不同方法制备竹沥镇咳祛痰药效学研究

王鹏飞，许润春，李江维，张喻娟，余 娟

(成都中医药大学 药学院，四川 成都 611137)



不同方法制备竹沥镇咳祛痰药效学研究

王鹏飞，许润春*，李江维，张喻娟，余 娟

(成都中医药大学 药学院，四川 成都 611137)

目的：研究不同方法制备竹沥在镇咳与祛痰方面的药效学差异。方法：采用小鼠氨水引咳嗽实验和小鼠气管酚红分泌实验，观察压榨竹沥、烤制竹沥、煎煮竹沥对小鼠镇咳与祛痰作用的影响。结果：不同方法制备竹沥均能显著延长氨水引发小鼠咳嗽的潜伏期，降低咳嗽次数，促进小鼠气管酚红的分泌，与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论：不同方法制备的竹沥均具有明显的镇咳与祛痰作用。

竹沥；镇咳；祛痰；药效学

竹沥为禾本科植物青杆竹(BambusatulldoidesMunro)、粉绿竹(PhfllostachysglaucaMccluve)及同属的竹竿经火烤灼而流出的淡黄色澄清液体，具有清热豁痰、清心定惊的功效，主治痰热咳喘、肺热痰雍等症，是中医镇咳祛痰之要药[1-2]。现代药效研究同样显示，竹沥具有良好的镇咳与祛痰作用[3]。然古代本草记载之竹沥，均为用火烤制得的澄清液体，现代制备多采用压榨或煎煮法制备竹沥，古今两者制备方法有较大差异。本研究拟采用烤制法、煎煮法、压榨法制备竹沥，研究其在镇咳与祛痰两方面的药效学差异。

1 材料

1.1 试验药物

粉绿竹采于江西省南昌市湾里区江西中医药大学，经方清茂教授鉴定为刚竹属刚竹组粉绿竹。烤制竹沥：取粉绿竹的鲜杆500g，每两节锯成一段(约50cm长)，两端去节，用电炉加热中部，收集两端流出的汁液，烤制无汁液渗出，得烤制竹沥50mL。压榨竹沥：取粉绿竹的鲜杆500g，劈成小片，置于压榨机中，逐渐增加压力至40MP，保持至无汁液流出，收集流出的汁液，得压榨竹沥100mL,减压浓缩至50mL。煎煮竹沥：取粉绿竹的鲜杆500g，劈成小片，置于圆底烧瓶中，加水淹没竹片，加热煮沸1h，过滤，滤液浓缩至50mL，即得。

1.2 动物

SPF级昆明种小鼠，体重(20±2)g，雌雄各半，由成都达硕生物科技有限公司提供，实验动物许可证号：SCXK(川)2013-24。

1.3 试剂与仪器

氯化铵(成都科龙化工试剂厂，批号:20130612)，苯酚红(成都科龙化工试剂厂，批号：040609)，NaHCO3(成都科龙化工试剂厂，批号：20110824),氨水(成都科龙化工试剂厂，批号：20120321)，复方磷酸可待因口服液(澳美制药，批号：1308102)，鲜竹沥液(四川通源制药有限公司，批号：1305030)，UV-1700型分光光度计(日本岛津公司)。

2 方法

2.1 不同方法制备竹沥镇咳作用研究[4-5]

昆明种小鼠60只随机分为空白组、阳性组、烤制组、压榨组、煎煮组、上市品组，每组10只。适应性喂养3天后，空白组、阳性组分别灌胃蒸馏水，烤制组、压榨组、煎煮组、上市品组分别灌胃烤制竹沥、压榨竹沥、煎煮竹沥、上市品竹沥，分别按照表2剂量灌胃给药，连续给药7d(可待因仅第7天给药1次)。于末次给药后1h(可待因给药后30min)开始实验。将小鼠置于钟罩中，向密闭钟罩(2L)内喷入0.3mL浓氨水，观察和记录小白鼠的咳嗽潜伏期和3min内的咳嗽次数。

