兔眼蓝莓外植体启动培养研究

孙永平　曹荣祥　郭成宝等

摘要： 研究了南京地区主栽兔眼系列蓝莓品种灿烂、粉蓝、顶峰、梯夫蓝、园蓝的外植体启动培养，优化了WPM基础培养基适合硬度的琼脂含量和酸度，基本WPM培养基的琼脂浓度为12 mg/L，加压灭菌后pH值为5.8；新发枝条的后端粗茎段萌发率可以达到95%，接种50 d后大多成小植株；筛选出适合外植体萌发的培养基WPM+1.0 mg/L6-BA +1.5 mg/L ZT ，在此培养基上不同品种兔眼蓝莓萌发率较高。

关键词： 兔眼蓝莓；组织培养；外植体；启动培养

中图分类号： S663.904+.3 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2015）08-0045-01

蓝莓（Vaccinium spp.）作为一种新兴果树，是近年来许多国家发展十分迅速的优良果树之一，尤其是欧美国家。英国权威营养学家将蓝莓列为 15 种健康食品之首，联合国粮农组织也将蓝莓列为人类五大健康食品之一 [1]。蓝莓进行商业化栽培时间不足百年，但发展迅速。中国科学院南京植物所于 1987 年开始蓝莓栽培研究，并筛选出适合中国南方地区栽培的优良品种 [2]，南京溧水白马地区种植蓝莓20余年，育苗、生产上都形成了较大的规模，在带动农民致富上作用显著。

目前，生产上农户蓝莓繁苗大多通过扦插繁殖，常规繁殖存在速度慢、品种容易退化的缺点，利用组培快繁技术既可加快繁殖速度又能保持品种的种性 [3]。本试验进行了本地区主栽兔眼蓝莓组培外植体启动培养研究，以期为蓝莓工厂化育苗奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

材料为兔眼蓝莓品种灿烂、粉蓝、顶峰、梯夫蓝、园蓝新生绿枝，于2014年6月取于南京市农科所金陵绿谷现代园艺科技示范园。

1.2 试验方法

将健壮的植株上剪取的新生嫩绿枝条分为前端茎段、中端茎段和后端粗茎段3部分，每部分枝条剪成带2个腋芽枝段作为1个茎段进行后继消毒处理。茎段用流水冲洗 120 min，之后先用50%的84消毒液浸泡消毒30 min，再用无菌水冲洗30 min，后用75%的乙醇浸泡60 s，然后用0.1% HgCl2处理15～30 min，最后用无菌水冲洗5～6次。在超净工作台上将腋芽朝上，接入诱导分化培养基中。以WPM为基本培养基，加蔗糖30 g/L，琼脂8、10、12、14、16、18 g/L，用0.5 mol/L H2SO4调整pH值到6.5。培养室温度为 （25±1） ℃，光照度1 500～2 000 lx，光照时间8 h/d，诱导培养基为WPM+1.0～3.0 mg/L BA+0.5～4.5 mg/L ZT，分别于50 d对结果进行统计。

2 结果与分析

2.1 WPM基础培养基硬度和酸度的优化

由表1可知，在高温加压之前，WPM培养基pH值在6.5左右，高温加压灭菌后，降低到5.8左右，在蓝莓合适生长的酸度范围。从培养基硬度看，灭菌前琼脂含量在8～10 mg/L时硬度适合，而灭菌后琼脂含量在12 mg/L时基本培养基的硬度合适。因此优化出蓝莓基本WPM培养基的琼脂浓度应在12 mg/L，加压灭菌前调整pH值在6.5。

2.2 蓝莓嫩枝不同部位茎段萌发率的差异

由表2可知，蓝莓嫩枝不同部位茎段萌发率存在一定差异，新发枝条的后端粗茎段腋芽的萌发率最高，达到95%，而中端和前端茎段萌发率只有20%。接种50 d后，芽大多已经长成小植株。

2.3 不同激素浓度对兔眼蓝莓不同品种萌发率的影响

由表3可知，不同品种在不同激素配比下，萌发率差异较大，顶峰在较低浓度下（1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L ZT）萌发率最高，达到91%，而园蓝、灿烂在这一浓度配比下萌发率为0。综合比较供试5个品种萌发率，发现1.0 mg/L 6-BA 和1.5 mg/L ZT配比下不同品种兔眼蓝莓都有萌发且萌发率较高。因此，选择WPM+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L ZT培养基作为兔眼蓝莓启动培养的优化培养基。

3 小结

本试验对南京地区主栽兔眼蓝莓组培外植体启动培养进行了研究，灿烂、梯夫蓝、顶峰是适宜鲜食品种，园蓝和粉蓝是适于加工的品种 [4]。优化了WPM基础培养基的适合硬度的琼脂含量和酸度，WPM培养基的琼脂浓度在12 mg/L，加压灭菌前调整pH值为 6.5，可获得适于蓝莓培养的培养基硬度和酸度。新发枝条的后端粗茎段的萌发率可以达到95%，接种50 d后大多成小植株；筛选出适合外植体萌发的激素配比培养基WPM+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L ZT，不同品种兔眼系列蓝莓灿烂、粉蓝、顶峰、梯夫蓝、园蓝萌发率较高。

参考文献：

[1] 李亚东. 蓝莓优质丰产栽培技术[M]. 北京：中国三峡出版社，2007.

[2]黄国辉，姚 平. 蓝莓组培苗瓶外生根的研究[J]. 江苏农业科学，2011，39（4）：227-228.

[3]王淑珍，来文国，周历萍，等. 南高丛蓝莓组培再生技术研究[J]. 现代农业科技，2011（21）：119-120.

[4]聂 飞，文光琴，方品武. 5个兔眼蓝莓品种在黔中地区的表现及栽培评价[J]. 江苏农业科学，2012，40（8）：126-128.