动物检疫过程中材料的采集与方法应用

任 凯

(宁夏青铜峡市农牧和科学技术局751600)

1 动物检疫材料的采集原则

动物检疫材料的采集一般要遵循以下几个原则标准，分别为典型原则、合理原则、适实原则、无菌采样和安全采样。样本的选择要具有代表性，如果是活体采样要挑选典型动物，具体为具有典型症状并且没有接受任何药物治疗的动物。确定动物个体后，对于材料的选择也要求典型，如应该选择病原体含量比较高的部位进行采样。采样是还要选择合理的个体数目，一般而言对于群体发病类的疾病，需要选取至少5个动物个体作为原始样本。同时一定要保证样本的数量可以满足实验需求，还要考虑到备样的可能性。采集样本时要根据具体情况进行分析，比如应该注意采样的节令性，对于病死的动物要求立刻进行采样，尤其在气温比较高的夏季，为了避免动物尸体进一步腐烂，采样时间一般不能超过死亡时间后4小时。采样过程应该为无菌的过程，因为许多样本需要进一步进行微生物学、血液学的相关检测，所以必须符合相关的实验要求。采样过程中的采样人员的安全性也十分重要，相关采样人员要严格按照规范采样流程进行操作，避免可能的感染事故发生，一旦发现疫情也要及时汇报并隔离病源，防止进一步的环境污染和疫情扩散。

2 动物检疫的方法

常见的动物检疫方法根据工作地点和内容的不同可以分为临场、隔离检疫、抽样检疫和实验室检疫。具体的检疫技术又涉及到以下几个方面。

2.1 个体检测

个体检查主要针对具有可疑病态的动物，检验的目的是初步判断动物个体是否有病，然后再进一步进入实验室检测的步骤。个体检测的方法多样，比较常见的包括体温检测、观察动物精神状态、可视粘膜的检查、观察动物排泄物、脉搏检查、呼吸检测等项目。通过个体检查基本可以满足临床检验的目的，并得出临床检验结论。一旦发现可疑的检测对象，要全面扣押整个动物群，根据检测结果对患病动物做进一步的调查分析。

2.2 病理组织学检验

人体肉眼无法准确观测到样品组织的许多病变过程，如肿瘤的发生、脑组织病变等。所以需要借助组织切片和染色技术，如石蜡切片、苏木素染色法等技术。

2.3 病理解剖检验技术

这种方法在对动物尸体的检验中十分常见，对于样本需要先检查其体表特征以排除一些可能的恶性传染病，如炭疽等疾病。同时仔细观察动物尸体的体表状况，如皮肤、毛发、毛孔等细节。记录体表特征后可以进一步检查动物尸体的皮下、脏器、口腔、鼻腔、颈部等部位，一旦发现样本可能携带恶性传染病则禁止解剖。

2.4 细菌性传染病和病毒性传染病的检验

常见的细菌性传染病的检测方法包括显微镜检验法、细菌培养检测法、动物试验和生化试验等方法。对于样品要进行病毒性传染病的检验，这种检验工作主要包括个体检查、病毒培养性状观察、病毒形态学观察和病毒核酸检测等步骤。具体适用于狂犬病、鸡痘病毒等病原体的检测，同时也应用了电镜检测、聚合酶链式反应等检测技术。

2.5 寄生虫的病原检查

寄生虫的病原检验主要包括虫卵检测法，比如用虫卵直接涂片镜检，虫体检测法两种。虫体检测法常见的检验又可以根据昆虫种类分为蠕虫、蜘蛛类、原虫类检测法。

2.6 PCR聚合酶链式反应

此法常用于个体微小、残缺的病毒检验。其工作原理是根据双链DNA在酶和适当的温度下可以解链成为单链，单链DNA在聚合酶和其他辅助蛋白的作用下，遵循碱基互补配对原则复制为两份相同的拷贝子。这个过程被不断循环，可以使得目的基因大量扩增。将扩增产物和参照物进行对比就可以得知目的基因片段的一些信息。该技术用时短，弥补了常规检测技术周期长的缺陷。此外该技术不需要活体病毒，有效避免了工作人员和病毒的接触，减少感染几率，同时降低了对环境的污染。

2.7 免疫学检验技术

此法的特点是操作简便、耗时较短，并且结果可靠性高。多种传染性疾病的抗体、阳性血清都广泛地被开发为诊断试剂等商品，所以大大简化了检测过程，检测时首先要获取样本组织、血清等作为实验材料，选取适当的实验操作就可以完成检测工作。对于血清检测技术而言，常见的反应包括凝聚反应（直接、间接凝聚反应等）、沉淀反应（琼脂扩散反应等）、标记抗体技术（ELISA等）。

2.8 变态反应检测技术

变态反应（allergy）是指接触过抗原的机体再次接触同一抗原时，会产生免疫损伤反应，有可能引起疾病，属于特异性免疫应答反应。日常生活中的皮肤过敏、红肿等就属于这种反应。变态反应的特异性和敏感度较高，常被用于结核病、副结核、鼻疽疾病的检验。

[1]王柏学.动物检疫样品的采集和检疫方法初探.吉林畜牧兽医，2009.

[2]何国荣.动物检疫材料的采集和检疫方法.畜牧与饲料科学，2012.

[3]尚淑芬.动物检疫工作存在的问题及其对策.山西农业（畜牧兽医）2013.