索拉非尼对肝癌晚期患者血清肝癌标志物的影响

贺旭辉，陈勐，彭晋修，李建新，张学强

(河北省邢台市第二医院 肝病三科，河北 邢台 054001)



索拉非尼对肝癌晚期患者血清肝癌标志物的影响

贺旭辉，陈勐，彭晋修，李建新，张学强

(河北省邢台市第二医院 肝病三科，河北 邢台 054001)

目的 探讨索拉非尼对肝癌晚期患者血清肝癌标志物的影响及临床意义。方法 选取2014年2月～2014年12月于河北省邢台市第二医院肿瘤科已确诊为肝癌晚期的患者101例，根据随机数字表法分为2组：对照组50例，临床常规治疗；实验组51例，在对照组治疗基础上加用索拉非尼。比较2组患者的生存时间、不良反应、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α)和骨桥蛋白(osteopontin，OPN)水平的变化，对比分析2种治疗方法的临床疗效。结果 经随访，实验组生存期高于对照组(P<0.05)；与对照组相比，实验组血清VEGF、CTGF、HIF-1α、OPN、AFP、CEA及CA199水平均较低(P<0.05,P<0.01)。2组总不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论 索拉非尼能有效延长肝癌患者生存期，降低血清VEGF、CTGF、HIF-1α和OPN水平。

索拉非尼；晚期肝癌；血管内皮生长因子；结缔组织生长因子；缺氧诱导因子-1α；骨桥蛋白

据流行病学统计[1]，肝癌死亡率位居我国恶性肿瘤死亡率的第二位，严重危害人们的身心健康，其发病机制目前并不明确，根据现有文献分析，乙肝病毒和丙肝病毒感染、黄曲霉素、饮水污染、大量饮酒、肝硬化、性激素、亚硝胺类物质等都与肝癌的发病关系密切。大多数肝癌患者在发现时已处于晚期，受肝癌转移、肿瘤体积、数目等限制已经不适合手术，临床适合手术切除条件的肝癌患者不足25%[1]。索拉非尼[2-3](sorafenib)是一种新近研发的新型多靶向性治疗肿瘤的口服药物，能够靶向性作用于某些蛋白的受体，在肿瘤生长过程中起着分子开关样的作用，临床已有将之应用于治疗肝肿瘤、肾肿瘤的报道，取得了较为满意的疗效。研究发现，肝癌术后复发、转移以及侵袭是导致患者死亡的主要原因，而血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)、缺氧诱导因子-l(hypoxia inducible factor-l，HIF-1α)和骨桥蛋白(osteopontin，OPN)等因子在肝癌转移、侵袭中具有重要作用。本研究通过对肝癌患者血清VEGF、CTGF、HIF-1α和OPN水平进行分析研究，以探讨经索拉非尼的治疗机制，为肝癌患者的诊段和治疗提供新的思路和方法。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2014年2月～2014年12月于河北省邢台市第二医院肿瘤科诊断为晚期肝癌无法手术治疗的患者101例，采用随机数字表法分为实验组和对照组。其中实验组51例，男性32例，女性19例，年龄35～78岁，平均(63.2±8.3)岁；对照组50例，男性32例，女性18例，年龄39～79岁，平均(64.1±8.4)岁，本研究获河北省邢台市第二医院伦理委员会批准，并长期跟踪。

1.2 诊断及排除标准

1.2.1 参照2013年第8版《外科学》[4]教材中关于原发性肝癌的病理学诊断标准以及临床诊断标准：①肝区疼痛，多为持续性钝痛、胀痛或刺痛；②全身乏力、消瘦、食欲减退、腹胀、恶心、呕吐、腹泻等消化系统症状；③肝肿大呈进行性进展，质地坚硬，边缘不规则，表面有大小不等的结节或包块；④血清甲胎蛋白(AFP)≥400 μg/L，并能排除妊娠、活动性肝病、生殖腺胚胎源性肿瘤等；⑤B超或CT检查可示肿瘤的大小、形态、部位；⑥肝脏病理检查结果为原发性肝癌。

