数（LY）、单核细胞数（MO）、嗜酸粒细胞数（EO）、嗜碱粒细胞数（BA）］差异有统计学意义（P＜0.05）。两个群体巴马小型猪血液生化指标比较，有8项指标［丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总蛋白（TP）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）］差异有统计学意义（P＜0.05）。结论不同群体巴马小型猪的血液生理、生化指标存在一定差异，在药物代谢、药效以及毒理实验等研究中应引起重视。

小型猪；血液生理；血液生化

上海是较早建立实验用小型猪地方标准的地区之一，该标准详细规定了实验用小型猪的遗传分类方法，规范了环境与设施的技术要求，为生物医药研究，生物制品生产，以及人体器官移植等研究和应用提供了较标准的实验动物。由于猪在解剖学、生理学、营养代谢等方面与人类相似，已经被高校、科研院所以及外资研发机构广泛使用。小型猪的血液生理和生化指标等是病理、生理以及毒理学研究工作的重要基础性指标。本实验选择两个群体普通级巴马小型猪，分别检测分析个体间部分血液生理和生化指标以及性别间差异。

1　材料与方法

1.1实验动物

1.1.1动物来源4～8月龄普通级巴马小型猪各40头，雌雄各半，分别由上海华新特种养殖场（A单位） ［SCXK （沪） 2007-0013］ 和江苏省吴江田宇生物科技有限公司（B单位）［SCXK（苏）2011-0001］ 提供，种源来自广西原产地。

1.1.2动物饲养条件两个群体均为普通级环境，室温20 ～ 25 ℃，相对湿度30% ～ 80%，饲养管理方法基本相同，每日定时、定量饲喂饲料，自由饮水。

1.2方法

1.2.1血样采集所有动物采血前过夜禁食 （12～15 h），在清醒状态下从前肢或是前腔静脉取血，每只动物采血量为4～5 mL，分别用于血液生理指标和生化指标的测定。

1.2.2血液生理指标检测取1 mL全血用EDTA抗凝，两个群体分别以S y s me x X T-2 0 0 i v和HEMAVET950全自动五分类动物血液分析仪检测红细胞数（RBC）、白细胞数（W BC）、血红蛋白（HGB）、红细胞比积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白（MCH）、平均血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞容积分布宽度（RDW）、血小板数（PLT）、中性粒细胞数（NE）、淋巴细胞数（LY）、单核细胞数（MO）、嗜酸粒细胞数（EO）、嗜碱粒细胞数（BA）等14项指标。

1.2.3血液生化指标的检测取3 mL 非抗凝血离心分离血清，A单位小型猪采用Olympus AU400全自动生化分析仪，B单位小型猪采用魅力2000全自动生化分析仪，检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（CRE）、尿素氮（BUN）、总胆红素（TBIL）、甘油三酯（TG）、葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）等11项生化指标。

1.2.4数据处理检测结果以均数±标准差（x- ± s）表示，实验数据采用SPSS18.0统计软件进行统计处理。两样本均数比较采用独立样本t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1血液生理指标

表1结果表明，两个群体巴马小型猪的14项血液生理学指标中，HCT、MCV、MCHC、PLT、NE、LY、MO、EO、BA存在显著性差异（P＜0.05）。A单位巴马小型猪的14项血液生理学指标，雌雄间RBC、HGB、HCT、MCH、MCHC、RDW、 LY差异显著（P＜0.05），B单位雌雄间HCT、MCV、PLT、LY差异显著（P＜0.05）。

两个群体雄性巴马小型猪间比较，RBC、HCT、MCV、MCHC、PLT、RDW、NE、LY、MO、BA差异显著（P＜0.05）；雌性小型猪间比较，RBC、HGB、MCV、MCHC、PLT、NE、LY、MO、EO差异显著（P＜0.05）。

2.2血清生化指标

两个群体血清生化指标中前者的A L T、AST、ALP、CRE和TC水平都低于后者，而TP、BUN、TG高于后者（P＜0.05）。A单位小型猪雌雄间ALB、ALP、TC有显著性差异（P＜0.05），B单位雌雄间AST、ALT、ALB存在显著差异（P＜0.05）。两个群体雄性巴马猪间比较，ALT、AST、ALP、TP、CRE、TG、TC差异显著（P＜0.05），雌性间ALP、TP、ALB、TBIL、CRE差异显著（P＜0.05）（表2）。

3　讨论

巴马小型猪产自广西巴马瑶族自治县，是中国优良的地方小型猪品种。上海市华新特种养殖场和江苏省吴江田宇生物科技有限公司都是从广西巴马县原种场引进纯种巴马香猪，然后形成独立的封闭群。

