泻痢固肠丸对在体和离体小肠蠕动功能的影响

徐玉萍，徐婵娟，徐金林

(安徽省庐江县中医院，安徽 庐江 231500)

泻痢固肠丸对在体和离体小肠蠕动功能的影响

徐玉萍，徐婵娟，徐金林

(安徽省庐江县中医院，安徽 庐江 231500)

[目的]：观察泻痢固肠丸(XLGCW)对在体和离体小肠蠕动功能的影响。[方法]： 采用炭末推进法，观察XLGCW对小鼠小肠炭末推进百分率的影响；制备XLGCW含药血清，观察其对大鼠离体小肠和硝酸毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠蠕动功能影响。[结果]：XLGCW能降低小鼠小肠碳末推进率，降低大鼠离体小肠和毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠的收缩频率和收缩张力。[结论]：XLGCW能够抑制小肠蠕动功能。

泻痢固肠丸；在体小肠；离体小肠；蠕动功能

泻痢固肠丸(XLGCW)为中医经典验方，由人参、白术、茯苓、甘草、陈皮、肉豆蔻、白芍、罂粟壳、诃子肉等九味中药组成，具有健脾化湿，益气固肠之功效[1]。当前有关泻痢固肠丸对小肠蠕动功能的影响尚未见研究报道，本实验采用小鼠小肠炭末推进法，观察XLGCW对小鼠在体小肠蠕动功能的影响；给大鼠灌服XLGCW，制备含药血清，观察XLGCW含药血清对正常大鼠离体小肠和毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠蠕动功能的影响，为泻痢固肠丸临床用于治疗久痢久泻提供实验依据。

1 仪器与材料

1.1 试验动物

雄性昆明种小鼠，体重(20±2)g；雄性Wistar大鼠，体重(240±20)g，购自安徽长临河医药有限公司。

1.2 药品与试剂

泻痢固肠丸(XLGCW)，北京同仁堂药业有限公司，批号：8083039；四神丸，山西康威制药有限责任公司，批号：3001602；硝酸毛果芸香碱注射液，沈阳圣元药业有限公司，批号：08060507；中华墨水，上海精细文化用品有限公司。

1.3 实验仪器

DL-5低速大容量离心机，上海安亭仪器有限公司；FA2104B型电子天平，上海精密科学仪器有限公司；BL-420S生物机能实验系统，成都泰盟科技有限公司；HW-400E恒温平滑肌槽，成都泰盟生物科技有限公司；KQ-250DE型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。

2 方法

2.1 XLGCW对小鼠小肠碳末推进率的影响

参照文献方法[2-4]，取小鼠50只，随机分为5组，即XLGCW高、中、低剂量组(剂量分别为2.0、1.0、0.5 g/kg)，四神丸组(0.9 g/kg)和空白对照组，每组10只。灌胃给药，连续5d，给药容量均为0.2 mL·10 g-1体重。空白对照组给等容量的生理盐水。末次给药前禁食不禁水12 h，末次给药后30 min，给各组小鼠灌服5%的碳末混悬液0.2 mL·10 g-1，20 min后，颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔，剪取幽门至回盲部小肠，分离肠系膜，测量小肠全长(cm)和炭末在小肠内的推进距离(cm)，计算炭末推进率。碳末推进率(%)=(碳末推进距离/小肠全长)×100%。

2.2 XLGCW对大鼠离体小蠕动功能的影响

2.2.1 XLGCW含药血清的制备 取健康wistar 大鼠12只，随机分为四组，分别为 XGW高、中、低剂量组(剂量分别为2.0、1.0、0.5 g/kg)剂量组和空白对照组。各组大鼠连续给药5d，末次给药1h后，眶后静脉丛采血，3600rpm/min离心15min，分离血清，56℃ 30min灭活，一次性微孔滤膜过滤，-20℃储藏备用。

2.2.2 台氏液的配制 称取NaCl 8.0 g，KCl 0.2 g，CaCl20.2 g，NaHCO31.0 g，NaH2PO40.05 g，MgCl20.1 g，葡萄糖1.0 g，加蒸馏水至1000 mL，溶解备用。

2.2.3 大鼠离体小肠的制备及处理 参照文献方法[5]，实验前大鼠禁食不禁水12 h，实验时用木棒敲击小鼠头部致昏迷，打开腹腔，剪取近回盲部小肠6 cm置氧饱和的台氏液中，除去肠系膜，用台式液冲洗净小肠内容物，剪成约2 cm长的肠段备用。将数显恒温平滑肌槽中温度设定为37℃，待温度恒定后，将小肠一端固定于L型钩上，放置于离体平滑肌槽中，另一端通过张力换能器连接BL-420F生物机能实验系统。固定小肠前先给予2 g的前负荷，固定后以每秒1～2个气泡的速度持续通入空气。

2.2.4 XLGCW含药血清对大鼠离体小肠蠕动活动的影响 采用“2.2.3”方法，将离体小肠段固定于离体平滑肌槽后，稳定5 min后，记录正常情况下小肠蠕动的频率和振幅。分别加入空白血清和含药血清0.4mL，观察XLGCW含药血清对大鼠离体小肠平滑肌收缩活动的影响。试验共重复5次。

