TTNJ—16蔬菜农药残留检测仪使用及注意事项

姚莉菊等

特约栏目主持：万勇

高级工程师，武汉市农科院农业机械化科学研究所副所长，负责科研、科技管理工作。长期在农业科技推广一线从事新产品开发和高新技术的引进、改进工作。参与“七万亩建设”相关技术规范的起草与制定；主持、完成《七万亩设施蔬菜技术集成示范推广》（农机部分）；长期从事“温室内环境智能控制系统”、“现代设施条件下水肥耦合与配方施放技术”的研究；致力于小型设施蔬菜机具开发，拥有专利5项。

农产品质量安全事关民众消费安全和社会稳定。近年来，武汉市蔡甸区以区农检站为主体，不断强化监管措施，按照统一标准为各街乡镇配备了TTNJ-16通道检测仪器，以提高蔬菜农药残留检测结果的准确性，在使用过程中建议注意以下几点。

1 试剂配制及保存

1.1 缓冲液

取一包缓冲液，加入500 mL蒸馏水，溶解搅拌均匀后密闭，于避光、阴凉处保存。

1.2 显色剂

取显色剂一瓶，加入15 mL缓冲液溶解，4℃冰箱中保存。

1.3 底物

取底物一瓶，加入15 mL蒸馏水，4℃冰箱中保存。

1.4 乙酰胆碱酯酶

取乙酰胆碱酯酶一瓶，加入3 mL缓冲液溶解，4℃冰箱中保存。

2 对照溶液测试

2.1 自动对照的设置

在试管中加入2.5 mL缓冲液，再加入100 μL酶、100 μL显色剂，摇匀后置于水浴锅中，在恒温37.5℃下放置15 min。15 min后再加入100 μL底物摇匀，立即倒入1 cm比色皿，放入仪器比色池中，按“对照”按钮，仪器开始作对照，3 min后自动对照完成。

2.2 测定

建议测定对照值在0.4～0.8，当对照值在0.3～0.4时尽快使用本试剂盒，同时冷冻保存未使用完的乙酰胆碱酯酶液。当排除温度、检测设备等其他因素后，已测定的对照值仍然<0.3，则应停止使用该瓶乙酰胆碱酯酶液，重新配制一瓶乙酰胆碱酯酶液后，尝试再次测定对照值，通常情况下仅更换乙酰胆碱酯酶液即可继续正常使用本试剂盒。

3 样品处理

3.1 取样部位

为了保证取样具有代表性，叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部；果蔬从不同个体的表皮处取样。样品不可用水冲洗，剪成1 cm×1 cm的碎片，称取样品2 g，放入烧杯中。

3.2 样品处理

在装有样品的烧杯中加入10 mL缓冲液，振荡1～2 min后过滤，用移液枪提取2.5 mL过滤后的待测液于试管中，加入100 μL酶、100 μL显色剂，摇匀。在37.5℃水浴恒温锅中放置15 min，放置时间与对照液放置时间一致。

3.3 检测

15 min后再加入100 μL底物摇匀，此时检测液开始显色反应，应立即倒入1 cm比色皿，放入仪器比色池中，按“测量”按钮，3 min后仪器测量完成，显示测量结果。当样品提取液对酶的抑制率小于50%时，样品为合格；当≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，即样品检测结果为阳性。

4 检测结果的归档

对检测结果为超标的样品要重复检测2次以上，以确保结果的可靠性。应在检测工作完成后将检测结果粘贴在记录本上，同时保存在检测仪器内，便于存档、备查等。

5 检测器皿的清洗

检测所用的比色皿，必须用洗涤液清洗，后用清水清洗干净，再晾干。不要用洗洁精之类的清洁剂，以免影响测量，不可用碱液洗涤，也不能用硬布、毛刷刷洗。试管、烧杯、剪刀一定要干净，操作过程中应分开使用，以免影响检测结果的准确性。

6 其他需注意的事项

①葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸泡。对一些叶绿素含量较高的蔬菜，也可采取整株（体）浸泡的方法，减少色素的干扰。

②试剂溶解前冷冻保存的保质期为1年；酶粉溶解后应尽快用完，可短期冷藏保存，如1周不能用完，应冷冻保存，反复冷冻不可超过3次，冷冻保存不超过1个月；底物和显色剂溶解后冷藏保存，保质期1个月，可冷冻长期保存，配制检测试剂时请勿剧烈振荡。

③样品处理时勿将样品剪得太碎。

④加入酶试剂必须定量准确，勿将液体滴在玻璃壁上，否则误差较大。向下操作。

⑤样品结果抑制率大于50%的需要重复检验2次，才能判断为阳性。

参考文献

[1] 秦桂云.蔬菜农药残留检测的方法及原理[EB/OL].（2013-05-17）[2014-02-11].http：//www.agrichem.cn/news/2013/3/25/201332514442058255.shtml.

[2] 普春，欧阳继敏.蔬菜农药残留快速检测方法介绍及注意事项[J].云南农业科技，2009（S2）：97-98.