液基薄层细胞检测与HPV—PCR荧光定量分析应用于宫颈癌及癌前病变诊断的临床意义

曹佳萍

[摘要] 目的 探讨TCT联合HPV-PCR应用于宫颈癌及其癌前病变诊断的临床意义。 方法 对2011年1月～2014年2月期间我院妇科诊治的1600例已婚患者进行TCT、HPV-PCR检查，对TCT不明确的不典型鳞状细胞（ASC-US）以上、HPV-PCR阳性368例患者再行阴道镜宫颈多点活检。 结果 1600例患者中TCT检测阳性80例（5.0%），HPV-PCR检测阳性368例（23.0%）；80例TCT检测阳性患者，经阴道镜宫颈多点活检检查后，54例慢性宫颈炎、6例轻度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅰ）、8例中度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅱ）、10例重度宫颈上皮瘤病变和原位癌（CIN Ⅲ）、2例鳞状细胞癌（SCC）。368例HPV检测阳性患者，经阴道镜宫颈多点活检后，307例慢性宫颈炎、27例轻度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅰ）、17例中度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅱ）、13例重度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅲ）、4例鳞状细胞癌（SCC）。 结论 TCT、HPV-PCR检查各有优缺点，但联合检测具有高效、便捷等优势，能明显提高宫颈癌及癌前病变的阳性检出率，可成为宫颈病变筛查的最佳方法。

[关键词] TCT；HPV-PCR荧光定量分析；宫颈癌；癌前病变

[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）17-0038-03

宫颈癌作为妇科比较常见的恶性肿瘤之一，是由宫颈上皮内瘤变（CIN）逐渐演变为浸润癌的过程，存在较长的、可逆性癌前病变[1，2]。只有早期筛查、早期诊断宫颈癌及癌前病变，才能更好地指导治疗[3]。液基薄层细胞检测（TCT）作为宫颈病变的常规检测方法，具有信息量大、背景清晰、便于阅读等诸多优点，被广泛应用于宫颈病变的筛查诊断中[4，5]。有研究表明，人乳头状瘤病毒（HPV）是导致宫颈癌发病的主要原因，HPV-PCR荧光定量分析检测能够提高宫颈癌及癌前病变的筛查敏感度[6，7]。而电子阴道镜在判断宫颈病变性质、范围、类型方面具有较高的活检阳性率[8]。本研究选取我院妇科诊治的1600例已婚患者进行TCT、HPV-PCR检查，对于TCT不明确的不典型鳞状细胞（ASC-US）以上、HPV-PCR阳性患者368例再进行阴道镜宫颈多点活检，探讨TCT联合HPV-PCR筛查应用于宫颈癌及癌前病变诊断的临床意义，从而更好地指导早期诊断和治疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2011年1月～2014年2月期间我院妇科诊治的1600例已婚女性为研究对象，年龄22.0～67.0岁，平均（42.0±5.0）岁。所有患者均接受TCT、HPV-PCR检查，对于TCT分级在不典型鳞状细胞（atypical squamous cells，ASC-US）以上的80例患者及HPV-PCR阳性368例患者，再进行阴道镜宫颈多点活检。

1.2 检查方法

无菌棉球擦净宫颈分泌物，将宫颈刷插入宫颈管顺时针转圈后，取出置入细胞保存液小瓶。

1.2.1 TCT标本采集及检查方法 分离宫颈分泌物标本中的黏液、血液、炎性细胞、上皮细胞等成分，经过制片、人工巴氏染色等相关处理后镜下检查。根据2001年阴道细胞学的分类及报告细则（TBS）分为4个级别[5]：正常范围（WNL）、不明确的不典型鳞状细胞（ASC-US）、低度鳞状上皮内瘤变（LSIL）、重度鳞状上皮内瘤变（HSIL）、鳞状细胞癌（SCC）。

1.2.2 HPV-PCR检查方法 通过PCR反向点杂交法，利用亚能生物技术深圳有限公司的“人乳头癌病毒基因分型（23型）检测试剂盒，检测18种高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83型。专用宫颈管刷，刷取宫颈管内脱落细胞标本，移至专用标本液中，折断刷柄，盖好瓶盖送检，经HPV-PCR提取、PCR扩增、杂交、洗膜、显色等方法，根据斑点显现的有无判断结果，依据蓝色斑点显现位置判断HPV基因型，多点显色即为多重感染。

