产前筛查梅毒螺旋体的三种方法在梅毒诊断中的研究

梁服泉　李秀姿　吕庆良

[摘要] 目的 探讨三种不同检测方法在梅毒诊断中的应用价值。 方法 选取本院2014年7～12月收治的500例孕妇作为研究对象，分别通过TPPA法、胶体金法和TRUST进行筛查，比较其检测结果。 结果 在500例妊娠期孕妇中，梅毒阳性52例，阴性448例。三种检测方法的敏感度、特异度、阴性预测值和阳性预测值比较，差异无统计学意义（P>0.05）。56例TPPA阳性标本中，53例TRUST滴度阳性，3例血清原倍为阴性，通过血清64倍稀释后为假阴性。 结论 三种检测方法在产前筛查梅毒螺旋体检测中各有优势。

[关键词] 产前筛查；梅毒螺旋体；梅毒；诊断

[中图分类号] R759.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2015）05（c）-0119-03

[Abstract] Objective To explore the application value of three different detection methods in the diagnosis of syphilis. Methods 500 pregnant women from July 2014 to December in our hospital were selected as the research objects.The detection methods of TPPA，colloidal gold and TRUST for screening was used respectively.The result was compared. Results Among 500 cases of pregnant women during pregnancy，52 cases were in syphilis positive，and the rest were in negative.There was no significant difference in sensitivity，specificity，negative predictive value or positive predictive value by these three detection methods （P>0.05）.Among 56 TPPA positive specimens，53 casess were in positive titer by TRUST，and the rest three specimens were negative by the original serum，which were false negative when diluted by 64 times. Conclusion Three detection methods have the advantages in the detection of the prenatal screening for syphilis in the diagnosis of syphilis.

[Key words] Prenatal screening；Treponema pallidum；Syphilis；Diagnosis

妊娠合并梅毒的临床分期以潜伏期为主，临床症状、体征不明显，很容易出现误诊和漏诊，因此对于高危梅毒孕妇的常规筛查显得尤其重要，如果能够及早筛查和诊断妊娠期合并梅毒感染，并给予科学有效的治疗，那么就能够有效预防因妊娠梅毒导致的早产和死胎。本研究通过产前筛查梅毒螺旋体的三种检测方法在梅毒诊断中的情况进行分析，探讨不同检测方法在梅毒诊断中的应用效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取珠海市香洲区人民医院和斗门侨立中医院2014年7～12月收治的500例孕妇作为研究对象，通过筛查，52例为妊娠期梅毒孕妇，年龄为20～40岁，平均（25.0±10.1）岁；病程1～4周，平均（2.2±1.5）周；初产妇32例，经产妇20例；早孕19例，中孕20例，晚孕13例。所有研究对象均通过TPPA、胶体金法和TRUST进行梅毒螺旋体的产前筛查。

1.2 方法

抽取空腹静脉血5 ml，分别采用不同的方法进行检测。

1.2.1 TPPA组 通过微量滴管将血清稀释液滴入微量反应板第1孔中，每次滴入25 μl，共计100 μl，从第2孔至第4孔各滴入25 μl，通过移液管将25 μl样品转移到第1孔，然后再以2 n的方式从第1孔稀释至第4孔。在第3孔内滴入未致敏粒子，在第4孔滴入致敏粒子，通过平板振荡器对微量反应板内容物混合30 s，加盖后在室温下静置2 h，观察记录结果。（-）：粒子呈现纽扣状凝集，外周边缘均匀平滑；（±）：粒子形成小环状，边缘平滑均匀；（+）：粒子环变大，外周边缘杂乱不均匀；（++）：形成均一的凝集，在粒子底部呈现膜状延伸形状。

1.2.2 胶体金法组 将待测样品、试纸和检测材料放至室温，测试条有剪头的一端插入样本容器内，反应10 s，平放15 min，观察显示结果。（+）：检测线的位置和对照线的位置各有一条反应线出现；（-）：只是在对照线的位置有一条反应线出现。

1.2.3 TRUST组 在室温下，将0.05 ml待测血清放置到试验卡圈之中，涂匀，向内滴加1滴TRUST试剂，100 r/min轻轻摇动8 min，观察实验结果。根据鉴定标准进行鉴定和记录结果。TRUST滴度测定：吸取TPPA阳性标本，通过生理盐水进行倍比系列的稀释，主要包括1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128，在相应的孔内加入待测样品和稀释血清，阴性对照、阳性对照各50 μl，均匀涂开，通过塑料吸管吸取TRUST抗原，每孔内垂直滴加20 μl，按照100 r/min均匀摇动8 min，然后观察结果。阳性判定为粉红色凝集物，阴性判定为只有粉红色的均匀沉淀物但没有凝集物。

