瓜蒌皮药材质量标准研究

魏国栋，马思缇，王苏丽

(山东中医药高等专科学校，山东 烟台 264199)



瓜蒌皮药材质量标准研究

魏国栋，马思缇，王苏丽

(山东中医药高等专科学校，山东 烟台 264199)

目的：完善瓜蒌皮药材的质量标准，对瓜蒌皮药材的质量进行有效控制。方法：采用显微法观察瓜蒌皮粉末特征；参考中国药典2010年版附录相关方法，对瓜蒌皮的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物进行测定；采用HPLC法建立瓜蒌皮中3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇含量的测定方法。结果：确定瓜蒌药材显微特征；不同产地瓜蒌皮药材水分测定结果为9.65%～12.15%，总灰分为3.16%～4.99%，酸不溶性灰分为0.24%～0.46%，浸出物为32.19%～44.01%；建立HPLC法测定瓜蒌皮中3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇含量的方法，药材含量测定结果为0.033%～0.045%。结论：本研究建立的方法准确可靠，可用于瓜蒌皮药材的质量控制。

瓜蒌皮；3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇；质量标准；高效液相色谱法；显微

瓜蒌皮，又名栝楼皮，为葫芦科植物栝楼TrichosantheskirilowiiMaxim.或双边栝楼TrichosanthesrosthorniiHarms.的干燥成熟果皮，产于山东、安徽、河南、四川等地。瓜蒌皮性寒，味甘，归肺、胃经，可清热化痰、利气宽胸，用于治疗痰热咳嗽，胸闷胁痛[1]。现代研究表明，瓜蒌皮及其制剂具有扩张冠状动脉、抗心律失常、增强免疫、抑制血小板聚集、降低胆固醇、抗菌、消炎和抗癌等多种作用[2-6]。瓜蒌皮注射液已经在临床上治疗心血管系统疾病特别是心绞痛、脑梗死等方面得到广泛的应用[7,8]。随着瓜蒌皮药材和制剂在临床上的广泛应用，人们对瓜蒌皮的质量更加关注。市售相关瓜蒌皮药材的混淆品较多，难辨真伪。《中国药典》2010版一部已经收载有瓜蒌皮，但只有性状鉴别和薄层色谱鉴别项。本研究进一步完善了瓜蒌皮的质量标准，包括显微鉴定、水分、总灰分、酸不溶性灰分的检查，水溶性浸出物及3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇含量的测定，并对10批不同产地的瓜蒌皮药材样品进行了检测，制定了合理的限度，为瓜蒌皮药材的质量控制提供了依据。

1 仪器与材料

高效液相分析仪(LC-10AT 输液泵，SPD-10Avp紫外检测器，浙大N2000色谱工作站)；纯水机(Sartorius，arium 611VF)；数控超声波清洗器(KQ2200DB，江苏昆山)；电热恒温干燥箱KH-35A型(天津泰斯特仪器有限公司)；马弗炉(XL-3，天津玛福尔科技有限公司)。

甲醇(色谱纯，天津四友)；重蒸水(自制)；3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇对照品(批号：130913；四川维奇克生物科技有限公司)。10批瓜蒌皮药材购自中药材市场(2013年秋季收集)，经山东中医药高等专科学校中药鉴定教研室王苏丽教授鉴定为葫芦科植物栝楼TrichosantheskirilowiiMaxim.或双边栝楼TrichosanthesrosthorniiHarms.的干燥成熟果皮。样品收集信息详见表1。

表1 样品收集情况

2 方法与结果

2.1 显微鉴别

取10批供试品，分别粉碎，按照2010年版中国药典(一部)附录ⅡC中显微鉴别法，观察瓜蒌皮药材粉末的显微特征。本品粉末呈浅橙黄色。果皮表皮细胞，表面观类方形或类多角形，垂周壁厚度不一。石细胞较多，数个成群或单个散在，黄绿色或淡黄色，呈类方形、圆多角形，纹孔细密，孔沟细而明显。导管主要为网纹导管和螺纹导管。粉末显微图像见图1。

