杨 妍,刘 刚,*,张晓喻,胡婷婷,王战国,黎 霞,李慧敏
(1.四川师范大学生命科学学院,四川成都 610101;2.四川大学生命科学院,四川成都 610041)
青刺尖茶对高血脂症小鼠降脂的效果
杨 妍1,刘 刚1,*,张晓喻1,胡婷婷1,王战国2,黎 霞1,李慧敏1
(1.四川师范大学生命科学学院,四川成都 610101;2.四川大学生命科学院,四川成都 610041)
目的:探讨青刺尖茶汤对高血脂症模型小鼠的降血脂作用。方法:高脂饲料喂养小鼠28d,建立高血脂症模型小鼠后随机分成5组,即模型组、青刺尖茶汤低、中和高3个剂量处理组(2、6和9g/kg·bw)及血脂康阳性组(3g/kg·bw),以普通饲料喂养的同批小鼠作空白组。实验期间各组小鼠取食正常,毛洁白具光泽,且无排稀便现象。进行连续灌胃给药28d,心脏取血分离血清,检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,同时,计算肝脏指数及小鼠体重的增长量。结果:与模型组比较,各处理组的血清TG、LDL-C均显著降低(p<0.05),血清TC、HDL-C和肝脏指数均极显著降低(p<0.01);高剂量组的血清LDL-C与模型组的差异也达到极显著(p<0.01)。与空白组比较,各处理组体重的增长量均降低,低、中剂量组达极显著(p<0.01),高剂量组为显著(p<0.05),同时,模型组的肝脏指数显著升高(p<0.05),但各处理组的肝脏指数无显著差异。与模型组比较,各处理组体重的增长量、肝脏指数的降低,均呈现极显著(p<0.01)。与阳性组比较,各处理组体重的增长量、肝脏指数,均无差异性。结论:青刺尖茶汤具有控制高血脂症小鼠体重的增加、降低肝脏指数的作用,并显示良好的降低血清4项血脂指标的功效,因此,青刺尖茶具有降低高血脂症小鼠血脂的效果,显示其降血脂功能。
青刺尖茶汤,高血脂,降血脂
青刺尖PrinsepiautilisRoyle为蔷薇科李亚科扁核木属的落叶灌木,别名扁核木、枪刺果、打油果(曲靖)、鸡蛋果(云南)等[1],株高1~5米,生长于海拔1000~3000米的山坡、溪边或灌木丛中[2],其冬季开花,夏季结果,雌雄同株,主要分布云南、贵州、四川、西藏等地,巴基斯坦、尼泊尔、不丹和印度北部也有分布[3-4]。青刺尖的根、茎、叶及果实皆可入药,在云南省的纳西族、白族、彝族、摩梭族等少数民族中已有上千年的应用历史。青刺尖首载于《滇南本草》,在《贵州中草药》、《中药大辞典》中也有记载[5]。青刺尖茎叶主治痈疽毒疮,风火牙痛,枪伤,骨折,蛇咬伤[6]。
表1 高脂饲料对小鼠血脂和体重增长量的影响Table 1 Effect of high-fat diet on blood lipid level and weight increase in mice
注:与空白组比较,##p<0.01,差异极显著。
高血脂是现代社会常见慢性疾病[7],可导致动脉粥样硬化、冠心病、高血压和脂肪肝等疾病的发生[8-9],高血脂与血脂代谢异常有关,是已知诱发心血管疾病的重要因素之一[10],严重影响人体的健康。目前,治疗高血脂应用最广泛的西药是他汀类药物,但是有一定的毒副作用[11]。青刺尖是西南地区多民族习用植物药,有多种的功效,使用历史悠久。近年,我们对青刺尖种籽和茎叶的功能进行了一些研究[12-14],但青刺尖茶的降血脂功能尚未见文献报道。开发青刺尖代用茶有一定意义,本实验研究为开发青刺尖茶功能食品提供了理论的支撑。
1.1 材料与试剂
青刺尖茶,用青刺尖当年生的茎叶,经烘炒、揉捻和干燥等工艺制作而成,原料采至盐源县左所乡,成都某公司提供。雄性昆明小鼠,体重18~22g,合格证号0023513,成都达硕实验动物公司。血脂康,北京北大维信生物科技有限公司。戊巴比妥钠,北京化学试剂公司。参考吴娟[13]和文镜[14]的高脂饲料配方:基础饲料75%、蛋黄粉15%、猪油10%。
1.2 仪器与设备
R-1005型旋转蒸发仪 特康科技有限公司;TC6010L全自动生化分析仪 德国赛多利斯公司;BP211电子天平 上海沪湘仪离心机有限公司;TGL-20M台式高速冷冻离心机等。
1.3 实验方法
1.3.1 青刺尖茶的处理和血脂康混悬液的配制 称取青刺尖茶75g,以料液比1∶20加入1500mL蒸馏水[13],90℃回流提取45min,过滤,滤液减压浓缩后定容至500mL容量瓶,得浓度为0.15g/mL的青刺尖茶汤,按灌胃剂量0.3mL/20g制备6.0、2.0、1.0g/kg·bw高、中、低剂量的青刺尖茶汤。称取10g,加500mL蒸馏水配制成浓度为20mg/mL的混悬液,灌胃剂量0.3g/kg·bw。