2.2 不同方法制备竹沥祛痰作用研究[4-5]

2.2.1 实验操作 昆明种小鼠60只随机分为空白组、阳性组、烤制组、压榨组、煎煮组、上市品组，每组10只。适应性喂养3d后，空白组灌胃蒸馏水，阳性组、烤制组、压榨组、煎煮组、上市品组分别灌胃氯化铵、烤制竹沥、压榨竹沥、煎煮竹沥、上市品竹沥，分别按照表3剂量灌胃给药，连续给药7天。造模前禁食不禁水12h，末次给药30min后每只小鼠腹腔注射0.25%酚红溶液0.5mL，再隔30min后脱颈椎处死。将小鼠仰卧位用大头针固定于木板上，颈部拉直，切开颈正中皮肤，分离出气管，在气管下穿一线，以备固定针头。用1mL注射器抽取5%碳酸氢钠溶液0.5mL，接上磨钝的7号针头，从甲状软骨处插入气管内约0.3～0.5cm，用线结扎固定，避免针头滑落。来回抽洗3次，取下注射器，将冲洗液注入小试管内，重新吸取5%碳酸氢钠溶液0.5mL，抽洗，重复2次，将3次冲洗液合并，合并洗出液后于3 000r/min离心机中离心15min，上清液在1700型分光光度计上于波长546nm处，测定酚红吸收度值A。

2.2.2 标准曲线制备 精密称取苯酚红10.27mg，置100mL容量瓶中，加入5%NaCHO3至刻度，摇匀，即得0.1mg/mL的对照品溶液。精密吸取对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL于10mL容量瓶中，分别加入5%NaCHO3，定容，摇匀。按照中国药典附录中分光光度法于546nm处测定吸光度值A。以吸光度值A为纵坐标，浓度为横坐标，得回归方程：A=0.136 4X+0.036 7，r=0.999 9，结果表明，苯酚红含量在0～14.0μg/mL范围内呈现良好的线性关系(见表1)。

表1 不同浓度酚红溶液紫外吸收值

2.3 统计学方法

3 结果

3.1 不同方法制备竹沥对小鼠氨水引咳嗽试验的影响

与空白组比较，烤制竹沥、压榨竹沥、煎煮竹沥能够显著延长氨水引发小鼠咳嗽的潜伏期，明显减少咳嗽次数，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，表明不同制备方法对氨水引发小鼠咳嗽具有抑制作用。三种不同制备方法竹沥比较，显示烤制竹沥可能具有更好的抑制效果，但与其他制法组比较无统计学差异。

组别动物数(n)给药剂量(·kg-1)咳嗽潜伏期(s)3min咳嗽次数空白组阳性组烤制组压榨组煎煮组上市品组10101010101020mL40mg20mL20mL20mL20mL30.7±13.273.4±16.1△△59.8±17.4△△50.5±13.6△△47.7±21.0△55.2±15.5△△93.6±19.725.9±16.5△△35.1±18.5△△48.3±20.1△△58.2±13.5△47.4±15.2△△

注：与空白组比较，△P<0.05，△△P<0.01。

组别动物数(n)给药剂量(·kg-1)酚红吸收值(A)酚红分泌平均值(μg/mL)空白组阳性组烤制组压榨组煎煮组上市品组10101010101020mL1g20mL20mL20mL20mL0.168±0.0571.013±0.219△△0.825±0.192△△0.627±0.216△△0.579±0.183△0.724±0.118△△0.963±0.1487.158±1.3365.779±1.1394.328±1.3153.976±1.0735.038±0.596