表 1　两个群体普通级巴马小型猪血液学指标

表 2　普通级巴马小型猪血清生化指标测定结果

3.1巴马小型猪血液生理生化指标

与冯媛媛等［1］检测的中国实验用小型猪9项血液生理生化指标相比，除B单位巴马小型猪群体的MCHC均值较大，A、B两个单位小型猪群体其余8项指标均接近于中国实验用小型猪；在11项血清生化指标中，两个群体小型猪分别有6项和8项与之接近，其他指标都较低。与陈克研等［2］报道的辽宁地区饲养的巴马小型猪的血液生理生化对比，只有WBC数据差异大，其他数据都较接近；血清生化数据中ALT、TP、ALB、BUN较接近，其他参数值或高或低。胡延廷等［3］测定了在山东饲养的巴马小型猪相应的参数，血液生理指标中RBC、HGB、HCT、PLT和MCHC与A、B两个群体间的差异较大，其余数据相近；血清生化大多接近，但ALP、TP、TBIL、TG偏低。本文数据与连林生等［4］报道的版纳小型猪各参数值差异大，但接近郭雄明等［5］研究的五指山小型猪的各指标数值。综上所述，不同地区饲养的巴马小型猪血液学生理生化指标都存在差异，总体数据偏差范围不大；不同品种小型猪之间有些差异较大，有些数据接近。

影响血液生理生化指标检测结果的因素很多，除人为因素、试剂因素和仪器等，个体生理因素非常重要［6，7］。例如，老龄动物和年轻动物相比，肾功能衰退，肌酐清除率变低，雄性肌酐水平一般高于雌性；通常TC的水平也是雌性比雄性稍高。Kawaguchi等［8］研究结果显示，雌性小型猪TC偏高，0月龄的小型猪的ALP、TBIL、TC、TG和GLU高于年龄较大的动物，而ALT较低。本实验两群体雌性小型猪TC 与其报告结果一致，也都是雌性水平比雄性水平稍高；两群体血常规雌雄间差异指标多；血清生化差异指标相对较少，两群体差异指标比例都是3/11，与Kawaguchi［8］研究结果相同。

3.2饲养环境与饲料标准化对巴马小型猪血液生理

生化指标的影响

众所周知，动物繁育和实验的饲养环境、饮食对其血液生理、生化指标有很大的影响，不同的饲养环境，特别是微生物学状况的控制不尽相同，也可能是导致不同地区巴马实验小型猪血液生理生化指标的差异。陈克研等［2］从广西巴马瑶族自治县引进巴马小型猪，然后在辽宁地区饲养并检测其血液生理生化指标，发现与原产地提供的部分指标存在显著性差异，可能也是与生活环境和管理上的差异有关。本试验中两个养殖场所采用的饲料都属于加工饲料，主要营养成份与比例相近（粗蛋白≥12%，粗脂肪≥2%，粗纤维≤8%），但在各自配方上存在差异，可能是造成有些指标差异的因素之一。

3.3建立SPF级实验小型猪的意义

随着多地实验用小型猪地方标准的建立，为规范化、标准化生产合格实验小型猪提供了指导依据，在动物种源、遗传控制良好的前提下，本文作者认为，繁育生产SPF级巴马实验小型猪是减少群体差异的方法之一。目前，国际上常用的哥廷根小型猪为SPF级实验用猪，已在世界发达地区被广泛应用于生命科学和新药研发领域，成为国际公认的标准实验动物。由此可见，尽快培育SPF级巴马实验小型猪，将是提升我国实验用猪标准化并使相应的研究成果得到国际学术界公认的一个有效途径。

［1］冯媛媛，白雪源，贺津，等. 中国实验用小型猪血液指标正常参考值分析［J］. 2013，40（6）:139-141.

［2］陈克研，师文，孙倩，等. 巴马小型猪在辽宁地区的适应性观察及血液生理生化指标检测［J］. 2014，41（12）:182-185.

［3］胡建廷，屈卉锦，王韶艳，等. 普通级巴马小型猪部分血液学指标的测定 ［J］. 动物学进展，2011，32（9）:66-68.

［4］连林生，王鹤云，徐家珍，等. 版纳微型猪的生物学特性 ［J］.上海实验动物科学，1993，13（4）:185-191.

［5］郭雄明，姚春涛，赵玉琼，等. 两个品系普通级和SPF级小型猪部分血液学指标的比较 ［J］. 中国比较医学杂志， 2009，19（2）:40-42.

［6］刘丽娜. 浅析血常规检查的影响因素［J］. 医学信息，2014，27（4）:232.

［7］ 詹纯列，肖育华，李建军，等. 性别、年龄、微生物因素对Wistar大鼠血常规值的影响［J］. 中国比较医学杂志，2004，14（3）:148-150.

［8］Kawaguchi H，Yamada T，Miura N，et al. Sex differences of serum lipid profile in novel microminipigs ［J］. In Vivo，2013，27（5）:617-621.

［9］Ellegaard L，Jorgensen K D，Klastrup S，et al. Hematologic and clinical chemical values in 3 and 6 months old Gottingen minipigs ［J］. Scand J Lab Anim Sci，1995，22:239-248.

［10］ 北京市地方标准.DB11/T 828.4-2011. 实验用小型猪，第4部分: 病理学诊断规范［S］.

Q95-33

B

1674-5817（2015）03-0230-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.03.011

2014-10-25

上海市实验动物创新行动计划项目 （13140900200）

杨李厂（1981-），男，硕士在读，研究方向: 动物生理/生化。E-mail: lchyang@chempartner.cn

杨伟敏，高级实验师，研究方向: 实验动物科学与管理。E-mail: wmyang1@chempartner.cn