1.3.2 小鼠高脂血症模型的建立 小鼠适应性喂养3d,90只小鼠称重后随机分成基础饲料组和高脂饲料组,两组小鼠间体重差异无显著性。高脂饲料组75只小鼠饲喂高脂饲料,其余15只小鼠饲喂普通饲料。28d后,禁食不禁水12h,断尾取血[15-16],4000r/min离心10min[17],分离血清,测定胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。
1.3.3 实验设计与统计分析 根据造模结果,取造模成功的小鼠随机分成5组:青刺尖茶汤高剂量组(6.0g/kg·bw)、中剂量组(2.0g/kg·bw)、低剂量组(1.0 g/kg·bw)、阳性组(0.3 g/kg·bw)与模型组。处理组连续给药28d,空白组和模型组给等量的蒸馏水,每3d给小鼠称一次体重,调整剂量。末次给药后禁食不禁水12h,先称重再心脏取血[18],4000r/min离心10min得血清,测定TC、TG、HDL-C和LDL-C。取血后,剥离小鼠的肝脏后,用生理盐水洗去污血,再用滤纸吸干、称重,计算肝脏指数[19]。
肝脏指数=脏器质量/小鼠质量(g/g)
实验重复3次,数据用SPSS17.0进行处理,组间比较用t检验或方差分析,多重比较采用LSD法或SNK法[20]。
2.1 高血脂模型小鼠的建立
小鼠先用不同饲料处理28d,断尾取血,测得血清4项血脂指标和体重增长量,结果见表1。
从表1可看出:不同饲料处理28d后,与普通饲料组相比,饲喂高脂饲料小鼠的体重增加量稍有增大但不显著,而血清的TC、TG、HDL-C和LDL-C均升高,且差异极显著(p<0.01),表明高血脂症模型小鼠建立成功,将造模成功的小鼠按1.3.3随机分成5组。
2.2 青刺尖茶汤对高血脂症小鼠的影响
在灌胃期间,空白组、高脂模型组及青刺尖茶汤各处理组的小鼠,均取食正常,毛洁白而具光泽,无排稀便现象。药物灌胃处理28d后,测定小鼠血脂,结果见表2。
从表2可看出:与高脂模型组比较,血清TC、TG、HDL-C和LDL-C均降低,其中,低、中和高剂量处理组的TC均有极显著差异(p<0.01),中、高剂量组的TG均有显著差异(p<0.05),而各处理组的HDL-C均具有极显著的差异(p<0.01),高剂量组的LDL-C有显著差异(p<0.05),中剂量组的LDL-C有极显著的差异(p<0.01)。与阳性组比较,青刺尖茶汤各处理组的血清指标差异性不显著。
表2 青刺尖茶汤对小鼠血脂的影响Table 2 Effect of Prinsepia utilis tea on blood lipid level in mice
注:与空白组比较,#p<0.05,差异显著;##p<0.01,差异极显著。与模型组比较,*p<0.05,差异显著;**p<0.01,差异极显著。与阳性组比较,Δp<0.05,差异显著;ΔΔp<0.01,差异极显著,表3同。
2.3 青刺尖茶汤对小鼠体重及肝脏指数的影响
灌胃处理28d后,青刺尖茶汤对小鼠体重及肝脏指数的影响,结果见表3。
由表3可知:与空白组比较,模型组体重有一定的增长量但差异不显著,各处理组体重的增长量均有降低,低、中剂量处理组均达到极显著(p<0.01),高剂量组差异显著(p<0.05)。与空白组比较,模型组的肝脏指数显著升高(p<0.05),青刺尖茶汤各处理组的肝脏指数差异不显著。与模型组比较,青刺尖茶汤处理组的体重增长量、肝脏指数两项指标均降低,且差异极显著(p<0.01)。而与阳性组比较,各处理组的体重增长量和肝脏指数差异均不显著。
表3 青刺尖茶汤对小鼠体重及肝脏指数的影响Table 3 Effect of Prinsepia utilis tea on body weight and liver index in mice
青刺尖是云南、贵州和四川等地少数民族习用的药用植物之一,在民间有悠久的使用历史,在纳西族、白族、彝族、摩梭人等少数民族中,青刺尖茎叶用于预防和治疗痔疮、便秘等疾病。本研究的结果显示,青刺尖茎叶茶汤具有明显的降血脂效果。青刺尖茎叶具有很好的利用价值,开展进一步的研究开发,可将其制成代茶饮料或保健饮品。
3.1 实验结果表明,青刺尖茶汤能有效降低高脂血症小鼠血清TC含量;中,高剂量青刺尖茶汤对降低血清TG和LDL-C有显著效果,且中剂量优于高剂量。因此,青刺尖茶汤可降低高脂血症小鼠血清中TC、TG和LDL-C的浓度,同时可控制HDL-C过度增高。青刺尖茶汤处理组的体重增长量明显低于空白组和模型组,呈一定的剂量依赖性,低、中剂量控制体重增长的效果优于高剂量。青刺尖茶汤处理组的肝脏指数明显低于模型组,而与阳性组和空白组比较,青刺尖茶汤处理组肝脏指数均无显著差异。因此,青刺尖茶具有控制体重、降低血脂的效果。
3.2 与阳性组比较,青刺尖茶汤处理组的体重增长、肝脏指数、血清中TC、TG、HDL-C和LDL-C含量均无显著差异,实验表明青刺尖茶汤的降血脂效果与阳性组相当。本实验中阳性组使用的血脂康是血脂康是北大维信研制的一种具有降血脂功能的生物制品,血脂康的降脂功效已得到充分肯定,血脂康与洛伐他汀、辛伐他汀或普伐他汀相比,其也有一定的优势[21]。青刺尖茶汤的降血脂效果与血脂康相当,而其降脂的成分与机理有待进一步的研究。
