医院常见致病菌检测及其耐药情况分析

吴惠强 杜为强

·论著·

医院常见致病菌检测及其耐药情况分析

吴惠强 杜为强

目的 了解高明从化地区临床常见致病菌的分布, 分析相关致病菌的耐药现状, 为临床治疗提供依据。方法 1270株细菌培养阳性标本的病原菌, 按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准进行药物敏感试验, 根据药敏结果进行耐药情况分析。结果 在检出的1270例病原菌中, 革兰阳性菌828株, 占检出菌株的65.2%, 革兰阴性菌442株, 占检出菌株的34.8%。革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主, 其次是金黄色葡萄球菌、粪肠球菌等；革兰阴性菌以大肠埃希菌为主, 其次是奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌等；非发酵菌以铜绿假单胞菌为主, 其次是洋葱假单胞菌等。所有送检标本中, 共检出真菌280株, 成为生殖道送检标本中检出的重要病原菌。各种细菌对相应抗生素出现不同程度的耐药情况。结论 条件致病菌成为越来越重要的病原菌, 真菌感染有增多的趋势；掌握细菌耐药情况, 合理规范使用抗生素, 是感染治疗成功及延缓细菌出现耐药的关键。

微生物；感染；耐药性

近年来, 细菌耐药性的问题越来越被临床重视, 细菌耐药性的产生及耐药菌株引起治疗失败的情况越来越严重。条件致病菌成为主要致病菌的现象越来越普遍。为了掌握本地区常见致病菌(把各送检标本中培养阳性出现频率居前十位的致病菌称为常见致病菌)的病源学流行情况及变迁, 掌握常见致病菌的耐药倾向, 对本地区2014年细菌培养阳性标本1270株常见病原菌的耐药性进行检测, 并对其耐药倾向进行分析。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 收集本院2014年门诊及住院患者细菌培养标本共3123例, 细菌培养阳性标本共1270株。其中生殖道标本(男性生殖道标本指尿道分泌物、精液、前列腺液等；女性生殖道标本指阴道及宫颈分泌物)培养阳性729株, 占57.4%；大便标本培养阳性143株, 占11.3%；呼吸道标本培养阳性112株, 占8.8%；静脉血标本培养阳性95株, 占7.5%；尿液标本培养阳性95株, 占7.5%；脓液/伤口分泌物标本培养阳性46株, 占3.6%；胸/腹水标本培养阳性36株, 占2.8%；其他标本培养阳性14株, 约占1.1%。

1.2 药敏纸片 相关药敏纸片购于广东省临床检验中心。依据不同细菌选择相应药敏纸片组合试验, 采用纸片扩散法结合法国梅理埃公司生产的药敏试纸条进行试验, 操作、结果判断及质量控制均严格按照叶应妩等［1］主编的《全国临床检验操作规程》(第3版)执行。用大肠埃希菌ATCC25922、ATCC35218、金黄色葡萄球菌ATCC25923作为质控菌株。质控菌株购于广东省临床检验中心。

1.3 方法 不同标本按照全国临床检验操作规程规定的相应程序进行划线分离于37℃培养24~48 h得到纯培养菌株,脑积液、浆膜腔积液、血液等标本需同时在需氧及厌氧条件下增菌培养；大便标本用中国蓝琼脂平板及SS平板各接种1只, 以抑制杂菌生长；生殖道标本应注意需氧及厌氧培养,以免漏检。所有培养阳性标本经过革兰染色、镜检, 再转种到相应生化反应试纸条, 做生化试验及药敏试验。细菌鉴定用法国梅里埃公司生产的细菌分析软件及其相应API生化鉴定试纸条, 将细菌鉴定到种水平。

2 结果

2.1 常见致病菌分布 2014年全年共接收送检标本3123例, 分离培养出各种病原菌1270株, 培养阳性率40.7%。革兰阴性菌442株, 占总数的34.8%(其中革兰阴性杆菌占34.0%, 革兰阴性球菌占0.8%), 革兰阳性菌828株, 占总数的65.2%(其中革兰阳性球菌占43.2%, 酵母样菌占22.0%)；在所有住院患者的送检标本中, 检出阳性标本454株, 其中革兰阴性菌275株, 占住院阳性标本的60.6%, 革兰阳性菌179株, 占住院阳性标本的39.4%。在所有门诊患者的送检标本中, 培养阳性816株, 其中革兰阴性菌167株, 占20.5%, 革兰阳性菌649株, 占79.5%。在所有培养阳性标本中, 占前五位的细菌依次为：大肠埃希菌占20.4%(259株)；表皮葡萄球菌占16.8%(213株)；金黄色葡萄球菌占15.5%(197株)；铜绿假单胞菌13.3%(169株)；肺炎克雷伯菌11.6%(147株)；奇异变形杆菌、粪肠球菌、假单胞菌属、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌及其他菌属分列其后。所有送检标本中, 共检出真菌280株。

2.2 送检标本的病区分布 门诊病区740株(58.3%)；ICU病区128株(10.1%)；外科病区108株(8.5%)；内科病区97株(7.6%)；急诊科76株(6.0%)；其他病区48株(3.8%)；妇产科病区37株(2.9%)；儿科病区36株(2.8%)。

2.3 常见病原菌的药敏结果 常见革兰阳性菌［把培养阳性居前四位具有代表性的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及肠球菌］的药敏情况见表1。常见革兰阴性菌(有代表性的大肠埃希菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌)的耐药情况见表2。