1.2.2 排除标准：①不愿参与本研究或不符合诊断标准者；②患有艾滋病等具有较重传染性疾病患者；③其他肿瘤转移到肝脏者；④2周内使用其他药物药物者；⑤妊娠或哺乳期妇女；⑥合并有严重心、肾功能不全疾病患者；⑦对索拉非尼过敏者；⑧患有精神类疾病不能配合研究者。

1.3 治疗方法 严格按照2011年《中国肝癌共识》[5]中关于原发性肝癌的治疗标准予以护肝，镇痛等常规治疗：对照组给予复方苦参注射液(山西振东制药股份有限公司，批准文号：国药准字Z14021231)0.6 g，以5%葡萄糖注射液250 mL稀释，每天1次静脉滴注；胸腺肽α注射液(云南南诏药业有限公司，批准文号：国药准字H53021765)1.6 mg，每周2次皮下注射。实验组在与对照组相同的临床常规对症治疗基础上加用索拉非尼(拜耳先灵医药，批准文号：H20060296)，400 mg/次，每天2次口服。4周为1个疗程，治疗1个疗程。在治疗过程中，如并发其他的临床症状，均予相应的对症处理。

1.4 观察指标及检测方法 所有研究对象均于治疗前、治疗4周后，空腹8 h从肘静脉抽取静脉血15 mL，置于真空采血管中，于室温下用水平离心机以3000 r/min转速离心20 min，分离血清。

1.4.1 血清VEGF、CTGF、HIF-1α和OPN检测：采用放射免疫法检测水平变化，试剂盒(sigma公司，美国)，严格按照试剂盒说明进行操作。

1.4.2 血清肿瘤标记物检测：本研究采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法[全自动酶标仪(高质量318C，中国上海)]检测所有研究对象血清中甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen，CEA)、糖抗原199(carbohydrate antigen 19-9，CA199)的浓度水平。试剂盒由郑州安塞生物科技有限公司提供，其操作方法按照说明书严格操作。

1.4.3 不良反应：观察2组患者治疗过程中的不良反应。

1.4.4 随访：随访2组患者生存时间。生存时间计算方法：起点(确诊日期)～止点(死亡日期)，随访频率：每2周进行1次电话随访。

2 结果

2.1 2组患者一般资料比较 2组患者的性别、年龄、平均年龄、病理分期及转移情况等比较差异无统计学意义，见表1。

表1 2组患者一般资料比较Tab.1 Comparison of the baseline between two groups

2.2 2组患者生存时间比较 实验组患者生存时间长于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 2组患者生存时间比较 ±s，月)Tab.2 Comparison of survival ±s，month)

#P<0.05，与对照组比较，compared with control group

2.3 2组患者治疗期间不良反应情况 本研究中，实验组患者发生血压升高1例，皮疹、手足皮肤反应各5例，腹泻、局部刺激各2例，肝功损害1例；对照组患者发生血压上升1例，皮疹、手足皮肤反应0例，腹泻4例，肝功损害、局部刺激各3例。2组不良反应比较差异无统计学意义。

2.4 2组患者血清VEGF、CTGF、HIF-1α、OPN水平变化 治疗4周后，实验组患者血清VEGF、CTGF水平较对照组降低(P<0.05)；实验组患者血清HIF-1α、OPN水平较对照组降低(P<0.01)，见表3。

表3 2组患者血清VEGF、CTGF、HIF-1α、OPN水平变化比较Tab.3 Comparison of serum VEGF，CTGF，HIF-1α and OPN levels between two ±s)

*P<0.05，**P<0.01，与同组治疗前比较，compared with the same group before treatment；#P<0.05，##P<0.01，与对照组治疗后比较，compared with control group post-treatment