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Effect ofPrinsepiautilistea on blood lipids in hyperlipidemic mice
YANG Yan1,LIU Gang1,*,ZHANG Xiao-yu1,HU Ting-ting1,WANG Zhan-guo2,LI Xia1,LI Hui-min1
(1.College of Life Sciences,Sichuan Normal University,Chengdu 610101,China;2.College of Life Science,Sichuan University,Chengdu 610041,China)
Objective:To study the effect ofPrinsepiautilistea on blood lipid in mouse model of hyperlipidemia. Method:The hyperlipidemia mouse model was induced by high fat diet successfully and the mice were randomly divided into blank group,model group,low(2g/kg·bw),middle(6g/kg·bw),high(9g/kg·bw)dose group ofPrinsepiautilistea and positive in group. After treatment of 28d by gastric gavage,serum total cholesefol(TC),riglyceride(TG),high density lipoprotein cholesterol(HDL-C)and low density lipoprotein cholesterol(LDL-C)levels were measured by automatic biochemical analyzer,liver index was calculated. Result:Serum TG and LDL-C inPrinsepiautilistea groups were notably lower than model group(p<0.05);serum TC,HDL-C,weight increase and liver index were significantly lower than model group(p<0.01),LDL-C in high dose group was significantly lower than model group(p<0.01). Weight increase inPrinsepiautilistea groups were lower than blank group,low and middle dose group was significantly lower than blank group(p<0.01),high dose group were notably lower than blank group(p<0.05),liver index in model group was notably higher than blank group(p<0.05). Compared eachPrinsepiautilistea group with model group,TC,TG,LDL-C,HDL-C,weight increase and liver index were not significantly different. Conclusion:Prinsepiautilistea has weight relief and evident hypolipemia effect.
Prinsepiautilistea;hyperlipemia;antilipemic effect
2014-09-09
杨妍(1991-),女,硕士,研究方向:植物学。
*通讯作者:刘刚(1968-),男,硕士,副教授,主要从事天然植物成分分离、功能的研究。
四川师范大学大精设备开放基金项目(DJ2014-07);四川师范大学项目(14yb29);四川师范大学“土壤污染原位修复与绿色食品药品开发”创新团队项目;攀枝花市科技局项目(2014CY-C-1) ;西昌市教育和科学计划局2014年度科技项目。
TS272.5
A
1002-0306(2015)13-0361-04
10.13386/j.issn1002-0306.2015.13.067