烧伤病房革兰阴性多重耐药菌耐药性分析

庞宗超，李惠斌

(1.潍坊医学院临床学院烧伤外科教研室，山东 潍坊 261053； 2.临沂市人民医院烧伤整形科二病区，山东 临沂 276000)

烧伤病房革兰阴性多重耐药菌耐药性分析

庞宗超1，李惠斌2

(1.潍坊医学院临床学院烧伤外科教研室，山东 潍坊 261053； 2.临沂市人民医院烧伤整形科二病区，山东 临沂 276000)

目的 分析烧伤病房革兰阴性多重耐药菌的病原菌分布及耐药性，为临床合理应用抗生素提供依据，并探讨多重耐药菌的防控策略。方法 应用VITEK2-compact全自动微生物鉴定及药敏分析系统对临沂市人民医院烧伤整形科2012年1月至2014年1月送检标本分离的菌株进行菌种鉴定，采用K-B纸片扩散法进行药敏试验，统计分析革兰阴性多重耐药菌的分布情况及其对抗菌药物的耐药情况。结果 共检出130株革兰阴性多重耐药菌，创面分泌物为其主要标本来源，占81.54%，其次为痰液，占12.30%。菌株分布以鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌为主，分别占38.46%(50/130)、29.23%(38/130)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株分离率为89.47%(34/38)、87.50%(14/16)。耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(CR-AB)对除替加环素、左氧氟沙星之外的所有测试抗菌药物均呈现高度耐药，耐药率在90%～100%之间；肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素、含酶抑制剂的复合制剂、替加环素耐药率均小于20%，而对氨基糖苷类、第三代头孢菌素类、喹诺酮类抗生素耐药率较高。铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌仅对丁胺卡那霉素有较高敏感性。结论 革兰阴性多重耐药菌对常用抗菌药物表现出较高耐药性，应及时制定防控策略，缓解细菌耐药性。

烧伤； 革兰阴性菌； 多重耐药性； 感染； 抗菌药物

烧伤患者由于皮肤软组织的损伤，皮肤的屏障功能破坏，同时创面坏死组织溶痂，创面极易发生感染，特别是大面积烧伤患者，由于病情危重，吸入性损伤，卧床，侵入性操作等原因，感染发生率极高。休克期过后，感染成为患者死亡的主要原因[1]，抗生素的应用成为有效的治疗方法，但抗菌药物的长期应用，增强了细菌的耐药性[2]，多重耐药甚至泛耐药的菌株逐渐增多，成为临床感染治疗的重点和难点[3]。为此，笔者对临沂市人民医院烧伤整形科2012年1月至2014年1月检出的革兰阴性多重耐药菌的病原菌分布及耐药性进行分析，为临床经验性应用抗生素提供依据，并为临床合理应用抗生素及制定干预措施以降低抗生素选择性压力及细菌耐药性提供参考。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

多重耐药菌株(MDROs)均从本科住院患者送检的各类样本(分泌物、痰液、血液、尿液等)中分离获得。同一患者同一时间不同标本或时间间隔小于1周的相同标本检出的重复菌株，不作重复记录[4]。

1.2 主要试剂与仪器

细菌鉴定卡、药敏卡及VITEK2-compact全自动细菌鉴定仪为生物梅里埃公司产品；M-H琼脂平板及药敏纸片为英国Oxoid公司产品。

1.3 质控菌株

铜绿假单胞菌ATCC27853，大肠埃希菌ATCC25922、ATCC35218，肺炎克雷伯菌ATCC700603均购自卫生部临床检验中心。

1.4 细菌鉴定与药物敏感实验

所有菌株使用VITEK2-compact全自动细菌鉴定仪进行鉴定，抗菌药物敏感性采用VITEK2-compact及配套的药敏卡AST-GN13和K-B纸片扩散法同时测定，受检细菌的菌液浓度为0.5麦氏单位，抗菌药物敏感性结果判断为耐药(R)、中介(I)、敏感(S)。