2.2 检查

2.2.1 水分测定 取瓜蒌皮药材，按照中国药典2010年

版一部附录Ⅸ H水分测定法第一法进行测定。每份样品平行测定2份，结果见表2。

1.果皮表皮细胞；2.石细胞；3.导管

2.2.2 总灰分、酸不溶性灰分测定 取瓜蒌皮药材，按中国药典2010年版一部附录Ⅸ K总灰分、酸不溶性灰分测定法测定。每份样品平行测定2份，结果见表2。

2.3 浸出物测定

需要留意的是，啤酒行业目前集中度很高，巨头持续吞并中小啤酒厂的可能性很大，燕京啤酒在中高端市场缺乏竞争力，未来有被并购的预期。

取瓜蒌皮药材，按照中国药典2010年版一部附录X A水溶性浸出物测定法项下的热浸法测定。每份样品平行测定2份，结果见表2。

2.4 含量测定

2.4.1 色谱条件 Phenomenex Luna C18色谱柱(250mm×4.60mm，5μm)；以甲醇—水(93∶7)为流动相；流速为1mL/min；检测波长为230nm；柱温为25℃；进样量为20μL。理论塔板数按3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇峰计算应不低于2 000。在本色谱条件下，3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇峰形良好，在供试液中与其他色谱峰分离度良好。对照品溶液及供试品溶液色谱见图2。

2.4.2 对照品溶液制备 取3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇对照品适量，精密称定，加二氯甲烷制成每1mL含50μg的溶液，即得。

2.4.3 供试品溶液制备 取本品粉末(过60目筛，40℃干燥6h)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入二氯甲烷10mL，密塞，称定重量，超声处理(功率200W，频率40kHz)30min，放冷，再称定重量。用二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液。续滤液以流动相适当稀释后，即得。

2.4.4 线性关系考察 精密称定3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇对照品适量，加二氯甲烷制成浓度为800μg/mL的对照品储备液。精密量取对照品储备液5mL置于10mL量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，作为1号对照品溶液。再精密量取1号混合对照品溶液5mL置于10mL量瓶中，加流动相定容至刻度，作为2号对照品溶液。依次采取对半稀释的方法得到3～5号对照品溶液。按上述色谱条件进样20μL测定，以峰面积(Y)与进样浓度(X)进行回归分析，得回归方程为：Y = 3 791.99X-798.09，R2=0.999 5，结果表明,3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇在25～400μg/mL范围内呈良好的线性关系。

图2 对照品溶液(A)及供试品溶液(B)色谱

2.4.5 精密度试验 取同一份供试品溶液，连续重复进样5次，测定峰面积，计算3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇峰面积的RSD为1.17%，表明日内精密度良好，符合分析方法的要求。取供试品溶液，连续进样3天，每天连续重复进样5次，计算3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇峰面积的RSD为1.65%，表明日间精密度良好。

2.4.7 重复性试验 取瓜蒌皮药材5粉末6份，各约0.5g，精密称定，按照“2.4.3”项下方法制备供试品溶液，进样20μL，记录色谱图，计算含量。6份供试品中3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇峰面积RSD为1.56%，表明本方法重复性良好。

2.4.8 加样回收率试验 取已知含量的供试品5份，每份约0.5g，精密称定，加入相同量的3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇，分别按“2.4.3”项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样20μL测定，计算回收率，结果见表3。3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇平均回收率为100.77%，RSD为1.02%，表明该方法回收率良好。

表3 3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇回收率结果 (n=5)

2.4.9 样品含量测定 取10批瓜蒌皮药材，每批平行3份，按“2.4.3”项下方法制备样品溶液，按上述方法进样测定。以干燥品计算3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的含量，结果见表2。10批瓜蒌皮药材中3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的含量为0.033%～0.058%。

3 讨论

本文从显微鉴别、检查、浸出物、含量测定等方面对10批瓜蒌药材进行分析，考察相关指标，为瓜蒌皮质量标准的制定提供参考。

在进行瓜蒌皮的粉末显微观察时，还发现存在草酸钙簇晶，因草酸钙簇晶在其他药材中也普遍存在，故未作为主要显微特征。瓜蒌皮来自栝楼或双边栝楼的干燥成熟果皮，而两者的干燥成熟果实做瓜蒌药材使用。药典中采用水溶性浸出物的热浸法测定瓜蒌浸出物的含量。考虑到瓜蒌皮是瓜蒌果实的果皮，其中所含有的油脂性成分较瓜蒌少，因此也以水为浸出溶剂测定瓜蒌皮浸出物含量。在分别采用冷浸法和热浸法测定浸出物时发现，采用两种方法得到的浸出物含量差别不大，考虑到省时及节省溶剂的原则，采用热浸法。《中国药典》2010版中瓜蒌项下的含量测定以3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇为控制成分，本研究参考药典中瓜蒌项下的含量测定方法，考察采用HPLC法测定瓜蒌皮药材中3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的适应性和准确性，并对瓜蒌皮药材进行测定。另有文献采用和本文不同的色谱条件，得到了瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱，为瓜蒌皮的质量评价提供了依据[9]。

