产后三泡外洗浓缩液的薄层色谱鉴别

冯昀熠潘 智李 淳黎 洁游 燕夏 铭

（1.广西壮族自治区桂林市中医医院，广西 桂林 514002；2.贵阳中医学院，贵州 贵阳 541000）

产后三泡外洗浓缩液的薄层色谱鉴别

冯昀熠1潘 智1李 淳1黎 洁1游 燕1夏 铭2

（1.广西壮族自治区桂林市中医医院，广西 桂林 514002；2.贵阳中医学院，贵州 贵阳 541000）

目的：建立产后三泡外洗浓缩液的薄层色谱鉴别法。方法：飞龙掌血采用氨水碱化的三氯甲烷提取，在正己烷-三氯甲烷-丙酮（15:10:2）展开。肿节风用石油醚萃取后再用三氯甲烷提取，在甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)展开。结果：飞龙掌血斑点喷以改良碘化铋钾试液后显色明显。肿节风在365nm下检视有荧光斑点，氨熏后斑点变为黄绿色。

产后三泡；飞龙掌血；肿节风；薄层色谱鉴别

瑶医药是我国传统医药的重要组成部分，具有显著的民族性、地域性和传统性，是民族地区重要的医药卫生资源。近年来，瑶医药在防治多种疑难危重疾病中取得了卓越的成效，然而，由于缺乏系统整理和研究，许多疗效明显的瑶药制备工艺落后，作用机理不明，难以得到推广应用，不少已濒临失传。

产后三泡外洗浓缩液是来源于金秀瑶医医院的协定处方，其功能活血祛瘀、益气养神、催乳。用于产妇产后恢复分娩疲劳，增强免疫力，减少恶露，催乳生乳。为了更好地推广应用，将其以成方制剂的方式进行制剂研究，为推广瑶医药积累一些实用经验。

本文建立了2个药材的薄层色谱鉴别标准，飞龙掌血为芸香科植物飞龙掌血Toddalia asiatica Lam的根，肿节风为金栗兰科草珊瑚Sarcandra glabra(Thunb. )Nakai的干燥全草

1 仪器与试药

1.1 仪器

电热鼓风干燥箱101A-3B型；SP-Ⅰ型手动点样器；TD-Ⅰ型手动薄层铺板机。

1.2 试药

硅胶板（青岛海洋化工厂）；无水乙醇，甲醇，甲酸，三氯甲烷，乙酸乙酯，三氯化铁，铁氰化钾，石油醚（60～90℃），二硝基苯肼，甲苯，冰醋酸均为分析纯试剂。

产后三泡外洗浓缩液：批号为20121124，20121125，20121126。

1.3 对照药材

飞龙掌血对照药材（批号121188-200502）、肿节风对照药材(121048-201205)

2 薄层鉴别

2.1 飞龙掌血TLC鉴别及方法学考察

2.1.1 飞龙掌血TLC鉴别

取产后三泡外洗浓缩液30mL，置蒸发皿中，加盐酸10ml，蒸干（除去树脂、色素等），残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，加氨水2ml（pH值为11），用三氯甲烷60ml分两次振摇提取，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取飞龙掌血药材3g，加80ml水，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约30ml，同法制成对照药材溶液。分别点样5，10μl，展开剂：三氯甲烷∶甲醇∶浓氨试液（30∶1∶0.2），紫外光灯（365nm）下检视；喷以改良碘化铋钾试液。结果：紫外光灯（365nm）无显主斑点，喷以改良碘化铋钾试液，对照上方有一主斑点，样品无。

取本品30mL置分液漏斗中，加浓氨水2ml，用三氯甲烷60ml分两次振摇提取，分取三氯甲烷液，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取飞龙掌血药材3g，加80ml水，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约30ml，同法制成对照药材溶液和阴性溶液。点样：分别点样5，10μl。展开剂：正己烷-三氯甲烷-丙酮（15∶10∶2）。显色：喷以改良碘化铋钾试液。

鉴别结果见图1。供试品样品色谱中，在与对照药材色谱相应位置显相同颜色的斑点，而飞龙掌血阴性样品溶液在此相应位置无斑点显示，故飞龙掌血阴性样品溶液对此鉴别无干扰。

鉴别飞龙掌血质量标准为：将30mL产后三泡外洗浓缩液置分液漏斗中，加浓氨水2ml，用三氯甲烷60ml振摇提取2次，将三氯甲烷液蒸干，残渣加无水乙醇1ml作为供试品溶液。另取飞龙掌血药材3g，加80ml水，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约30ml，同法制成对照药材溶液和阴性溶液。

