ABCG2表达与浸润性乳腺癌患者术后复发转移的关系

何建明 黄 伟 黄 湛

(韶关学院医学院附属医院普通外科，广东 韶关 512026)

ABCG2表达与浸润性乳腺癌患者术后复发转移的关系

何建明 黄 伟1黄 湛2

(韶关学院医学院附属医院普通外科，广东 韶关 512026)

目的 探讨ATP结合转运体基因2(ABCG2)组织表达程度与浸润性乳腺癌患者术后复发转移的关系，并分析其与其他临床参数的关系。方法 采用免疫组化二步法检测187例浸润性乳腺癌组织中ABCG2蛋白表达，分析乳腺癌中ABCG2组织表达程度与浸润性乳腺癌患者术后复发转移的关系，并分析其与患者年龄、月经、组织学分级、临床分期、病灶大小、术前淋巴结转移、ER、PR、Her-2表达程度及三阴性乳腺癌(TNBC)等的关系。结果 乳腺癌组织中ABCG2蛋白表达阳性率为58.8%(110/187)，随着分化程度的增加，ABCG2阳性率降低；术后复发转移组患者中ABCG2阳性率为73.1%(38/52)，明显高于未复发转移组的53.3%(72/135)，TNBC组患者中ABCG2阳性率为73.7%(28/38)，高于non-TNBC组的55%(82/149)(χ2=6.254，P=0.012；χ2=4.536，P=0.033)；ABCG2表达程度与患者的临床分期(TNM)、病理分级相关(χ2=5.425，P=0.020；χ2=4.077，P=0.043)，但与乳腺癌患者年龄、月经状况、病灶大小、ER、PR及Her-2表达程度等无明显相关性(均P>0.05)。结论 浸润性乳腺癌组织中存在ABCG2蛋白高表达，其阳性程度与患者的术后复发转移关系密切。

浸润性乳腺癌；ATP结合转运体基因2；三阴性乳腺癌

乳腺癌患者通常由于对化疗药物耐药而预后不佳〔1〕。ATP结合转运体基因2(ABCG2)是ABC转运蛋白家族成员之一，对保护干细胞避免细胞毒性杀伤具有重要意义〔2〕。最新研究还发现，伴ABCG2蛋白表达的患者具有特殊的临床特点和生物学行为〔3〕，但ABCG2是否可以作为判断乳腺癌患者术后复发转移及预后的重要因子目前尚无统一报道。本文将进一步探讨ABCG2组织表达程度与乳腺癌患者术后复发转移的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取韶关学院医学院附属医院普通外科、汕头大学医学院附属粤北人民医院头颈乳腺外科2010年4月至2012年3月收治的浸润性乳腺癌患者187例，所有标本均经病理证实。肿瘤直径1～7 cm，平均(3.87±0.67)cm，病理类型：浸润性导管癌138例，浸润性小叶癌31例，黏液癌9例，硬癌5例，髓样癌4例；组织学分级：Ⅰ级40例，Ⅱ～Ⅲ级147例，TNM分期：Ⅰ期38例，Ⅱ～Ⅲ期149例；患者年龄30～80岁，平均(53.18±10.96)岁，所有患者术前均未接受新辅助放疗、化疗或分子靶向治疗。所有病例均为女性，手术方式：单纯性乳房切除术19例，改良根治术168 例。患者术后均接受辅助治疗。

1.2 ABCG2免疫组化 常规切片，切片常规65℃烤片脱蜡后，再行二甲苯3次5 min脱蜡，梯度酒精水化，PBS冲洗5 min×3，微波中低火条件下行EDTA抗原修复，PBS冲洗5 min×3，滴加ABCG2兔抗人多克隆抗体，37℃孵育1 h PBS冲洗5 min×3，滴加辣根过氧化物酶标记的广谱二抗，37℃孵育30 min，PBS冲洗5 min×3，DAB显色，镜下观察控制显色效果，放入自来水终止显色，苏木素复染、中性树胶封片。判断标准：ABCG2阴性：肿瘤细胞质未着色或阳性细胞数<25%，阳性：肿瘤细胞质呈棕褐色且阳性细胞数>25%。