1.3 观察指标

观察三种检测方法的阴性、阳性结果，比较其敏感度、特异度、阴性预测值和阳性预测值情况，观察TRUST滴度检测情况。

1.4 统计学处理

采用SPSS 15.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以x±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三种检测方法阴性、阳性结果的比较

三种检测方法的阴性、阳性结果比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

2.2 三种检测方法敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值的比较

三种检测方法的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表2）。

2.3 TRUST滴度检测情况

56例TPPA阳性标本中，53例TRUST滴度阳性，3例血清原倍为阴性，通过血清64倍稀释后为假阴性。

3 讨论

梅毒是人体感染梅毒螺旋体后引起的一种性传播疾病，以生殖器溃疡为主要临床表现[5-6]。依据其传播途径不同可分为获得性梅毒、先天性梅毒和妊娠梅毒[7-8]。随着人们生活方式和婚育观念的变化，妊娠梅毒的发生率明显增高，且多表现为潜伏性梅毒，如果不能进行有效的治疗，可能对胎儿造成严重影响。有效地治疗妊娠梅毒对于妊娠结局具有重要意义。

研究显示，妊娠合并梅毒的临床症状不明显，易发生误诊。通过准确的检测方式进行筛查是及早发现和及早治疗妊娠梅毒、提高妊娠结局质量的关键所在。孕妇在妊娠期首次检查一定要进行梅毒螺旋体检测，以便保证母婴安全[9-10]。梅毒螺旋体很容易在胎儿的肝、肺、脾、肾上腺和机体组织中大量繁殖，从而造成妊娠6周之后出现流产、死胎及死产等。一期、二期梅毒的传染性最强，如果不能及时治疗，很容易感染胎儿，感染率达到30%。感染超过2年的晚期梅毒，虽然没有明显的梅毒性损害临床表现，其性接触也已经没有传染性，但是其感染胎儿的概率仍然达到10%，即便是胎儿可以幸存，也可能转为胎传梅毒儿，其病情较复杂。早期临床表现可能有皮肤大疱、皮疹、肝腺肿大、淋巴结肿大等，晚期容易发生楔齿状、间质性角膜炎、骨膜炎、神经性耳聋，致残率和致死率均较高，因此孕前和孕期一定要排除梅毒感染，各级医师在孕前和早孕期指导时，必须宣传和告知，以确保病例的早期发现和规范治疗。探寻快速、有效、科学的梅毒诊断方法在孕前和早孕期进行筛查有很重要的临床意义。

梅毒血清学检查非梅毒螺旋体抗原血清试验是梅毒的常规筛查方法，包括性病研究实验室玻片试验（VDRL）、血清不加热反应素玻片试验（USR）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）。每种梅毒检测方法的检测对象各不相同，诊断效果也存在差异。TRUST试剂采用VDRL抗原重悬于含有甲苯胺红的特制溶液中制成，检测人血清或血浆中的反应素，其操作简便快捷，但是易受到一些自身免疫性疾病的影响，进而出现假阳性。TPPA法通过把梅毒的精致菌体成分包被于人工载体明胶颗粒上，致敏粒子和检测样品中的梅毒螺旋体抗体进行凝集反应，从而将血清和血浆中的梅毒螺旋体抗体检测出来，从而对抗体的效价进行测定，其操作简单，适用于大量样品的筛查，测定过程反应时间短，2 h之后基本都可以进行结果的判定[11-12]。

本研究选取珠海市香洲区人民医院和斗门侨立中医院符合条件的病例作为研究对象，采用TPPA、胶体金法和TRUST分别检测妊娠期妇女梅毒，结果显示，在500例妊娠期孕妇中，梅毒阳性52例，阴性448例；三种方法的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值比较，差异无统计学意义。另外，在56例TPPA阳性标本中，53例TRUST滴度阳性，3例血清原倍为阴性，3例中通过血清64倍稀释为假阴性，提示TRUST滴度检测过程中不能只做原倍血清检测，同时还要做倍比稀释后的血清滴度检测，从而避免了TRUST滴度假阴性的出现，进一步提高了产前筛查梅毒螺旋体的准确率。

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（收稿日期：2015-01-09 本文编辑：祁海文）