血浆硫化氢浓度与IgA肾病的临床和病理特点及肾功能的相关性研究

陈晶晶等

摘要：目的 探讨血浆硫化氢（H2S）浓度与IgA肾病的临床和病理特点及肾功能的相关性。方法 对2011年9月～2014年9月经肾活检确诊为IgA肾病的65例患者的临床与病理资料进行分析。选取年龄和性别相匹配的进行健康体检的健康人群65例做为对照组。采用分光光度法测量血浆H2S浓度；比较IgA肾病患者与健康人群血浆H2S浓度的差异；并分析血浆H2S浓度与临床和病理特点及肾功能的相关性。结果 与对照组比较，IgA肾病患者血浆中H2S浓度、血清白蛋白和肾小球率过率均显著性降低（均P<0.05），而血肌酐水平和24h尿蛋白量均显著性升高（均P<0.05）。病程、血肌酐水平、肾小球积分、肾小管间质积分和24h尿蛋白定量均与血浆H2S水平的有显著负相关性（均P<0.05）。而血清白蛋白、肾小球率过率与血浆H2S水平的有显著正相关性（均P<0.05）。结论 IgA肾病患者的血浆H2S浓度低下，血浆H2S浓度的降低与IgA肾病的发生发展呈负相关。

关键词：IgA肾病；硫化氢；临床；病理；危险因素

IgA肾病是一种常见的肾小球疾病，以肾脏免疫病理显示以IgA 为主的免疫复合物沉积在肾小球系膜区和毛细血管袢有IgA 或以IgA 为主的免疫球蛋白颗粒样或团块状沉积为特征[1]。其临床表现多种多样，主要有血尿、腰痛，肌肉痛、低热、蛋白尿、水肿和高血压等，多数患者病情呈慢性进行性发展，是我国终末期肾病（ ESRD） 的主要原因之一[2，3]。其发病机制目前还没有阐明清楚[4，5]。

硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）是一种具有腐臭鸡蛋气味的气体，近来研究表明H2S广泛分布于心血管、内脏和神经系统等组织器官，其生理作用非常广泛，也参与了多种疾病的发生发展，被称为体内的第三种气体信号分子[6]。研究表明H2S参与了多种肾脏疾病的发生发展，具有肾脏保护作用。但是在IgA肾病患者中血浆H2S浓度的变化，目前还未见报道，因此本研究拟观察IgA肾病患者中血浆H2S浓度的变化，并探讨两者的关系血浆H2S浓度与IgA肾病的临床和病理特点及肾功能的相关性。

1资料与方法

1.1一般资料 收集2011年9月～2014年9月进行肾脏活检明确诊断为IgA肾病的患者共65例。排除继发性IgA肾病及其他类型的肾脏疾病。选取年龄和性别相匹配的进行健康体检的健康人群65例做为对照组。

1.2临床资料的收集 临床资料包括：年龄、性别、血压、病程和起病时的临床表现。采血检测血清白蛋白和血肌酐水平。收集尿液进行24h尿蛋白定量检测。采用预测方程（MDRD简化公式）计算肾小球滤过率（GFR）。

1.3肾活检组织病理学检查 采用直接免疫荧光法检查IgA、IgG、IgM、补体C3、C1q和纤维蛋白原。病理分型根据1997年Hass分级系统分为5型。肾小球、肾小管间质及血管的各项病理参数采用Katafuchi的半定量标准：总积分1～27分，肾小球积分1～12分，包括系膜增殖程度（0～4分）、节段损害如新月体形成、节段硬化和球囊黏连（0～4分）、球性硬化（0～4分）；肾小管间质积分0～9分，包括间质炎细胞浸润（0～3分）、间质纤维化（0～3分）和肾小管萎缩；肾血管积分为0～6分，包括管壁增厚（0～3分）和玻璃样变性（0～3分）。

1.4血浆H2S水平的测定 晨起抽取空腹静脉血1mL，离心后收集血浆。收集血浆后立即检测H2S水平。参考文献的方法[5]，在玻璃试管中加入的醋酸锌（10 g/L）0.5mL，然后加入0.1 mL的血清标本，振荡混匀，再依次加入0.5mL的对苯二胺盐酸盐（20mmol/L）和0.5mL的三氯化铁（30mmol/L），室温下孵育20min，再加入1 mL的三氯醋酸（10%），加蒸馏水2.5 mL，充分混匀，离心5min，用分光光度计检测在670 nm波长处的吸光度，根据H2S标准曲线计算血清上清液中的H2S浓度。

1.5统计学分析 计量资料以用x±s表示，计数资料以百分数表示，相关分析采用Pearson法，组间差异比较和相关分析采用t检验，采用SPSS 17.0统计软件处理实验数据，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 IgA肾病患者的临床特征 65例IgA肾病患者中有男38例，女27例，男女性别比例比为1.41：1，年龄为5岁～55岁，平均年龄为（21.41±5.36）岁，平均病程为（6.48±2.15）月。

2.2 IgA肾病患者和健康人群血浆中H2S水平及临床指标 结果如表1所示：与对照组比较，IgA肾病患者血浆中H2S浓度显著降低（H2S浓度分别为67.84±5.63μmol/L和38.21±3.19μmol/L，P<0.05）。与对照组比较，IgA肾病患者血清白蛋白和肾小球率过率均显著性降低（均P<0.05），而血肌酐水平和24h尿蛋白量均显著性升高（均P<0.05）。

