HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量

郑风敏　李彬

【摘 要】 目的：建立注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量测定方法。方法：HPLC法；C18柱（4.6×150mm，5μm）；流动相：0.02mol/l正辛胺溶液-乙腈（73∶27）；流速：1.0 ml/min；检测波长：254nm；柱温：20℃；进样量：20μl。结果：头孢曲松在浓度91.9～459.6μg/ml与峰面积有良好的线性关系（r=0.9996）。结论：该法简单，专属性强，准确度高，可用于对注射用头孢曲松钠的质量控制。

【关键词】 HPLC；头孢曲松；含量测定

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）11-0010-02

头孢曲松为第三代头孢菌素，对革兰阴性菌包括肠杆菌类、铜绿假单胞菌及厌氧菌有较强的作用，用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、胆道感染，以及腹腔感染、皮肤软组织感染、骨和关节感染、败血症、脑膜炎等感染预防。单剂可治疗单纯性淋病[1] 。本文采用HPLC法测定注射用头孢曲松钠中头孢曲松的含量，准确可靠，简便。同时通过HPLC色谱图，可以判断注射用头孢曲松钠的质量控制水平，为临床用药提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪（Waters 2695 HPLC PumP Waters；2998二级管阵列检测器；Epower化学工作站）；赛多利斯CPA225D电子分析天平。

1.2 试药 头孢曲松对照品（批号：130480-200903，中国药品生物制品检定所）。注射用头孢曲松钠（批号：1212061、1301182，辅仁药业集团有限公司）。水为纯化水；乙腈为色谱纯；正辛胺为化学纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2] 色谱柱：Waters Sunfire C18柱（4.6×150mm，5μm）；流动相：0.02mol/l正辛胺溶液-乙腈（73：27），并用磷酸调节pH值6.5；流速：1.0 ml/min；检测波长：254nm；柱温20℃；进样量20μl。

2.2 溶液的制备[2]

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称定头孢曲松对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成0.22mg/ml的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取供试品约22mg，置100ml量瓶中，加流动相溶解并定量稀释制成0.22mg/ml的供试品溶液。

2.3 线性关系的考察 精密称取对照品26.32mg，置100ml容量瓶中，加流动相定量稀释至刻度，摇匀，作为储备液。分别精密吸取储备液2.0、3.0、5.0、10.0ml，分别置10、10、10、25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别吸取配置好的四种溶液及储备液在上述色谱条件下准确进样20μl测定，以各溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，其回归方程为Y=56941X﹢263729，r=0.9996，头孢曲松在浓度91.9μg/ml～459.6μg/ml与峰面积有良好的线性关系。

2.4 精密度试验 精密称取对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.22mg的对照品溶液，准确进样20μl，连续进样5次，记录色谱图，计算头孢曲松峰面积的RSD为0.4%。结果表明：本实验进样精密度良好。

2.5 重复性试验 取“2.2.2项”下供试品溶液，按上述色谱条件，准确进样20μl，依法平行测定6次，以峰面积计算，RSD=0.2%。结果表明：该方法重现性好。

2.6 稳定性试验 精密量取同一供试品溶液，于0、2、4、6h分别准确进样20μl，在上述色谱条件下，记录色谱图，计算头孢唑林峰面积的RSD为0.1%。结果表明：注射用头孢曲松钠在6h内稳定。

2.7 加样回收率试验 精密称定已知含量的供试品约11mg，精密称定一定量的头孢曲松对照品，按“2.2.2项”下的方法制成供试品溶液，测定其峰面积，计算供试品的平均回收率为99.8%，RSD为1.2%。结果见表1。

2.8 含量测定 取两批供试品，精密称定，按“2.2.2项”下的方法配置成供试品溶液，在上述色谱条件下进行含量测定，按外标法以峰面积计算。结果见表2。

3 讨论

头孢曲松钠易溶于水，对其检测选择以水相为主的流动相，但在其中加入微量的扫尾剂（正辛胺），可防止样品在测定过程中产生拖尾现象。加入磷酸可以形成磷酸盐缓冲液，使流动相缓冲能力更强，在测定过程中可以使头孢曲松钠达到更好的分离纯化效果，使测定结果更准确，因此选用磷酸调节流动相pH值。

本实验建立的HPLC法测定头孢曲松含量的方法，该方法准确，快速，重现性良好，从而为实际工作中对药品质量的控制提供科学的依据。

参考文献

[1] 刘俊田.药理学[M].郑州：郑州大学出版社，2004：382-383.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010：181-183.