龚 伟
(重庆三峡医药高等专科学校,重庆 万州 404020)
三峡库区引种百合与原产地百合品质比较
龚 伟
(重庆三峡医药高等专科学校,重庆 万州 404020)
目的:为探索不同品种百合在三峡库区种植的适宜程度。方法:以三峡库区3种引种百合为研究对象,通过测量百合的外观性状以及采用紫外分光光度法检测百合多糖和皂苷含量,对不同来源百合进行比较研究。结果:原产地和引种地百合的单体鲜重以及多糖、皂苷含量均存在差异,其中兰州百合的单体鲜重差异最大,重量相差69g;多糖含量差异最大的也是兰州百合,原产地为19.46%,引种地为14.58%;龙牙百合和卷丹百合上述两项差异较小;3种百合的皂苷含量在原产地和引种地间差异范围为0.36~0.46mg/g。结论:兰州百合在引种地的产量和多糖含量比原产地均显著下降,不适宜引种;龙牙百合和卷丹百合的产量以及多糖、皂苷含量在原产地和引种地间无明显差异,适宜三峡库区引种种植。
百合;品质比较;多糖;皂苷;引种
百合为百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)所有种的总称,是一种药食兼用的花卉。百合为《中国药典》收载品种,用量较大。中医认为百合性味甘寒,有养阴润肺、清心安神之功,用于治疗阴虚久咳、痰中带血、虚烦惊悸、失眠多梦、精神恍惚等症[1]。现代药理研究表明百合具有抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳、降糖和提高免疫力等作用,在食用时也有润肺止咳、宁心安神、补中益气的作用[2-3]。近年来,随着人们对百合食用需求的增加,百合种植规模不断扩大,但由于药农引种的盲目性,使得三峡库区百合品质参差不齐,无法形成规模效应。现有文献资料表明,百合中的百合多糖和皂苷是对人体有益的成分,不同品种百合中多糖和皂苷含量有差别[4],但这些百合的种植区域也不同。笔者研究在相同区域内种植的不同品种百合品质是否有差异,同时与原产地百合品质进行比较,为三峡库区引进适宜百合品种提供参考。
1.1 材料与试剂
于2013年9月份采自重庆市奉节县引种的龙牙百合、兰州百合以及卷丹百合,剥取鳞片,沸水微烫后烘干;分别在原产地购买上述3种百合。薯蓣皂苷元对照品(中国食品药品检定研究院)、葡萄糖对照品;乙醇、正丁醇、甲醇、苯酚、浓硫酸均为分析纯。
1.2 主要仪器
TU-1901紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),GZX-101-3电热鼓风干燥箱(上海圣科仪器设备有限公司),FA1004分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司),KQ-250DA数控超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司),RE-25134旋转蒸发仪(上海嘉鹏科技有限公司)。
2.1 百合性状测量
将百合样品洗净后风干,采用五点取样法,每种样品选取50个[5],测量其重量和直径。
2.2 百合皂苷样品溶液制备[6-8]
将百合粉碎后过40目筛,粉末70℃干燥2h。精确称量百合粉末3g,加80%乙醇50mL,超声波提取45min,提取3次,过滤。合并滤液后回收乙醇,加适量水溶解后用水饱和正丁醇15mL萃取3次,回收正丁醇,所得浸膏用甲醇溶解,定容为50mL,精密量取1mL置于50mL容量瓶,定容后备用。
2.3 百合多糖样品溶液制备[9-10]
将百合皂苷提取后的百合粉末中的乙醇挥干,加水40mL,超声波提取30min,提取3次,减压浓缩至10mL,将其移入100mL容量瓶中加水至刻度,精密量取1mL置于100mL容量瓶,定容后备用。
2.4 百合皂苷标准曲线[11]
精确称量5mg薯蓣皂苷苷元标准品,甲醇溶解后置于50mL容量瓶中,甲醇定容。精确移取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL对照品溶液于带塞试管中,低温烘干溶剂后冷却,加入0.3mL香草醛冰醋酸和0.7mL高氯酸溶液,混匀后60℃水浴加热20min,取出冰水冷却后加冰醋酸5mL,混匀后避光放置30min,在535nm处测其吸光度,以对照品含量X(mg/mL)为横坐标,吸光度Y为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程Y=6.371 4X+0.015 9,r=0.998 3,薯蓣皂苷在0.02~0.12mg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系。
2.5 百合多糖标准曲线[12]