表1 常见革兰阳性菌对16种抗生素的耐药率(%)

表2 常见革兰阴性菌对19种抗生素的耐药率(%)

3 讨论

随着新型抗生素不断的应用于临床, 引起病原菌谱的改变及新的耐药菌株的出现, 从而导致临床治疗失败的现象逐年增多, 经常性的监测本地区常见致病菌的情况及其变迁,掌握本地区常见致病菌的耐药倾向, 有助于临床治疗, 对减少新型细菌耐药株的出现, 具有积极意义。

由于使用抗生素的情况差异导致各地区在致病菌的分布上不尽相同［2-4］, 但是, 总体看来, 最重要致病菌仍然以大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌等最为常见。就本文统计资料来看, 本地区致病菌谱, 住院患者仍然以革兰阴性菌为主(占所有住院标本培养阳性的60.6%)；而门诊标本却以革兰阳性菌为主要病原菌(占门诊标本培养阳性的79.5%), 这表明, 即使是同一地区,病区不同, 病原菌谱就截然不同。分析其原因, 除了病区不同送检标本不同以外, 还与抗生素的不当使用促进了耐药菌在机体和医院环境内定植繁育有关, 这样就造成了条件致病菌或致病力较弱的细菌, 加入到致病菌谱系中, 成为重要的病原菌。直接的后果就是院内交叉感染及内源性感染现象增多, 引起治疗失败和出现新的耐药菌株。

就本地区目前情况看来, 革兰阳性致病菌仍然以MRSA、MRCNS、CNS及肠球菌为主要病原菌, 这与其他研究结论相近［5-8］, 其中门诊部送检标本中, MRSA有较高检出率, 药敏结果显示该类病原菌具有多重耐药性, 对大多数头孢类抗生素敏感性较低, 这与近年来临床上大量使用头孢类抗生素不无关系。但未检出耐万古霉素的葡萄球菌, 说明葡萄球菌虽然总体耐药情况还未发生根本性改变, 为医学界对抗葡萄球菌感染留下了最后的一道保障。但在美国, 已经检出11例部分或完全耐万古霉素的金黄色葡萄球菌, 这给医学界敲响了警钟。肠球菌一贯被认为致病力较弱, 但近年来发现不断检出对青霉素类及氨基糖苷类抗生素呈现高度耐药性的菌株来, 并且出现了耐万古霉素的肠球菌(VRE), 值得临床重视。

在肠杆菌科中, 常见致病菌对亚胺培南呈现出较低耐药率, 对第三代头孢类抗生素也有较低耐药率, 非发酵菌对头孢他啶、阿米卡星敏感性较好, 对其他抗生素耐药率均接近或超过50%, 值得高度关注。多种β-内酰胺酶的产生, 导致该类病原菌的抗药性明显增强, 由于β-内酰胺酶可以水解广谱青霉素类及头孢菌素类抗生素, 临床医生在治疗该类细菌感染的患者时, 应该充分关注细菌培养的药敏结果, 以此作为用药依据, 方可避免治疗失败。

值得注意的是：本文中部分内科患者、外科患者、ICU患者, 在入院后10~15 d才检出病原菌, 且培养出来的病菌呈现多重耐药现象, 表皮葡萄球菌、肠球菌等致病力较弱的细菌成为导致该类患者感染的主要病原菌, 提示有院内感染的可能；生殖道标本培养阳性729株, 占阳性标本的57.4%,真菌成为该类患者的重要病原菌, 且该类患者多为20~45岁的成年人, 提示这个年龄段的人群生殖道健康状况令人担忧。

［1］ 叶应妩, 王毓三, 申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.江苏: 东南大学出版社, 2006:715-817.

［2］ 单才华, 贺超奇.小儿败血症中葡萄球菌分布及耐药性特点.中华医院感染学杂志, 2000, 10(1):72.

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Detection of common pathogenic bacteria in hospital and analysis of its drug resistance

WU Hui-qiang, DU Wei-qiang.Foshan City Gaoming District People’s Hospital, Foshan 528500, China

Objective To understand distribution of common clinical pathogenic bacteria in Conghua district of Gaoming city, and to analyze its drug resistance, in order to provide reference for clinical treatment.Methods Drug sensitivity test was applied under national committee for clinical laboratory standards (NCCLS) criterion for 1270 strains of pathogenic bacteria as positive samples.Analysis of drug resistance was made according to drug sensitivity test outcomes.Results Among 1270 detected strains of pathogenic bacteria, there were 828 strains of gram-positive bacterium, accounting for 65.2%, and 442 strains of gram-negative bacterium, accounting for 34.8%.Gram-positive bacterium mainly included coagulase negative staphylococcus, followed by staphylococcus aureus and enterococcus faecalis.Gram-negative bacterium mainly included escherichia coli, followed by proteus mirabilis and Klebsiella pneumonia.Non-fermentative bacterial mainly included pseudomonas aeruginosa, followed by pseudomonas cepacia.There were totally 280 strains of fungus among the detection samples, and those funguses were the main pathogenic bacteria.Different bacteria had various drug resistance levels for corresponding antibiotics.Conclusion Conditioned pathogen has become more and more important as pathogenic bacteria, while fungus also has increasing trend.Control of drug resistance and rational antibiotics usage are the keys for successful infection treatment and drug resistance suspension.

Microorganism; Infection; Drug resistance

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.001

2015-01-15］

528500 佛山市高明区人民医院