1.2.3 阴道镜检查方法 观察鳞状上皮、柱状上皮交界处上皮组织及血管，3%醋酸涂抹宫颈后，观察交界处上皮及血管情况，继而涂抹卢戈氏碘液，不着色组织为阳性区。观察阴道镜图像、边界清晰程度、血管扩张及毛细血管间距等情况，在异常图像或可疑部位取多点活检。活检诊断分为子宫颈黏膜慢性炎、轻度宫颈上皮内瘤变（CIN Ⅰ）、中度宫颈上皮内瘤变（CIN Ⅱ）、重度宫颈上皮内瘤变（CINⅢ）和宫颈癌。对于TCT检测阳性、HPV检测阳性、阴道镜图像异常患者，阴道镜下宫颈多点活检。

2 结果

2.1 TCT检查结果

1600例患者中TCT检测阳性80例（5.0%），包括ASC-US、LSIL、HSIL3个级别的细胞，无SCC检出。其中，组织病理学检查（CIN+SCC）共26例（32.5%），见表1。

2.2 高危型HPV-PCR检查结果

1600患者中368例HPV-PCR检测阳性（23.0%），其中55例（14.9%）诊断为高危型阳性HPV，313例（85.1%）诊断为高危型阴性HPV，见表2。

表2 368例高危型HPV-PCR检查及其病理学检查结果[n（%）]

2.3 HPV-PCR高危型、TCT检测结果比较

368例HPV-PCR高危型标本中，经过病理组织学检查发现，其中55例高危型阳性和26例TCT阳性，19例中HPV-PCR与TCT检查均为阳性，306例HPV-PCR与TCT检查均为阴性，见表3。

表3 HPV-PCR高危型、TCT检测结果比较

3 讨论

宫颈癌作为目前危及妇女健康和安全的常见恶性肿瘤，其发病率仅次于乳腺癌，多数患者就诊时已经处于晚期，极大地威胁患者的生命安全[9]。因此，早期发现、早期治疗宫颈癌及癌前病变对于宫颈癌的防治具有非常重要的临床意义[10，11]。

TCT通过TBS细胞学分类诊断标准对宫颈细胞进行诊断，是宫颈疾病的常规检查方法[12]。但是，鳞状上皮、柱状上皮交界处细胞不好采集，导致筛查敏感度降低，容易出现漏诊。有报道称，人乳头瘤病毒（HPV）是宫颈癌的主要致病因素[13]。HPV-PCR病原学检查已成为宫颈癌早期诊断的筛查方法，适用于宫颈癌病变前期的广泛筛查[14]。但是，部分感染HPV的妇女在自身免疫清除HPV病毒作用下，仅有少数进展为宫颈癌，所以，HPV-PCR筛查宫颈癌的检查方法具有一定程度的局限性[15]。本研究中，1600例患者中TCT检测阳性80例（5.0%），HPV-PCR检测阳性368例（23.0%），结果表明HPV-PCR的检测阳性率相对较高。

本研究中，80例TCT检测阳性患者，经阴道镜宫颈多点活检后，54例慢性宫颈炎、6例轻度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅰ）、8例中度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅱ）、10例重度宫颈上皮瘤病变和原位癌（CIN Ⅲ）、2例鳞状细胞癌（SCC）。368例HPV检测阳性患者，经阴道镜宫颈多点活检后，307例慢性宫颈炎、27例轻度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅰ）、17例中度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅱ）、13例重度宫颈上皮瘤病变（CIN Ⅲ）、4例鳞状细胞癌（SCC），结果表明阴道镜、TCT、HPV-PCR检查作为宫颈癌及癌前病变筛查的重要检查方法，相互之间具有互补作用[16]。

阴道镜直视下宫颈多点活检是宫颈癌检查的金标准，但是该检查方法具有一定的创伤性，一定程度上影响其临床应用范围。阴道镜直视下宫颈多点活检能够有效提高宫颈疾病的敏感度，避免活检取材的盲目性[17]。对于TCT不明确的不典型鳞状细胞（ASC-US）以上、HPV-PCR阳性患者，进行阴道镜宫颈多点活检[18-20]。

总而言之，HPV-PCR检查虽然具有较高的检出率，但是其检查费用相对较贵，而TCT检查操作简单、经济实惠，因此，HPV-PCR和TCT检查作为宫颈癌及癌前病变筛查的重要检查方法，相互之间具有互补作用，在患者经济条件许可的情况下，建议联合检查。TCT、HPV-PCR联合检测能够取长补短，提高宫颈癌及癌前病变的阳性检出率，降低临床漏诊率。

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（收稿日期：2015-04-28）