梁文彬
(梅州市中医医院检验科,广东 梅 州514011)
由于尿液标本容易采集,所以尿液检验已广泛应用于临床疾病的辅助诊断、疾病进展监测、治疗效果或并发症的监测,以及对无症状人群进行的先天性或遗传性疾病的筛查[1,2]。随着尿液分析仪及尿沉渣仪的发明使用,使尿液检测更加方便、快捷,准确,可标准化,改变了传统单一显微镜镜检方法提高了工作效率[3-5]。但通过对1000例尿液样本的白细胞分析发现,三种检测方法应联合使用,才能更好地提高结果的准确性。
1.1仪器与试剂 桂林优利特200B尿液分析仪,UF-500全自动尿沉渣仪及配套试剂和质控物;奥林巴斯双目显微镜及玻片。
1.2 标本来源 收集2014年5月份共1000例住院病人留取的晨尿各30ml,其中男性385例,女性615例,年龄:8~85岁。晨尿:早晨5~6时排空小便后,隔段时间再次留取的中段尿。
1.3 方法
1.3.1 用一次性尿杯收集上述住院病人留取的晨液30ml,避免污染,混匀后分别取10ml分为三管。
1.3.2 第一管尿液标本由尿液分析仪检测,把试纸条浸入尿液中1~2s后取出,浸入滤纸吸收多余的尿液,然后放入优利特200B尿液分析仪自动检测。
1.3.3 第二管尿液标本放入UF-500全自动尿沉渣仪试管架中,全自动检测尿沉渣。
1.3.4 第三管尿液标本,放入离心机经1500r/min离心沉淀5min后,弃去上清液,把剩余的200μl混匀后取其中20μl涂片显微镜镜检,计数10个高倍镜视野的白细胞数,统计平均每个高倍视野值。
1.3.5 以上方法都是在相同条件下,并在仪器运转正常,质量控制结果在控的前提下,严格遵守标准操作规程,由熟练的检验人员进行联合检测。
1.4 结果判定标准 白细胞值:(1)优利特200B尿液分析仪报告:阴性:(<15/μl),阳性:(≥15/μl)。 (2)UF-500全自动尿沉渣仪报告:阴性:(<15/μl),阳性:;(3)显微镜镜检报告:阴性:0~5/HP,阳性: >5/HP[7]。
2.1 表1显示尿液分析仪,尿沉渣仪,显微镜人工镜检测阴性率分别为:78.5%、74.5%、76.8%,尿液分析仪阴性率最高,尿沉渣仪阴性率最低。见表1。
表1 三种方法检测白细胞阴性率
2.2 表2尿液分析仪假阳性率为4.4%,假阴性率为8.6%,与镜检符合率为87%,尿沉渣仪假阳性率为3.3%,假阴性率为1.7%,与镜检符合率为95%。白细胞检测尿沉渣仪各种指标都优于尿液分析仪。见表2。
尿液分析仪试带法检查尿液白细胞的原理:尿中中性粒细胞含酯酶能水解吲哚化合物,其产物与重氮盐反应生成紫色物质,其颜色与酯酶活性成正比,借此原理估计尿中白细胞的数量[8]。此法只能测中性粒细胞,尿液中污染甲醛或含有高浓度胆红素或使用某些药物时,会产生假阳性;尿蛋白>3g/L;不新鲜尿液或酸碱度的变化对白细胞破坏崩解可造成尿液分析仪结果阳性,而显微镜镜检为阴性[9]。
表2 尿液分析仪和尿沉渣仪白细胞测定结果与显微镜镜检符合率及假阴性率和假阳性率
尿沉渣分析仪应用了流式细胞和电阻抗原理:根据每个尿液标本的直方图和散射图来区分细胞及其形态。它为尿沉渣的检测提供自动化的检测手段,能客观的分析尿沉渣的各种有形成分,快速检测尿液标本,并对有形成份进行定量检测。其影响因素有:(1)小圆上皮细胞及小管型,酵母菌,连体孢子,精子及磷状上皮细胞等都能够干扰白细胞的计数。(2)白细胞形态在尿液不同的酸碱度及渗透压,形态变化较大,破坏及死亡的白细胞形态体积及颗粒密度变化较大,容易计错。(3)当尿液中白细胞成团聚集在一起时,仪器则视为非白细胞,不会对其计数[10]。
镜检是利用显微镜技术对尿沉渣进行检查,在尿中能够看到的有形成份有各种细胞、管型及结晶等,对这些有形成份的识别、鉴定及计数,对泌尿系统的鉴别诊断,病情观察,判断预后等有重要意义[11,12]。但是白细胞在不同因素下容易变形破碎,造成无法识别。所以此法虽然直观,但比较繁琐,不能标准化,误差率较高。
可见,三种方法检测尿中白细胞原理及影响因素不同,单独任何一种或两种联合检测,都不能保证结果的准确性。
尿沉渣定量检测自动化程度高,易标准化,重复性又好,能够精确地测量到白细胞的准确数量,并能够依靠数量上的微弱变化,更好的指导临床的治疗用药。但易受各种因素的影响,会出现假阳性和假阴性[13,14]。尿液分析仪检测方式自动化程度高,易标准化,又简便、快捷、检测项目多,标本用量少,重复性又好,但其是一种半定量的检测方法,不能精确的测定白细胞的数量,易受各种因素的影响,假阳性和假阴性都偏高[15]。尿沉渣镜检作为最传统的检查方法缺点很多,优点不突出,但不可或缺,在所有教科书都将它作为尿沉渣检查的金标准。在相当长的时间里,它与尿液分析仪联合使用,优点明显,因为尿液分析仪检查白细胞受其原理的影响,假阴性率较高,易漏检,两者联合,避免了尿液分析仪的漏检现象,但有一定的局限性,不能定量计数且速度慢[15,16]。
