时宇静 刘月恒
随着手机等移动通信设备的普及使用,人们活动空间中电磁场的强度在急剧增强。电磁辐射污染,已成为继大气污染、水污染和噪声污染之后,威胁人类健康的第四大污染,联合国人类环境大会已将其列入必须控制的主要污染物之一。皮肤作为人体的第一道屏障,是电磁辐射的第一个靶器官。伴随人们对电磁辐射危害性认识的提高,电磁辐射保护研究正在成为皮肤护理领域研究的热点之一。
本研究通过观察手机辐射后小鼠皮肤成纤维细胞株3T6生长的变化,探讨手机辐射对细胞正常生长的影响;并利用该模型评价防辐射中药组方对成纤维细胞的保护作用。
1.实验材料
*受试品:中药复方提取物(含麦冬等中草药),由北京工商大学中国化妆品研究中心制备。
*细胞株:小鼠皮肤成纤维细胞株3T6,购自中国科学院细胞库,本实验室传代后使用。
*试剂:FBS(批号:1428479)、0.25%Trypsin-EDTA(批号:1213981)购自GIBCO公司。改良型RPMI-1640型培养基(批号:NXL0745)购自HYCLONE公司。DMSO(批号:20121102)购自国药集团化学试剂有限公司。细胞增值毒性检测—CCK-8试剂盒为日本DOJINDO同仁化学研究所产品。
*实验仪器:X71型倒置显微镜为Olympus公司产品。HH CP-01W型二氧化碳细胞培养箱为上海博迅实业有限公司医疗设备厂产品。SW-CJ-IFD型单人单面净化工作台为苏州净化设备有限公司产品。RT-6000型酶标仪,深圳雷杜公司产品。诺基亚手机1050型,频段为GSM900MHz。
2.实验方法
参考Pacini等人的研究成果进行实验设计。实验分为空白对照组、辐射对照组、药物不同浓度组,每组8个复孔。收集对数期细胞,计数,按1×104/mL浓度接种到96孔板,每孔200uL。置37℃,5%CO2细胞培养箱中培养24h,使细胞贴壁。用药组加入不同浓度的中药复方提取物提取物100uL,空白对照组和辐射对照组加入100uL无血清培养基,继续培养。24h后,将细胞板置于CO2培养箱外适应1h,除空白对照组细胞外,将其他细胞板放置在手机上方,手机保持通话状态,空白对照组细胞板于另房间置于手机上方,手机保持关闭状态。6h后使用CCK法检测细胞活性,并计算增殖抑制率及增殖抑制保护率。
3.实验结果
结果显示,使用手机辐射6h后,皮肤成纤维细胞增殖受到抑制,辐射对照组细胞OD值较空白对照组比较有显著性差异(P<0.01),增殖抑制率达到17.65%;中药复方提取物剂量在250ug·mL-1以上的剂量组均对辐射后细胞增殖抑制具有明显的保护作用,与辐射对照组比较有显著性差异(P<0.05)(见表1)。
4.结论
手机辐射对成纤维细胞增殖造成抑制,含麦冬等中药的复方提取物对辐射后细胞增殖抑制具有明显的保护作用。中草药提取物良好的辐射防护作用,可应用于皮肤护理或保健品领域,为防辐射化妆品或保健食品的开发奠定科学基础。