2.5 2组患者血清肿瘤标志物比较 本研究中，治疗4周后，实验组患者血清AFP、CEA、CA199水平均较对照组显著降低(P<0.05)。见表4。

表4 2组患者血清肿瘤标志物比较±s)Tab.4 Comparison of serum tumor markers between two ±s)

**P<0.01与同组治疗前比较，compared with the same group before treatment；##P<0.01，与治疗后对照组比较，compared with control group post-treatment

3 讨论

肝癌是全世界第五位常见的恶性肿瘤，也是我国好发的恶性肿瘤之一，占全世界肝癌患者的55%以上，其发病率、死亡率之高已严重危害我国人民的健康[6]。目前对于原发性肝癌的治疗主要以外科手术、肝移植、射频消融术、肝动脉化疗栓塞术及多靶向治疗等方法为主，但晚期不能切除的肝癌预后较差，其生存期仅在7个月左右[7]。多靶向治疗是近几年来发展的应用于治疗肝癌的新疗法，并受到广泛关注。索拉非尼是经过美国FDA认定的首个用于系统性治疗肝癌的一线药物，是一种口服的靶向治疗药物。研究发现[8]索拉非尼能够通过作用于VEGF受体通路，达到抑制血管形成，从而抑制肿瘤细胞增生。

本研究发现，索拉非尼能有效延长原发性肝癌的生存期。实验组患者经4周治疗后，其生存期明显长于对照组(P<0.05)。有研究发现[9]，索拉非尼可以通过抑制肝癌细胞基因的表达，从而达到抑制肝癌细胞增殖的作用，亦有研究提出[10]索拉非尼能加速肝癌细胞死亡，这可能是本研究中实验组患者生存期长于对照组的原因。但是，对于索拉非尼抑制肝癌细胞增殖以及加速肝癌细胞死亡的具体机制，临床研究并不明确，尚需进一步研究。

应用索拉非尼治疗肝癌具有一定的不良反应。据文献统计[11]，索拉非尼所致的不良发应主要集中在以下方面：皮疹，呕吐、腹泻等消化道症状，血压上升、手足皮肤反应、局部刺激以及肝功损害等。在本研究中，对于2组药物的不良反应亦进行了统计，对照组患者发生皮疹和手足皮肤反应的患者为0，而实验组在应用索拉非尼后各有5例发生。但2组患者的不良反应总数差异比较却无统计学意义，可能与本实验样本量较小有关。

本研究结果发现，索拉非尼能有效降低原发性肝癌患者血清VEGF、CTGF、HIF-1α、OPN等指标水平。VEGF是一种能够特异性作用于血管内皮细胞并加速其分裂的多功能二聚体糖蛋白，在正常人体组织中表达水平并不高，仅在某些供血丰富的组织中其水平略高。但是研究证明[12]，在肿瘤患者体内VEGF则会高水平表达，其原因可能是与肿瘤细胞丰富的供血以及旺盛的新陈代谢有关。在本研究中，2组患者在治疗前血清VEGF高水平表达，但在治疗结束后，2组患者血清VEGF均有所降低，且实验组VEGF水平低于对照组(均P<0.05)。研究证明[13]VEGF在肝癌患者体内高水平表达的主要原因与肿瘤缺氧有关，在肿瘤快速生长时，肿瘤细胞相对供氧不足而促使VEGF生成增多以改善其供氧。由此可见，本实验中实验组VEGF水平大幅度降低，其原因可能与索拉非尼能抑制肝癌细胞增殖、加速肝癌细胞死亡的作用有关，实验组患者应用索拉非尼后，肿瘤生长得到抑制其供血不足得到相对缓解，因此VEGF水平随之下降。研究表明[14]CTGF的高水平表达与肝癌、乳腺癌等肿瘤的预后不良有密切关系。在本研究结果中，实验组应用索拉非尼后其血清CTGF水平明显降低，这一结果可能是实验组患者生存期长于对照组的原因之一。有研究证明[15]CTGF浓度与肝内外转移及淋巴结转移呈正相关，可见控制CTGF的水平是控制肝癌侵袭、转移的重要手段。HIF-1α已被证实与肿瘤细胞代谢、新生血管形成以及肿瘤的生长、转移具有重要关系，且在缺氧的环境下HIF-1α能够诱导VEGF的高度表达而刺激新生血管形成，导致肿瘤生长[16]。有研究指出[17]，VEGF与HIF-1 α的水平呈正相关，这一结论可能是本研究中实验组患者血清HIF-1α、VEGF水平均降低的原因。OPN是细胞基质中的一种分泌型糖蛋白，主要参与骨代谢、新生血管生成、动脉硬化等病理反应，本研究认为在肿瘤组织中OPN能够高度表达，且已证实OPN在胃癌的发生、发展中有重要的作用[18]。在本研究中实验组患者OPN水平明显降低，其原因可能是索拉非尼抑制肝癌细胞增殖、加速肝癌细胞死亡。