1.3 随访 通过临床随诊和电话随访获得随访资料。记录复发转移并随访至患者死亡或至随访截止日期。将局部复发及远处转移皆称为乳腺癌复发。无病生存时间(DFS)是由确诊至第一次发现(临床或影像学证明)复发的时间。随访截止日期为2014年月11月。

1.4 统计学方法 采用SPSS16.0软件行χ2检验。

2 结 果

2.1 浸润性乳腺癌组织中ABCG2蛋白的表达及与肿瘤复发、组织分化程度及三阴性乳腺癌(TNBC)的关系 187例浸润性乳腺癌组织中ABCG2蛋白表达阳性率为58.8%，随着分化程度的增加，ABCG2阳性率降低；术后复发转移组患者中ABCG2阳性率明显高于未复发转移组患者53.3%；TNBC组患者中ABCG2阳性率亦高于non-TNBC组(均P<0.05)，见表1，图1。

2.2 ABCG2蛋白的表达与患者临床病理参数的关系 ABCG2与患者的临床分期(TNM)相关(P<0.05)，与乳腺癌患者年龄、病灶大小、ER、PR及 Her-2阳性状态等无明显相关性(P>0.05)，见表2。

A：浸润性导管癌的形态学变化(HE，×100)；B：ABCG2蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达(IHC，×100)；C：ABCG2蛋白在乳腺癌组织中的阴性表达(IHC，×100)

表1 乳腺癌组织中ABCG2蛋白表达与肿瘤复发、组织分化程度与TNBC的关系〔n(%)〕

病理参数n187ABCG2组阴性(n=77)ABCG2组阳性(n=110)χ2/P值分化程度 Ⅰ级4011(27 5)29(72 5)4 077/0 043 Ⅱ～Ⅲ级14766(44 9)81(55 1)复发 是5214(26 9)38(73 1)6 254/0 012 否13563(46 7)72(53 3)TNBC 是3810(26 3)28(73 7)4 536/0 033 否14967(45 0)82(55 0)

表2 ABCG2蛋白的表达与患者临床病理参数的关系〔n(%)〕

3 讨 论

ABCG2是肿瘤细胞株中分离的ABC转运蛋白家族之一，并被认为与肿瘤耐药有关，特别是在乳腺癌多药耐药中发挥重要作用〔4〕。大量基础研究证实，转染ABCG2基因后细胞编码的蛋白具有促进细胞增生、修复、抗凋亡及诱导多药耐药的特点〔5〕，对多种化疗药物如柔红霉素、顺铂等均耐药。在多种肿瘤如乳腺癌、骨肉瘤、食道鳞状细胞癌、宫颈癌、胶质瘤及肝癌等多种肿瘤细胞中均可分离出ABCG2基因阳性表达的肿瘤干细胞〔5〕。研究认为，ABCG2是参与肿瘤生长、分化和侵袭转移等生物学行为的重要因子，大量研究证实了乳腺癌中存在ABCG2的高表达，并参与肿瘤的增殖与凋亡及多药耐药〔6〕。国外有学者认为，肿瘤组织中ABCG2基因的阳性率可以作为判断肿瘤患者转移和预后的独立指标〔7〕。在食管癌中，有研究认为ABCG2的表达是肿瘤干细胞产生耐药性的重要原因，并且认为组织中ABCG2高表达可以作为食管鳞状细胞癌肿瘤耐药和侵袭转移的不良指标〔8，9〕，进一步基础实验证实，在对耐药的鳞状细胞癌细胞株阻断ABC蛋白表达后，肿瘤细胞恢复了对化疗药物的敏感性〔10〕。但ABCG2蛋白的阳性表达与乳腺癌肿瘤复发、淋巴结转移等临床病理参数的相关性目前尚不明确。