根据不同产地瓜蒌皮测定结果，并结合药典中已有同类药材的标准，建议规定瓜蒌皮药材的含水量不得高于14.0%，总灰分不得多于6.0%，酸不溶性灰分不得多于0.6%，以干燥品计算水溶性浸出物不得少于30.0%，以干燥品计算含3，29-二苯甲酰基栝楼仁三醇不得少于0.030%。

[1] 国家药典委员会．中华人民共和国药典[S]．一部.北京：中国医药科技出版社，2010：105.

[2] 杨征，邱敏，郭晓华，等．瓜蒌皮提取物对PDGF-BB所致血管平滑肌细胞增殖周期的影响[J]．中国动脉硬化杂志，2012，20(10)：899．

[3] 孟庆敏，唐欣，巴彩凤．瓜蒌皮与前列地尔预处理对心肌缺血再灌注的影响[J]．医学与哲学，2012，33(18)：44．

[4] 张霄翔，王艳苹，王玉凤，等．瓜蒌皮对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响[J]．中国药房，2009，20(9):648-650．

[5] 王冬梅，代世元，芦丽莉，等．瓜蒌皮提取物对大鼠动脉粥样硬化保护作用的实验研究[J]．北华大学学报：自然科学版，2008，9(2)：128-131.

[6] 卢鹏飞，施伟丽，王志国，等. 瓜蒌皮的临床应用及作用机制[J]．中医杂志，2013，54(16)：1428-1431．

[7] 赵然尊，石蓓，王冬梅，等．瓜蒌皮注射液治疗冠心病稳定型心绞痛合并2型糖尿病的临床观察[J]．中国新药杂志，2010，19(20)：1871-1884．

[8] 周广怡，聂岁锋，戴良．瓜蒌皮注射液对脑梗死患者血流动力学的影响[J]．现代预防医学，2012，39(9)：2307-2309．

[9] 史国玉，刘伟，耿岩玲，等. 瓜蒌皮药材的HPLC指纹图谱[J]．中国实验方剂学杂志，2014，20(1)：73-76.

(责任编辑：魏 晓)

Quality Standard Study on Trichosanthis Pericarpium

Wei Guodong, Ma Siti，Wang Suli

(Shandong College of Traditional Chinese Medicine, Yantai 264199,China)

Objective:To establish quality standard of Trichosanthis pericarpium in order to control its quality.Methods:The characteristics of the powder of Trichosanthis pericarpium was observed by microscopic identification. The tests of water content, ash, acid-insoluble ash and water-soluble extractives of Trichosanthis pericarpium were carried out according to the methods recorded in appendix of Chinese Pharmacopeia ( 2010 edition，volume 1). The HPLC method was established to determine the content of 3,29-didenzoyl-karounitriol.Results:The microscopic characteristic of Trichosanthis pericarpium powder was identified. The results of water content, ash, acid-insoluble ash and water-soluble extractives of Trichosanthis pericarpium were 9.65%～12.15%, 3.16%～4.99%, 0.24%～0.46% and 32.19%～44.01% respectively. The content of 3,29-didenzoyl-karounitriol of Trichosanthis pericarpium was 0.033%～0.045% by HPLC methods.Conclusion:The established qualitative and quantitative methods in this study were accurate and reliable, which could be used for the quality control of Trichosanthis pericarpium.

Trichosanthis Pericarpium; 3,29-didenzoyl-karounitriol; quality standard; HPLC; microscopic

2014-12-08

魏国栋(1988-)，男，山东中医药高等专科学校助教，研究方向为中药加工和药用植物资源。E-mail：wgdong2008@126.com

R284

A

1673-2197(2015)13-0029-03

10.11954/ytctyy.201513012