HPLC法测定百癣夏塔热片浸膏中没食子酸的含量

王静 陈秀娟 李彩霞 刘丹 谢飞

摘 要：目的 建立用HPLC法測定百癣夏塔热片浸膏中没食子酸含量的方法。方法 色谱柱为Eclipse plus C18（5um，4.6×250mm），流动相为甲醇-0.1%磷酸（6：94），流速1.000ml/min，检测波长270nm，柱温30℃。结果 没食子酸在10.55～84.40ug/ml间呈良好的线性关系，r= 0.9996，平均回收率99.72%，RSD=1.64%。结论 该方法可用于百癣夏塔热片浸膏没食子酸含量的测定和质量控制。

关键词：百癣夏塔热片；浸膏；HPLC；没食子酸

百癣夏塔热片收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》维吾尔药分册， 由芦荟 、地锦草、西青果、诃子肉、毛诃子肉、司卡摩尼亚脂等制成。具有清除异常粘液质、胆液质及败血，消肿止痒的功能。用于治疗手癣、体癣、足癣、花斑癣、银屑病、过敏性皮炎、带状疱疹、痤疮等[1]。现执行的标准为国家食品药品监督管理局（试行）YBZ03372004，标准中规定成品的没食子酸（C7H4O5）不得少于1.8mg/片（0.4g）[2]，为保证其成品的没食子酸含量合格，我们采用 HPLC法[3]测定其浸膏的没食子酸含量，以便更好的控制百癣夏塔热片的质量。

1 仪器和试剂

1.1主要仪器：AL104电子天平，BT125D电子天平，LC-10ATVP 液相色谱仪，KQ2200DB型数控超声波清洗器。

1.2试剂：色谱纯甲醇、分析纯磷酸、没食子酸标准品（购自中国药品生物制品检定所，批号110831-200302）、超纯水。

1.3试药：百癣浸膏，批号：140316、140934、140935、1401110， 由新疆银朵兰维药股份有限公司提取车间提供。

2 实验方法

2.1色谱条件：色谱柱为Eclipse plus C18（5um，4.6×250mm），流动相为甲醇-0.1%磷酸（6：94），流速1.0ml/min，检测波长270nm，柱温30℃。进样量10ul。

2.2对照品溶液的制备：精密称取没食子酸标准品0.10550g，加甲醇定容至100ml容量瓶，的浓度为105.50 ug/ml的没食子酸标准品母液。

2.3供试品溶液的制备：取约0.7g百癣浸膏置于100ml的三角瓶内，精确称定，加甲醇约60ml，用玻璃棒将浸膏搅散，超声处理30min，溶液转移至100ml容量瓶内，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，1ml移液管精密量取滤液1ml，置10ml的容量瓶内，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤器过滤，即得。

2.4线性关系的考察：移液管分别精密吸取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ml没食子酸母液于10ml的容量瓶内，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别得到浓度为10.550ug/ml、21.100ug/ml、42.200ug/ml、63.300ug/ml、84.400ug/ml的没食子酸标准品溶液，过滤，依次进样各10μl注入液相色谱仪，按2.1项下色谱条件，以没食子酸标准品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作标准曲线，得回归方程：y = 18114x + 3300，r=0.9996结果表明没食子酸标准品在10.55～84.40ug/ml范围内线性关系良好。

2.5精密度实验：精密吸取上述没食子酸标准品溶液（浓度21.100ug/ml）10ul，各连续进样6次，记录没食子酸峰面积积分值，结果RSD=0.93%，表明仪器精密度良好。

2.6稳定性实验：取同一批供试品（批号：140316），按照2.3供试品溶液的配制方法配置，室温放置。分别在0，2，6，24小时测定没食子酸峰面积。结果百癣浸膏样品没食子酸峰面积积分RSD=1.28%，表明本方法24小时内供试品溶液稳定。

2.7 重复性实验：取同一批浸膏（批号：140316）的供试品6份，按照2.3供试品溶液的配制方法配置，计算没食子酸含量及RSD值。结果RSD=0.76%，说明测定的方法重复性较好。

2.8 加样回收实验：取已准确测定的百癣浸膏（批号：140316）约0.35g，共9份，精密称定，置于100ml具塞三角瓶，分别精密加入没食子酸标准品溶液适量。按照上述2.3供试品溶液的配制方法处理，计算加样回收率。结果下表1。结果表明，高、中、低3个质量浓度的加样回收率为99.72%，RSD=1.64%（n=9）。

2.9样品测定：取3批百癣浸膏，按照2.3供试品溶液的配制方法配置，测定没食子酸含量，各批次浸膏中没食子酸含量分别为41.10 mg/g、42.58 mg/g、39.85 mg/g（n=3）。

3 讨论

本试验采用HPLC法测定百癣夏塔热片浸膏中没食子酸含量，色谱峰之间能有效的分离，精密度、稳定性、重复性较好，回收率符合规定，可以作为检测百癣夏塔热片浸膏中没食子酸含量的检测标准。

参考文献

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准：维吾尔药分册[J].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1998，：124.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国 药典2010年版[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录29.

[3]国家食品药品监督管理局.标准（试行）YBZ03372004[S].2004.