2.2.5 XLGCW含药血清对硝酸毛果芸香碱激动离体小肠蠕动功能的影响 参照“2.2.3”方法，将小肠段固定离体平滑肌槽后，稳定5min，加入1%的硝酸毛果芸香碱0.05 mL，记录肠管蠕动波。10 min后，再分别向槽中加入血清0.4 mL，观察加入血清后小肠蠕动波形的变化。

2.3 数据处理与分析

3 结果

3.1 XLGCW对小鼠小肠碳末推进率的影响

表1 XLGCW对小鼠小肠碳末推进率的影响

注：与空白对照组比较：*P<0.05,**P<0.01

由表1可知，XLGCW高、中、低剂量组小鼠小肠炭末推进百分率均比空白对照组低，其中XLGCW高、中剂量组小鼠小肠炭末推进百分率显著低于空白对照组(P<0.01)。说明XLGCW能抑制小鼠小肠的推进性蠕动。四神丸亦能抑制小鼠小肠的推进性蠕动。

3.2 XLGCW含药血清对大鼠离体小肠蠕动功能的影响

由表2表明，XLGCW高、中、低剂量组小鼠小肠收缩频率均低于空白对照组，其中XLGCW高、中剂量组小鼠小肠收缩频率显著低于空白对照组(P<0.05或P<0.01)；XLGCW高、中、低剂量组小鼠小肠收缩张力均小于空白对照组，其中XLGCW高剂量组小鼠小肠收缩张力显著小于空白对照组(P<0.01)。说明XLGCW含药血清能抑制大鼠离体小肠的蠕动功能。

表2 XLGCW含药血清对大鼠离体小肠蠕动功能的影响

注：与空白对照组比较：*P<0.05,**P<0.01

3.3 XLGCW

含药血清对毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠蠕动功能的影响 由表3表明，XLGCW高、中、低剂量组小鼠小肠收缩频率均低于空白对照组，其中XLGCW高、中剂量组小鼠小肠收缩频率显著低于空白对照组(P<0.01)；XLGCW高、中、低剂量组小鼠小肠收缩张力均小于空白对照组，其中XLGCW高、中剂量组小鼠小肠收缩张力显著小于空白对照组(P<0.01)。说明XLGCW含药血清能抑制毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠的蠕动功能。

表3 XLGCW含药血清对毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠蠕动功能的影响±s，n = 10)

4 讨论

目前国内外未见有关XLGCW对小肠蠕动功能影响的研究报道，本研究以在体小肠和离体小肠为研究对象，观察了XLGCW对小肠蠕动功能的影响。

在体试验研究结果表明，XLGCW能够显著降低碳末在小鼠小肠内的推进距离，说明XLGCW能抑制在体小肠的推进性蠕动。在离体试验中，运用中药血清药理学的方法，观察了XLGCW对大鼠离体小肠和毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠蠕动功能的影响，试验结果表明XLGCW不仅能降低大鼠离体小肠的收缩频率和收缩张力，还能显著降低毛果芸香碱致兴奋大鼠离体小肠的收缩频率和收缩张力。说明XLGCW能抑制在体和离体小肠的蠕动功能，机制是否与拮抗M受体有关有待于进一步深入研究。

[1] 王义祁.方剂学[M].北京:人民卫生出版社,2005:164-165.

[2]吴旻丹,陈瑜,金邦荃.猕猴桃提取物促进小鼠离体肠段运动的初探[J].食品工业科技,2011,32(1):78-80.

[3]陈镇,夏泉,黄赵刚.白术挥发油对小鼠胃肠功能的影响[J].中国实验方剂学杂志,2009,15(8):66.

[4]李春梅,李桂生,李敏,等.荜茇水提取物对小鼠胃排空和肠推进的影响[J].中药药理与临床,2007,23(3):58-60.

[5]王婧,潘盛武,杨盛昌.银杏叶提取物对小鼠离体小肠平滑肌收缩特性的影响[J].四川动物,2009,28(3):382-385.

(责任编辑：窦 鹏)

Effect of Xieliguchangwan on Function of Intestinal Motility of Small intestine in Vivo and in Vitro

XU Yu-ping，XU Chan-juan，XU Jin-lin

(Lujiang Hospital of Traditional Chinese Medicine， Lujiang 231500, China)

Objective：To study the effect of Xieliguchangwan(XLGCW) on the function of intestinal motility of small intestine in vivo and in vitro.Methods: Effect of XLGCW on rate of small intestine facilitation in normal mice was observed.Preparing drug serum of XLGCW, contraction frequency and contraction tension of normal small intestine and excited small intestine by pilocarpine nitrate in vitro were observed. Results: XLGCW could decrease the rate of small intestine facilitation in normal mice，and also could decrease contraction frequency and contraction tension in normal small intestine and excite small intestine by pilocarpine nitrate in vitro. Conclusion: XLGCW could inhibite the function of intestinal motility.

XLGCW；Small intestine in vivo；Small intestine in vitro；Function of intestinal motility

2014-10-26

徐玉萍(1973-)，女，安徽省庐江县人，学士，副主任中药师，主要从事药品使用管理研究。

R289.5

A

1673-8772(2015)01-0044-03