尿沉渣分析仪可同时定量检测多种项目,优点突出,现今很多医院在检查尿常规时,使用尿沉渣分析仪与尿液分析仪联合检测,提高了效率,基本上放弃了显微镜人工镜检。但是尿中白细胞受多种因素的影响,要保证检测结果的准确性,显微镜镜检不可忽视。如今各医院标本检测量都非常大,不可能对检测结果都一一进行显微镜镜检,从而降低检测的速度,不能发挥先进仪器的作用。笔者认为,尿沉渣仪跟尿液分析仪联合测定白细胞,根据尿沉渣仪假阴性率低,与显微镜镜检符合率高的特点,对尿沉渣仪跟尿液分析仪测定阴性,可考虑不用显微镜镜检,如两者不符,须进行显微镜镜检。尿沉渣仪跟尿液分析仪属快速过筛试验,有其的优越性,但上表统计可见,受各种因素的影响,其假阳性,假阴性并不少见,跟传统的显微镜镜检符合率也不能达到百分之百,只有三者联合检测才能提高结果的准确性。
[1]Strasinger SK,Di Lorenzo M S.Urinalysis and body fluids[M].FA Davis,2014.
[2]Bell C,George C,Kicman AT,et al.Development of a rapid LCMS/MSmethod for direct urinalysis of designer drugs[J].Drug testing and analysis,2011,3(7-8):496-504.
[3]陈君颖,林真.UF1000i尿液分析仪性能验证结果的探讨[J].中国医药科学,2014,4(6):153-154.
[4]侯进军.E H-2060B型全自动尿沉渣分析仪的临床应用[J].检验医学与临床,2013,10(24):3320-3321.
[5]梁文彬.探讨三种检测方法在尿液白细胞测定中的使用[J].医学信息,2014,(9):67-67,68.
[6]董磊,刘娟,马红雨,等.UF-500i全自动尿沉渣分析仪检测系统的性能验证[J].检验医学,2013,28(2):150-153.
[7]Giesen CD,Greeno AM,Thompson KA,et al.Performance of flow cytometry to screen urine for bacteria and white blood cells prior to urine culture[J].Clin Biochem,2013,46(9):810-813.
[8]杨学敏,李光迪,赵有利.不同原理尿液分析仪检测尿有形成分结果比较及显微镜复检规则探讨[J].国际检验医学杂志,2012,33(6):671-672.
[9]王小华,吕静妮,郭瑞林,等.尿液干化学仪器分析法与离心沉淀镜检法对细胞成分检测的对比分析[J].国际检验医学杂志,2011,32(16):1867-1868.
[10]牛忆军,姚祖德,赫红军.全自动尿沉渣分析仪和显微镜检查对比分析[J].检验医学,2011,26(04):222-224.
[11]丛玉隆,马骏龙,张时民,等.尿液细胞成分定量分析方法学研究[J].中华检验医学杂志,2006,29(3):211-214.
[12]丛玉隆,马骏龙.尿液有形成分镜检与自动化检测方法学利弊和互补分析[J].中华检验医学杂志,2009,32(6):609-611.
[13]王中全,朱秋红,宋改芳.探讨 UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿中红细胞,白细胞的干扰因素[J].中国实用医药,2013,7(33):4-6.
[14]刘常军,刘婷,董矜,等.UF-1000i尿沉渣分析仪假阳性结果分析[J].首都医科大学学报,2012,33(2):158-160.
[15]徐群飞,魏丹丹,张世锟,等.尿液干化学和尿有形成分分析显微镜复检规则的建立与验证[J].实验与检验医学,2013,31(4):311-313.
[16]张红霞,费安兴,江鸿,等.尿干化学分析法,尿沉渣分析仪法和显微镜检查法联合检测尿白,红细胞及管型结果分析[J].实验与检验医学,2012,30(3):288-290.