1.5 诊断标准

依据卫生部《多重耐药菌医院感染预防与控制指南》，对三类或三类以上临床使用的抗菌药物均表现为耐药的菌株，诊断为MDROs。

2 结果

2.1 多重耐药菌株的标本来源分布

共检出革兰阴性多重耐药菌130株，其中创面分泌物检出106株(81.54%)、痰液检出16株(12.30%)、尿液检出4株(3.08%)、血液检出4株(3.08%)，创面分泌物为革兰阴性多重耐药菌的主要标本来源，其次为痰液。

2.2 革兰阴性多重耐药菌菌株分布

130株革兰阴性多重耐药菌株，以鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌为主，分别占38.46%(50/130)、29.23%(38/130)，见表1。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株分离率为89.47%(34/38)、87.50%(14/16)。

表1 革兰阴性多重耐药菌株病原菌分布

2.3 革兰阴性多重耐药菌药物敏感实验结果

革兰阴性多重耐药菌药物敏感实验结果见表2。结果显示，耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(CR-AB)对除替加环素、左氧氟沙星之外的所有测试抗菌药物均呈现高度耐药，耐药率在90%～100%之间；肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素、含酶抑制剂的复合制剂、替加环素耐药率均小于20%，而对氨基糖苷类、第三代头孢菌素类、喹诺酮类抗生素耐药率较高；铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌仅对丁胺卡那霉素有较高敏感性。

表2 主要革兰阴性多重耐药菌药物敏感实验结果 %

“-”未检测。

3 讨论

近年来，烧伤休克期治疗技术不断提高，休克期患者死亡率大大下降，休克期过后患者感染多重耐药菌甚至泛耐药菌株是患者死亡的重要原因[5]，而革兰阴性杆菌是患者院内感染的主要细菌[6]，分析革兰阴性多重耐药菌的耐药情况及产生原因，有助于临床医师合理应用抗生素，并制定相应防治措施，缓解革兰阴性多重耐药菌的耐药性。

耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(CR-AB)在多重耐药革兰阴性杆菌中占首位，药敏结果显示CR-AB对除替加环素、左氧氟沙星之外的所有测试抗菌药物均呈现高度耐药，耐药率90%～100%。表明包括碳青霉烯类在内的绝大多数抗菌药物已不适于作为CR-AB感染高危患者的经验性用药，这应引起临床的重视，临床医师应加强对CR-AB感染患者抗生素应用的合理化和个性化，以缓解CR-AB多药耐药性。CR-AB对替加环素的敏感率为80.0%，对左氧氟沙星耐药率为20.0%，中介率为80.0%，提示替加环素可作为首选药物用于CR-AB感染高危患者。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株分离率高达89.47%(34/38)、87.50%(14/16)，表明细菌耐药状况形势严峻，这可能与第三代头孢菌素类抗生素在本科广泛应用有关。药敏结果显示肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素、含酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素、替加环素敏感性均大于80.0%，而对氨基糖苷类、第三代头孢菌素类、喹诺酮类抗生素敏感性较低，临床医师在经验性应用抗菌药物时应首选碳青霉烯类抗生素、含酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素或替加环素等抗生素。铜绿假单胞菌对青霉素类抗生素氨苄西林、阿莫西林/棒酸、磺胺类抗生素复方新诺明、头孢类抗生素头孢唑林、头孢曲松以及替加环素、呋喃妥因耐药率均为100.0%，对碳青霉烯类抗生素耐药率也高达60.0%，仅对丁胺卡那霉素的敏感性较高，敏感率为80.0%。阴沟肠杆菌对丁胺卡那霉素敏感率为80.0%，对其余测试药物均有较高耐药性，因此对多重耐药铜绿假单胞菌和多重耐药阴沟肠杆菌高危感染者，丁胺卡那霉素可作为首选治疗药物。

在经验性应用抗生素时，应加强病原学检查，提高病原学送检率，依据病原菌药敏结果及时调整抗生素应用，同时应避免患者间交叉感染，防止菌株的耐药基因水平转移，增加其耐药性[7]。近年来，多重耐药菌检出率不断提高，耐药菌的防治及细菌耐药性的缓解工作任重而道远。

[1] Church D,Elsayed S,Reid O,et al.Burn wound infections[J].Clin Microbiol Rev,2006,19(2):403-434.