本研究结果基本证实了ABCG2参与肿瘤的恶性进展，增强了肿瘤细胞的侵袭性。研究认为，ABCG2过表达的患者，其生物学行为具有特殊性，表现为化疗效果差、患者预后不佳等〔11〕。TNBC是一种特殊类型的乳腺癌，分化低、组织学分级高，侵袭性强，恶性程度高，极易复发，总生存期短〔12，13〕，易耐药，临床预后差，目前尚缺乏有效治疗方法。乳腺癌侵袭转移是患者预后不良的重要因素，其侵袭性主要与肿瘤干细胞的耐药性、浸润能力等有关〔14〕。因此，通过研究ABCG2在乳腺癌发生发展中的作用，对判断肿瘤的生物学特性和预后均具有重要意义。

综上所述，乳腺癌组织中存在ABCG2蛋白高表达，其阳性程度与患者的术后复发转移关系密切，可作为判断乳腺癌患者预后的重要指标。

1 Wu C，Alman BA.Side population cells in human cancers〔J〕.Cancer Lett，2008;268(1)：1-9.

2 Yajima T，Ochiai H，Uchiyama T，etal.Resistance to cytotoxic chemotherapy-induced apoptosis in side population cells of human oral squanous cell carcinoma cell line Ho-1-N-1〔J〕.Int J Oncol，2009;35(2)：273-80.

3 王 鹏，徐卫明，饶 竞，等.磷酸腺苷结合盒转运体成员在人脑胶质瘤中的表达及其与神经巢蛋白表达的关系〔J〕.中华实验外科杂志，2010;27(6)：777-9.

4 奚 忠，丁忠阳，郭榆江.ABCG2在肝细胞癌组织中的表达及临床病理意义〔J〕.肝胆胰外科杂志，2013;25(5):385-7.

5 陈 滢，程艳香.宫颈癌组织中ABCG2和CD133的表达对预后的影响分析〔J〕.实用癌症杂志，2014;29(6)：614-6.

6 刘会玲，杨 燕.ABCG2在宫颈癌的表达及意义〔J〕.现代妇产科进展，2010;19(2)：115-6.

7 Ma S.Biology and clinical implications of CD133(+)liver cancer stem cells〔J〕.Exp Cell Res，2013;319(2)：126-32.

8 Mo W，Zhang JT.Human ABCG2：structure，function，and its role in multidrug resistance〔J〕.Biochem Mol Biol，2012;3(1)：1-27.

9 刘博雅，张志培，李小飞，等.ABCG2与空泡型ATP酶在非小细胞肺癌中的表达及其相关性〔J〕.肿瘤研究与临床，2009;21(12)：806-9.

10 Hu Z，Hao X，Yan M，etal.Cancer stem/progenitor cells are highly enriched in CD133+CD44+population in hepatocellular cancinoma〔J〕.Int J Cancer，2010;126(9)：2067-78.

11 储 亮，黄 强，董 军，等.肿瘤干细胞的耐药性及其治疗策略〔J〕.中国新药与临床杂志，2006;25(11)：868-72.

12 Dawood S，Lei X，Litton JK，etal.Impact of body mass index on survival outcome among women with early stage triple-negative breast cancer〔J〕.Clin Breast Cancer，2012;12(5)：364-72.

13 余 峰，张霄蓓，张 晟，等.三阴性乳腺癌复发特征及危险因素分析〔J〕.中华医学杂志，2014;94(28)：2180-3.

14 Tian T，Zhang Y，Wang S，etal.Sox2 enhances the tumorigenicity and chemoresistance of cancer stem-like cells derived from gastric cancer〔J〕.Biomed Res，2012;26(5)：336-45.

〔2013-10-10修回〕

(编辑 李相军)

广东省医学科研基金(No.A2011646)

何建明(1966-)，男，副教授，主要从事外科临床及教学研究。

R739

A

1005-9202(2015)12-3244-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.025

1 汕头大学医学院附属粤北人民医院病理科

2 汕头大学医学院附属粤北人民医院头颈乳腺外科