2.3 IgA肾病患者的临床指标和病理指标与血浆H2S水平的相关性分析 病程、血肌酐水平、肾小球积分、肾小管间质积分和24h尿蛋白定量均与血浆H2S水平的有显著负相关性（均P<0.05）。而血清白蛋白、肾小球率过率与血浆H2S水平的有显著正相关性（均P<0.05），而肾血管积分与血浆H2S水平的没有显著相关性，见表2。

3讨论

IgA肾病是世界范围内最常见的一种免疫相关性肾小球肾病，是导致慢性肾功能衰竭的重要病因之一，可发生于任何年龄，以儿童和青壮年多见。IgA 肾病的临床表现多种多样，可以表现为无症状血尿、反复发作性肉眼血尿和蛋白尿，以及腰部疼痛、水肿、高血压和肾功能减退等。IgA肾病发病机制十分复杂，还没有完全阐明研究认为，目前的研究认为IgA肾病的发病与免疫反应和炎症介质释放异常及遗传因素等诸多因素相关密切。IgA肾病目前缺乏特殊治疗方法，主要是保护肾功能，减慢病情进展，根据患者不同临床表现及病程，采用相应的措施[7]。因此寻找IgA肾病病因的新线索和探索新的有效的治疗手段具有十分重要的意义。

H2S是一种具有腐臭鸡蛋气味的气体，研究表明H2S同NO和CO 一样，具备作为细胞间以及细胞内传递信息的信使物质的基本要求，因此被称为第三种气体信号分子。H2S在哺乳动物细胞胞浆内可以通过非酶促反应和酶促反应两条途径而产生。非酶促反应途径是指体内的糖通过糖酵解作用降解后产生的代谢中间产物与血液中的硫元素直接结合而生成H2S。而酶促反应途径产生H2S是指以L-半胱氨酸为底物，主要由胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase， CSE）、胱硫醚β合成酶（eystathionine-β-synthase，CBS）、3-巯基丙酮酸转硫酶 （3-mercaptopyruvate sulfurtransferase， 3-MST）和半胱氨酸转移酶等催化产生，这是体内H2S的主要来源，被称为内源性H2S。H2S的产生存在负反馈调控，在CSE和CBS作用下将L-半胱氨酸转变成H2S后，而过多的H2S又能反过来抑制这两种酶的活性，减少H2S的生成，维持体内H2S的正常浓度。

H2S广泛分布于心血管、内脏、神经系统和生殖系统等组织器官，其生理作用非常广泛，参与了体内许多生理过程。H2S的病理生理作用也十分广泛，参与许多疾病包括心血管、神经系统和内脏疾病的发生和发展。近年来H2S的肾脏保护作用受到人们的关注，已成为目前肾脏病领域的一个研究热点。研究显示在不同病种的慢性肾脏病患者体内的H2S水平显著降低，提示较高H2S水平可能有利于维持和保护肾脏的功能。而在糖尿病肾病大鼠肾组织中CSE的表达降低，内源性H2S的生成减少。H2S还能抑制肾脏的纤维化。

我们的研究结果显示IgA肾病患者血浆中H2S水平较健康人群显著降低。IgA肾病的病程、血肌酐水平、肾小球积分、肾小管间质积分和24h尿蛋白定量均与血浆H2S水平呈现负相关，而血清白蛋白、肾小球率过率与血浆H2S水平的呈现正相关。这些结果提示，具有肾脏保护效应的内源性H2S气体，在IgA肾病发生后会被消耗，因此患者血液中的H2S水平会降低。而血浆中H2S水平与临床进展和肾功能损伤程度密切相关，这提示增加体内H2S的水平可能是IgA肾病的一个新的治疗途径，包括补充H2S的供体硫氢化钠及上调内源性H2S产生的酶的活性和水平等。

总之，我们的研究表明IgA肾病患者的血浆H2S浓度降低，血浆H2S浓度的降低与IgA肾病的发生发展呈负相关。因此通过内源性或外源性的方法提高血浆H2S浓度，可能是防治IgA肾病的新策略，也可能是是未来研究的方向。

参考文献：

[1]Roberts IS. Pathology of IgA nephropathy [J].Nat Rev Nephrol，2014，10（8）：445-454.

[2]Chung J，Park PG，Song KI.IgA nephropathy in a patient with polycythemia vera. Clinical manifestation of chronic renal failure and heavy proteinuria [J].Am J Nephrol，2002，22（4）：397-401.

[3]Wang W，Sun Y，Fu Y，et al.The effects of both single-locus and multi-locus interaction on the clinical manifestations of IgA nephropathy in Southern Han Chinese [J].Nephrol Dial Transplant，2014，29（3）：550-555.

[4]Duan ZY，Cai GY，Chen YZ，et al. Aging promotes progression of IgA nephropathy：a systematic review and meta-analysis [J].Am J Nephrol，2013，38（3）：241-252.

[5]李利利，杨浩杰，张文静，等.尿脱落足细胞与IgA肾病的相关性研究[J].西安交通大学学报（医学版），2014，35（2）：258-262.

[6]Dongó E，Hornyák I，Benko Z，et al.The cardioprotective potential of hydrogen sulfide in myocardial ischemia/reperfusion injury （review） [J].Acta Physiol Hung， 2011，98（4）：369-381.

[7]苏晨皓，刘章锁，刘栋.IgA 肾病97 例的临床和病理分析[J].实用儿科杂志，2012，27（5）：389-390.

编辑/申磊