点样：分别点样5，10μl。

展开剂：正己烷-三氯甲烷-丙酮（15﹕10﹕2）。

显色：喷以改良碘化铋钾试液。

图1 飞龙掌血TLC图

2.1.2 方法学考察

分别采用三种硅胶G板，在不同温湿度下按照2.1.1试验，条件如下：硅胶G预制板青岛海洋化工厂分厂T:10℃RH:75%；硅胶G预制板，上海国药集团化学试剂T:17℃RH:78%；硅胶G自制板T:25℃ RH:85%；以上三种板均能鉴别出飞龙掌血，且阴性无干扰。

2.2 肿节风TLC鉴别及方法学考察

2.2.1 肿节风TLC鉴别

分别取本品50mL，置分液漏斗中，用石油醚（60℃～90℃）振摇提取2次，每次25ml，弃去石油醚液，再用三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取肿节风对照药材2g，加80ml水，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约50ml，同法制成对照药材溶液。再取异嗪皮啶对照品1mg，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述供试品溶液与对照药材溶液各5、10、15μl，对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（9∶4∶1）[1]为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；置氨蒸气中熏10分钟，与对照品色谱相应的斑点变为黄绿色，而肿节风阴性样品溶液在此相应位置无斑点显示，故肿节风阴性样品溶液对此鉴别无干扰。

图2 肿节风TLC图

鉴别肿节风质量标准为：取产后三泡外洗浓缩液50mL，置分液漏斗中，用石油醚(60℃～90℃)振摇提取2次，每次25ml，弃去石油醚液，再用三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲液，蒸干，残渣加甲醇1ml作为供试品溶液。另取肿节风对照药材2g，加80ml水，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至50ml，同法制成对照药材溶液。再取异嗪皮啶对照品1mg，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。点样，样品与对照药材溶液各10μl，对照品溶液4μl。展开剂：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)

显色：置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；置氨蒸气中熏10分钟，与对照品色谱相应的斑点变为黄绿色。

2.2.2 方法学考察

分别采用三种硅胶G板，在不同温湿度下按照2.2.1试验，条件如下：硅胶G预制板青岛海洋化工厂分厂T:8℃RH:95%；硅胶G预制板，上海国药集团化学试剂T:17℃RH:58%；硅胶G自制板T:30℃ RH:65%；以上三种板和温湿度条件均能鉴别出肿节风，且阴性无干扰。

3 讨论

色素等），再将其碱化后用三氯甲烷液萃取，但此法样品无斑点。后直接用碱化的三氯甲烷萃取效果良好。

展开剂还曾试过三氯甲烷∶丙酮（30∶1），主斑点显示不清，用正己烷-三氯甲烷-丙酮（15∶10∶2）Rf值稍低，但斑点清晰，分离效果好。

（2）预试验鉴别肿节风，以乙酸乙酯为提取溶剂，易乳化，很难分层；以三氯甲烷为提取溶剂，易乳化，放置后可分层，供试品色谱图中与异嗪皮啶对照品斑点上方有一干扰斑点；用石油醚（60℃～90℃）除去部分脂溶性成，再以三氯甲烷为提取溶剂，易乳化，放置后可分层，供试品色谱图中与异嗪皮啶对照品斑点上方也有一干扰斑点，但经置氨蒸气中干扰小斑点清晰可辨。

[1] 国家药典委员会.中国药典2010年版[M].北京:中国医药科技出版社,2010:208.

（1）预实验鉴别飞龙掌血，开始考虑加盐酸（除去树脂、

Postpartum three foam concentrate Washing chromatographic identification of TLC

Objective: To develop postpartum three foam concentrate Washing TLC method. Methods: Toddalia asiatica extract using chloroform alkaline ammonia in n-hexane-chloroform-acetone (15: 10: 2) to expand. Zhongjiefeng extracted with petroleum ether and then extracted with chloroform, toluene - ethyl acetate - formic acid (9:4:1) started. Results: dragon palm sprayed with blood spots after the modified bismuth potassium iodide test solution color is obvious. Zhongjiefeng view at 365nm fluorescent spots, Ammonia spot turns yellow-green.

Postpartum three bubble; Toddalia asiatica; Zhongjiefeng; chromatographic identification of TLC

R9

A

1008-1151(2015)03-0098-02

2015-02-11

广西卫生厅中医药科技专项（GZYZ1126）。

冯昀熠，男，广西壮族自治区桂林市中医医院中药师，硕士研究生，从事中药新药开发研究。