注：与空白组比较，△P<0.05，△△P<0.01。

3.2 不同方法制备竹沥对小鼠气管分泌酚红试验的影响

与空白组比较，烤制竹沥、压榨竹沥、煎煮竹沥能够显著促进小鼠气管酚红的排泌，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)，表明不同制备方法对小鼠祛痰具有较好的作用。三种不同制备方法竹沥比较，显示烤制竹沥可能具有更好的祛痰效果。

4 讨论

竹沥具有悠久的使用历史和明确的临床疗效，现代研究表明，其含有糖类、氨基酸[6]及愈创木酚[7]等物质。烤制法制备竹沥，竹竿外部受火焰高温灼烧而促使保留在竹竿内含水成分快速渗出、聚集成液体流出。煎煮法制备竹沥，是竹竿内部有效物质向外部渗出的过程。压榨法制备竹沥，竹竿受外部强大力的作用，促使内部含水物质向外渗出，聚集形成液体，此过程未受高温作用。本研究显示，分别采用烤制、煎煮、压榨三种不同方法制备得到竹沥，均具有抑制氨水引发小鼠咳嗽、增加小鼠气管分泌酚红的作用，即不同制备方法得到的竹沥均具有镇咳与祛痰的药理作用。三组间比较分析，烤制组略具有更强的镇咳与祛痰的药理作用。竹沥是中医镇咳祛痰要药，本草记载其制备方法多为烤制法，制备方法不便于现代大规模的生产，抑制了竹沥这味具有良好疗效镇咳祛痰药物的发展。本研究显示，采用现代压榨工艺获得之竹沥具有与烤制竹沥接近的治疗功效。我国竹类资源丰富，竹沥药效显著，竹沥的深入研究与开发，必将为患者带来福音。

[1] 张廷模，邓家刚，周祯详，等.临床中药学[M].上海：上海科学技术出版社，2006:265-266.

[2] 蔡华芳.鲜竹沥镇咳祛痰作用的实验研究[J].中国实验方剂学杂志，2007,13(5)：43-44.

[3] 黄世得，夏侯林，张安国，等.慈竹沥的药理和和临床实验研究[J].中医药学报，1995(4)：20-22.

[4] 金晓飞，李红，蒋梦良.不同种竹沥的化学组分分析及其药效研究[J].中医药导报，2014,20(5)：82-85.

[5] 张梅，雨田，舒筱琳，等.川明参镇咳祛痰药理作用研究[J].时珍国医国药，2006,17(7)：1121-1122.

[6] 高吾名.竹沥油中主要无机元素和氨基酸含量的测定[J].中成药，2000，22(8):553-554.

[7] 李红，蒋梦良.HPLC法测定不同种类竹子的竹沥中愈创木酚的含量[J].湖南中医药大学学报，2010,30(5)：38-40.

(责任编辑：魏 晓)

Antitussive and Expectorant Effects of Bamboo Juice Prepared by Different Methods

Wang Pengfei，Xu Runchun*，Li Jiangwei，Zhang Yujuan，Yu Juan

(Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137,China)

Objective:To study the antitussive and expectorant effects of Bamboo juice which prepared by different methods.Methods:Experiments in mice which cough was induced by ammonia and cited trachea phenol red secretion , observating the differences of baked Bamboo juice, boiling Bamboo juice in antitussive and expectorant efficacy.Results:Bamboo juice which prepared by different methods all can significantly prolong the incubation period of cough in mice caused by ammonia (P<0.01), reduced cough frequency (P<0.01), the promotion of mouse tracheal phenol red secretion (P<0.01).Conclusion:Bamboo juice which prepared by different methods have obvious antitussive and expectorant effect.

Bamboo Juice; Antitussive;Expectorant

2015-01-29

王鹏飞(1989-)，男，成都中医药大学硕士研究生，研究方向为中药炮制与制剂。

许润春(1973-)，女，博士，成都中医药大学副教授，研究方向为中药炮制与制剂。E-mail:309786953@qq.com

R285.5

A

1673-2197(2015)13-0010-02

10.11954/ytctyy.201513004