[2] 赵广宇，董肇杨，曾勇，等.烧伤科患者感染病原菌的变迁及抗菌药物耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2008,18(4)：564-566.

[3] Tumbarello M,Repetto E,Trecarichi E M,et al.Multidrug resistant pseudomonas aeruginosa infections:risk factors and mortality[J].Epidemiol Infect,2011,139(11):1740-1749.

[4] 窦懿，张勤.烧伤病房六年间铜绿假单胞菌的耐药性及抗菌药物使用情况分析[J].中华烧伤杂志，2014,30(1)：9-14.

[5] 陈晓娟，黄建琼.烧伤层流病房多重耐药菌感染的相关因素分析及干预措施[J].华西医学，2013,28(10)：1486-1488.

[6] 刘树华，刘平洪，薛晓东，等.烧伤病房亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的耐药性及耐药基因分析[J].中华烧伤杂志，2014,30(1)：25-29.

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(责任编辑：况荣华)

Antibiotic Resistance in Multidrug-Resistant Gram-Negative Bacteria from Burn Wards

PANG Zong-chao1,LI Hui-bin2

(1.DepartmentofBurnsSurgery,ClinicalCollege,WeifangMedicalUniversity,Weifang261053,China; 2.theSecondWardofDepartmentofBurnandPlasticSurgery,LinyiPeople’sHospital,Linyi276000,China)

Objective To analyze the distribution and antibiotic resistance of multidrug-resistant gram-negative bacteria from burn wards,and to provide a basis for rational use of antibiotics and prevention and control of multidrug-resistant bacteria.Methods VITEK2-compact automatic microorganism system and drug sensitivity analyzer were used to identify the pathogens isolated from specimens from patients hospitalized in Department of Burn and Plastic Surgery of Linyi People’s Hospital from January 2012 to January 2014.Drug resistance was tested by K-B paper disk diffusion method.The distribution characteristics and drug resistance of multidrug-resistant gram-negative bacteria were analyzed statistically.Results A total of 130 strains of multidrug-resistant gram-negative bacteria were isolated from the specimens.Most of them were isolated from wound secretion (81.54%) and sputum (12.30%).The main pathogenic bacteria isolated were Acinetobacter baumanii (38.46%,50/130) and Escherichia coli (29.23%,38/130).The detection rates of extended-spectrum β-lactamase-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae were 89.47% (34/38) and 87.50% (14/16),respectively.Carbapenem resistant Acinetobacter baumannii isolates were highly resistant to antibacterial agents except tigecycline and levofloxacin (drug resistance rates ranged from 90% to 100%).Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolates were sensitive to carbapenems,compound preparation containing enzyme inhibitor and tigecycline (drug resistance rates were less than 20%),but resistant to aminoglycosides,third-generation cephalosporins and quinolones.Pseudomonas aeruginosa and Enterobacter cloacae isolates were only sensitive to amikacin sulphate.Conclusion Multidrug-resistant gram-negative bacteria are highly resistant to antibiotics commonly used.Therefore,strategies for the prevention and control of multidrug-resistant gram-negative bacterial infection should be promptly formulated to alleviate the bacterial resistance.

burn; gram-negative bacteria; multiple resistance; infection; antibacterial agents

2014-08-01

临沂市科技发展计划项目(201213004)

庞宗超(1988—)，男，硕士研究生，主要从事烧伤感染与创面修复的研究。

李惠斌，副主任医师，E-mail:957317600@qq.com。

R446.5

A

1009-8194(2015)01-0031-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2015.01.014