葡萄糖对照品在105℃干燥2h至恒重,精确称量50mg置于50mL容量瓶中,加蒸馏水定容。再精确量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL葡萄糖溶液于50mL容量瓶中,分别加蒸馏水定容。移取浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/mL的葡萄糖对照品溶液各2mL,分别加5%苯酚溶液1mL后摇匀,再加浓硫酸5mL摇匀,沸水保温20min,取出冰水冷却10min。取2mL蒸馏水为空白液同上操作。将上述溶液在490nm波长处测吸光度,以对照品含量X(mg/mL)为横坐标,吸光度Y为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程Y=12.299X+0.0418,r=0.992 5。
2.6 精密度实验
将薯蓣皂苷和葡萄糖对照品溶液按各自显色条件操作,测6次吸光度。薯蓣皂苷对照品结果为0.415、0.414、0.413、0.404、0.407、0.412,RSD为1.06%;葡萄糖对照品结果为0.447、0.445、0.438、0.445、0.434、0.443,RSD为1.13%。
2.7 稳定性实验
将重庆奉节产龙牙百合皂苷和多糖样品溶液按各自显色条件操作,显色后在0、20、40、60、80、100、120min测定吸光度。百合皂苷样品结果为0.478、0.472、0.476、0.465、0.475、0.467、0.475,RSD为1.03%;百合多糖样品结果为0.349、0.352、0.347、0.343、0.339、0.341、0.342,RSD为1.37%。结果表明百合皂苷和多糖用本方法测定在2h内稳定性良好。
2.8 重现性实验
精确称取同批重庆奉节产卷丹百合样品3g各5份,配制皂苷和多糖样品溶液,按各自显色条件操作后测吸光度,结果显示,百合皂苷平均含量为8.844mg/mL,RSD为1.89%;百合多糖平均含量为6.85%,RSD为2.21%。
2.9 回收率实验
称取重庆奉节产卷丹百合粉末样品约2g各5份,分别加入薯蓣皂苷对照品约10mg,按百合皂苷样品溶液制备,测吸光度,结果显示平均回收率为101.30%,RSD为3.11%。
剩余百合粉末分别加入葡萄糖对照品约0.1g,按百合皂苷样品溶液制备,测吸光度,结果显示平均回收率为98.87%,RSD为2.74%。
2.10 样品含量测定
分别称取不同来源百合样品各3g,分别制备百合皂苷和多糖样品溶液,百合皂苷样品溶液取1mL,多糖样品溶液取2mL,按各自标准曲线方法显色,测吸光度,按各自回归方程计算皂苷与百合含量。
3.1 原产地与引种地百合性状比较
将百合分瓣繁殖,种植3年后单个百合鲜重和直径见表1。由表1可以看出,龙牙百合和卷丹百合在引种地的鲜重和直径比原产地稍低,但没有太大的差异,兰州百合在引种地的鲜重和直径明显偏低。
表1 原产地与引种地百合产量比较
3.2 原产地与引种地百合皂苷含量比较
由表1可以看出,各种百合皂苷含量在原产地和引种地间没有较大的差别,其中,卷丹百合在引种地的皂苷含量略高于原产地。
3.3 原产地与引种地百合多糖含量比较
从表2可以看出,龙牙百合和卷丹百合的多糖含量在原产地和引种地间没有较大的差别,其中龙牙百合在引种地的多糖含量略高于原产地。兰州百合引种地多糖含量明显低于原产地。
表2 各样品百合皂苷和多糖含量比较
从以上测定结果不难看出,龙牙百合和卷丹百合的皂苷和多糖含量在原产地和引种地间没有显著的差别,在鲜重和直径上引种地产量偏低,这可能与引种地百合种植海拔高度偏低有关(部分种植地海拔只有600m),也可能是引种百合在引种地需适应当地环境,增长种植年限可提高产量;而兰州百合在引种地多糖含量偏低,产量更是显著降低,这可能与两地的气候有很大关系,兰州属于典型的温带大陆性气候,而重庆三峡库区属于亚热带季风性湿润气候,兰州百合不能适应重庆地区的气候条件,所以在鲜重、直径和含糖量上与原产地均有较大差异。重庆三峡库区、江苏宜兴和湖南隆回气候均属于亚热带季风气候,故龙牙百合和卷丹百合适应三峡库区气候,可引种上述两种百合在三峡库区种植。
本文通过对百合鲜重和主要药用成分含量的研究,较为全面地反映了百合的品质,为其他药材引种种植品质研究提供了一种方法。在百合多糖和皂苷的含量研究中,从一份样品中分别获得多糖和皂苷的样品溶液,样品使用量少,采用分光光度法检测多糖和皂苷含量的方法简单、经济、重现性高,可作为百合多糖和皂苷含量的检测方法之一。
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(责任编辑:宋勇刚)
2015-04-01
重庆市科技攻关计划项目(2011AC5062);重庆市万州区科委项目(201301005)
龚伟(1980-),男,硕士,重庆三峡医药高等专科学校讲师,研究方向为药物含量分析。
R282.2
A
1673-2197(2015)17-0032-02
10.11954/ytctyy.201517016