结果发现，索拉非尼能有效降低原发性肝癌患者血清肿瘤标志物水平。肿瘤标志物是在肿瘤发展过程中由肿瘤细胞合成、释放或者是机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。甲胎蛋白是用作诊断原发性肝癌的首要指标，在肝癌的早期诊断和鉴别诊断中具有重要意义，但其敏感性并不高；癌胚抗原是一种在消化系统肿瘤患者血清高度表达的糖蛋白；糖抗原199(CA199)是近年发现并用于诊断原发性肝癌的肿瘤标志物，具有较高的敏感性。在本研究中，表5显示实验组患者血清AFP、CEA、CA199水平较对照组显著降低，其原因可能与实验组患者在应用索拉非尼后VEGF水平降低有关，说明其肿瘤细胞的增殖得到相对控制，因此肿瘤标记物水平也随之降低[19]。

本研究通过索拉非尼对101例原发性肝癌患者的治疗疗效、安全性、肿瘤标志物、血清VEGF、CTGF、HIF-1α、OPN等指标水平动态变化进行分析，证实了索拉非尼对原发性肝癌患者具有更好的疗效，索拉非尼对肝癌标志物的干预作用可能是其治疗机制之一。

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(编校：王俨俨)

Effect of sorafenib on serum hepatoma marker in patients with advanced hepatocellular carcinoma

HE Xu-hui, CHEN Meng, PENG Jin-xiu, LI Jian-xin, ZHANG Xue-qiang

(Department of Liver Disease, The Second Hospital of Xingtai City, Xingtai 054001, China)

ObjectiveTo investigate effect of sorafenib on serum hepatoma marker in patients with advanced hepatocellular carcinoma.Methods101 patients with advanced hepatocellular carcinoma were selected, and divided into two groups.50 cases in control group were treated with routine clinical treatment, and 51 cases in experimental group were treated with sorafenib on the basis of control group.The survival time, adverse reactions, VEGF, CTGF, HIF-1 and OPN levels were compared after the treatment.ResultsThe survival time of experimental group was higher than control group (P<0.05).Compared with control group, the serum levels of VEGF、CTGF，HIF-1, OPN，AFP, CEA, and CA199 in experiment group were lower (P<0.05,P<0.01).There were no significant differences of total adverse reactions between experimental group and control group.ConclusionSorafenib can effectively prolong survival time of patients with advanced hepatocellular carcinoma, reduce serum VEGF, CTGF, HIF-1 alpha and OPN levels.

sorafenib; advanced hepatocellular carcinoma; vascular endothelial growth factor; connective tissue growth factor; hypoxia inducible factor -1α; osteopontin

贺旭辉，男，本科，副主任医师，研究方向：肝细胞癌药物治疗与介入治疗临床观察，E-mail：hxh15931968102@126.com。

R735.7

A

1005-1678(2015)05-0091-04