几种杀菌剂对林芝大棚番茄灰霉菌的毒力测定

庞 佩，苏 成，翟云霞，巩文峰，旺 姆

（西藏大学 农牧学院，西藏 林芝860000）

1 引言

灰霉病是全世界蔬菜、观赏植物、果实甚至一些大田粮食作物上发生最普遍和分布最广泛的病害，是温室种植植物最常见的病害［1］。目前，在世界范围内，灰霉菌（Botrytis.cinerea）侵染葡萄、蔬菜、浆果以及核果类作物，造成严重的经济损失，它不仅能引起田间损失，甚至在果实的储存和运输中同样造成危害［2］。自20世纪70年代以来，我国在防治番茄灰霉病上相继使用多菌灵、甲基托布津、速克灵等化学药剂［3～4］，由于长期连续使用同一种药剂（如多菌灵），不仅使环境受到污染，也使病原菌产生了严重的抗药性问题［5～6］。本实验通过对6种不同化学药剂进行室内毒力测定，了解该6种药剂地区对番茄灰霉菌的毒性强弱，筛选出防治效果较好的药剂，为番茄灰霉菌抗药性治理提供理论参考。

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 供试菌种

采取林芝地区温室大棚番茄病果进行室内分离、纯化获得的番茄灰霉菌菌种，并良好保存于实验室内。

2.1.2 供试药剂

供试药剂500g/L扑海因SC，拜耳作物科学（中国）有限公司生产；50% 腐霉利WP，海南正业中农高科股份有限公司；70%纯托津超微 WP，山东东信生物农药有限公司；25%腐霉·福美双 WP，陕西美邦农药有限公司；80%多菌灵 WP，江苏太仓市农药厂有限公司；75%百菌清WP，海南正业中农高科股份有限公司。

2.2 试验方法

采用菌丝生长速率法［7］，将提前用灭菌水稀释好的6种供试药剂（5 000mg/L）的母液分别以无菌水按倍数逐步稀释为500μg/mL、200μg/mL、50μg/mL、20μg/mL、12.5μg/mL的药液，在培养基为50℃左右时，用移液枪分别取1mL药液于9mlPDA培养基中，混合均匀，制成带药培养基平板，以不加任何药剂的培养基为空白对照，重复3次。

从实验室取出保存的番茄灰霉菌，活化后，在培养好的平板边缘用无菌打孔器打取直径为5mm的菌饼，分别移到带药和对照平板上，在20℃恒温培养箱培养3d后，运用十字交叉法测量菌落直径。计算出菌落直径的平均值，将菌丝生长抑制率换算成y，药剂浓度换算成x，求得线性回归方程y=kx＋b，求出各菌株的抑制中浓度（EC50）［8］。菌丝生长抑制率公式为：

生长抑制率（%）=（对照菌落净直径（mm）- 处理菌落净直径（mm）/对照菌落净直径（mm）×100%。

3 结果与分析

3.1 6种药剂剂对番茄灰霉菌的相对抑菌率

据表1可知，在一定范围内，6种药剂随浓度的增加，相对抑菌率增大，浓度越大，抑菌效果越明显。

3.2 6种药剂对番茄灰霉菌的EC50比较值

6种药剂对番茄灰霉病的室内毒力测定表明（表2），百菌清、扑海因、纯托津、多菌灵、腐霉利、腐霉 .福美双对番茄灰霉病菌的质量浓度EC50分别为9.944、0.632 3、1.402 1、0.466 7、5.646 1和0.286 9μg/mL。其中，腐霉 .福美双的EC50最小，说明对番茄灰霉菌的毒力最大，而多菌灵的EC50最大，说明对番茄灰霉菌的毒力最小。

4 结语

室内毒力测定实验表明，在防治番茄灰霉病时首选腐霉·福美双，其次是百菌清、朴海因。在选择药剂时，要交替使用，可以提高防效。而多菌灵的毒力最差，可能是长期单一使用多菌灵，使灰霉菌对此药剂产生了抗药性，因而多菌灵不再适合单独使用。因此，采取不同化学药剂配合使用，例如多菌灵与福美双混合，对防止草莓灰霉菌抗药性产生有明显作用［9］，同时，研究新型低毒、高效的药剂，配合不同防治措施，综合治理番茄灰霉菌的抗药性产生，提高番茄品质与产量。

表1 6种不同药剂对番茄灰霉病菌的相对抑制率

表2 6种供试药剂对番茄灰霉病菌的毒力回归方程及EC50值

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［3］杨升炯，张晓钢 .番茄灰霉病发生规律及防治技术研究［J］.西北农业学报，1996，5（2）：66～70.

［4］刘 波 .对多菌灵、速克灵具多重抗性的灰葡萄孢菌株性质的研究［J］.南京农业大学学报，1994，16（3）：50～54.

［5］张从宇，黄剑鹏，王荣华 .番茄灰霉病菌对速克灵的抗性检测［J］.安徽农业科学，2004，32（2）：310～311.

［6］刘 波，叶钟音，刘经芬 .速克灵抗灰霉病菌菌株性质的研究［J］.植物保护学报，1992，19（4）：297～301.

［7］农业部农药检定所.NY/T 1156.2-2006.农药室内生物测定试验准则：抑制病原真菌菌丝生长试验——平皿法（农业行业标准）［S］.北京：中国农业出版社，2006.

［8］孙广宇，宗兆锋 .植物病理学实验技术［M］.北京：中国农业出版社，2002：142～143.

［9］杨 谦 .植物病原菌抗药性分子生物学（第二版）［M］.北京：科学出版社，2012.