大学校园空气中细菌数量的检测与分析研究

李文超　李晓东

摘 要：本次检测采用自然沉降法对空气中的细菌进行采集，进行培养后对所有培养皿里的生长的菌落数量进行统计，同时设置了四个地点，分别于两个不同时间段采样进行对比。结果表明，空气中细菌的数量在人流高峰时比人流低峰多，同时也和环境的感官卫生呈正向关系。检测空气中的细菌数量为控制空气污染提供了参照，同时也能指导对空气污染的治理。

关键词：细菌；空气污染；自然沉降法；基础培养基

微生物可以通过空气进行扩散，空气中的微生物包括真菌、细菌、病毒等，这些微生物是空气污染的重要组成部分。细菌在空气中的微生物中占绝大多数量，空气中的细菌主要来自于土壤，水体，各种腐烂的有机物，人畜呼吸道的飞沫及动植物体表的干燥的脱落物，空气中的细菌数量可以反映所在区域的空气质量，是大气环境污染的一个重要参数[1]。因此，空气的清洁程度可以通过测定空气中的细菌总数来评价[2]。加强对空气中的细菌数量的监测，对于预防和监控疾病的传播起着积极的作用[3]。

1 实验条件与方法

1.1 实验材料

牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水、磷酸氢二钠、纱布、脱脂棉、0.1mol/L氢氧化钠溶液、0.1mol/L盐酸溶液。

1.2 实验仪器与设备

培养皿、电炉、溶解锅、恒温箱、高压蒸汽灭菌锅、天平、大、小烧杯、玻璃棒、喷壶、量筒、超净工作台、放大镜、记号笔、尺子、药匙。

1.3 实验方案

1.3.1 培养基的配置

（1）称取和配置。用量筒量取蒸馏水，平均分为两份，一份加热，再用天平称取琼脂加入水中，加热至琼脂完全溶解；取另一份蒸馏水加热称取牛肉膏，氯化钠，蛋白胨，加入水中，加热溶解。然后将两份溶液混合均匀，倒入两倍于培养基的容器。在加热过程中不断用玻璃棒搅拌，防止焦化。（2）校正pH。配制0.2mol/L酚红指示剂。 称取0.1g酚红，加入乳钵中边研磨边加入0.01mol/L NaOH 28.2ml，加蒸馏水500ml。配制1/15mol/L磷酸二氢钠溶液。称取磷酸二氢钠9.47g加水至1000ml于试管中分别取适宜pH适宜量的磷酸二氢钠，并加入0.5ml酚红指示剂混匀作标准比色管。取相同口径试管四支，第1、3支加入培养基5ml，1试管内加入0.2g/L酚红0.25ml，2试管中加入蒸馏水5ml，4管为标准比色管。

（3）澄清、过滤。用两层纱布，中间夹有薄层吸水棉，趁热进行过滤，直至透明无沉淀。（4）灭菌。将配制好的培养基倒入锥形瓶中，用纱布和牛皮紙将瓶口封紧放入高压蒸汽灭菌锅中，103.43kPa（121.3摄氏度）灭菌15-20分钟，保证灭菌效果，同时不损伤培养基的有效成分。（5）分装。将超净工作台打开，一手持培养皿，一手持锥形瓶，开塞前在酒精灯上过火1-2次，迅速倒入10ml，再过火1-2次塞回。培养基不能超过培养皿容积的2/3。（6）检定。一般性状的检定：颜色：不宜太深。澄清度：应无絮状物或沉淀。pH：进行第二次检测与校正。水分：应补充失去的水分。无菌检查：将配制好的培养基放到培养箱中培养24-48小时，取出观察，若无细菌生长则为合格。

1.3.2 取样

（1）采样点分布与采样时间。采样时间：14：00-15：00 18：00-19：00。（2）采样方法。采样方法采用自然沉降法[4]。图书馆和食堂空间采用棋盘式布点，男女生宿舍随机抽取采用中心布点。采样时应注意，采样点距离地面1.5m，距离墙面大于1m[5]。打开后将皿盖扣于培养皿下暴露15-30分钟。

1.3.3 培养

将采样后的培养皿倒置放在培养箱中，培养24-48小时。

1.3.4 数据处理

统计每个培养皿上的菌落数进行记录统计。然后用SPSS19.0对数据进行方差分析和t检验，以P<0.05有统计学意义。将数据代入前苏联奥梅梁斯基公式[6]换算出空气中细菌浓度。

3 结果分析与讨论

根据采样过程可将实验所得结果进行横向、不同地点同一时间的分析；纵向、同一地点不同时间的分析。而根据X2=2.46，0.5

首先，进行横向比较。根据实验所得结果，两个时间段，四个地点进行比较，细菌总数由多到少的顺序都为：男生宿舍>女生宿舍>食堂>图书馆。由结果可得出，室内感官卫生状况与细菌总量呈正向关系。宿舍相较于食堂与图书馆空间更狭小，人员更拥挤，因此细菌含量更高。而食堂因为食物的腐败，原材料的堆积，同时温度较高，空气潮湿，更有利于细菌的繁殖。图书馆则因为人流量小且空间较大，空气流通好，同时由于其环境较为特殊，空气干燥，湿度较低从而对于细菌的生长与繁殖起到了抑制作用，因此细菌数量较少。其次，纵向比较。大致以第二时间段多于第一时间段。由于第一时间段采样的具体时间为14：00-15：00，第二时间段为18：00-19：00，这两个时间段分别为人流低峰期和人流高峰期，从而数据大体上呈现这种差异性。而同一地点两个时间段P<0.05差异具有统计学意义。由实验结果可以得出空气中细菌数量与人流量有很大的关系。通过本此研究，可以得出校园内细菌数量以男生宿舍的第二时间段最多，图书馆的第一时间段最少。空气中的细菌数量可以很好的反映此区域的空气污染状况，以便采取相应的措施来改善环境污染状况。

参考文献

[1]王春华，谢小保，曾海燕，欧阳友生，等.深圳市空气微生物污染状况监测分析[J].微生物学杂志，2008，4.

[2]潘少兵，彭傲，余世金，等.安庆市不同功能区冬季空气微生物污染调查与分析[J].安庆师范学院学报（自然科学版），2013，3.

[3]张韩杰，高 ，王彦美，等.校园内不同场所空气中细菌污染的调查[J].科技创新导报，2008，25.

[4]王玉寅，赵琴，孙宝珍，等.空气细菌总数测定自然沉降法采样时间对结果的影响[J].中国公共卫生检验杂志，2011，11（1）：94.

[5]张鹰.自制空气培养采样架的临床应用探讨[J].医学新知杂志，2014，12.

[6]Micheal J. Pelczar，Jr， Royer V. Reid，Eddie Chin Sun Chan. Microbiology（Fourth Edition） McGraw-Hill Book Company，1977：86-87.

作者简介：李文超（1983-），女，山东烟台人，讲师，研究方向：医学教育。