金一兰
(泉州师范学院化学与生命科学学院 福建 泉州362000)
作为一种特殊真菌的提取物,AMH具有非常强的体外杀灭人类癌细胞、抑制动物移植性肿瘤生长、预防致癌物诱发动物肿瘤以及抗突变等作用。大量的研究表明,在治疗癌症方面真菌提取物AMH的开发应用前景非常好。为此,本文对真菌提取物体内抗小鼠S180作用及与环磷酰胺联合作用进行了分析和研究,希望能够将科学依据提供给AMH的后续研究。
①实验动物:18—23g的昆明种小鼠。
②试剂:二甲基亚砜;环磷酰胺。
③瘤株:本次研究选择小鼠肉瘤S-180细胞株作为瘤株。
④样品:采用硅胶柱层析法、有机溶剂萃取法、乙醇回流提取法等各种分离手段从真菌植物中提取AMH中获得的样品AMH-D[1]。
①AMH-D体内抗癌作用实验:选择移植性肿瘤研究法,在小鼠腹水对S-180肿瘤细胞进行两次传代,将呈米汤样的具有良好生长情况的小鼠腹水在无菌情况下抽取出来,采用灭菌生理盐水对其进行稀释[2]。选择48只昆明种小鼠,采用皮下注射的方式在小鼠左腋下进行注射,每只小鼠注射0.1mL,随后将皮下移植瘤模型制作出来[3]。
随机的将小鼠划分为两组,每组小鼠各有24只,其中各有12只雌鼠,12只雄鼠,分别为AMH-D剂量组和DMSO溶剂对照组。在接种后的第二天对小鼠实施腹腔注射给药。每隔一天进行一次给药,每次每只小鼠具有0.05mL的给药量,对小鼠实施五次给药。在最后给药的第二天将小鼠处死,随后对其进行称重,将其实体瘤完整的剥取出来,并且对其进行称重。在对抑瘤率进行计算的时候按照下面的公式,并且实施统计分析。
②联合CP抗癌作用实验:按照上述的方法对96只小鼠进行S-180肿瘤细胞的接种,将皮下移植肿瘤模型制成。在完成接种之后,对小鼠实施称重,并且随机的将其划分为四个小组,也就是联合用药组、AMH-D剂量组、CP阳性对照组和DMSO溶剂对照组。采用DMSO对其中的阴性对照组进行处理,20mg/kg为环磷酰胺剂量。在接种后的第二天对小鼠实施腹腔注射给药。每隔一天进行一次给药,每次每只小鼠具有0.05mL的给药量,对小鼠实施五次给药。在结束实验的时候将小鼠处死,随后对其进行称重,将其实体瘤完整的剥取出来,并且对其进行称重。在对Q值和抑瘤率进行计算的时候按照下面的公式,以此为根据对两种药物的联合效应进行判断,并且实施统计分析。
在该公式中,两种药物合用的抑制率用E(A+B)来表示,两药单用的抑制率分别用EA和EB来表示,两种药物作用相加用Q为0.85—1.15来表示,两种药物作用协同用Q>1.15 表示,两种药物作用拮抗用Q<0.85表示。
采用SPSS19.0统计软件进行数据处理,计量资料以均数±标准差表示。疗效用X2检验。组内治疗前后比较用配对样本t检验;组间比较用单因素方差分析。以P<0.05为差异有统计学意义。
①AMH-D对S-180具有大于30%的抑瘤率,相对于对照组而言,在平均瘤重方面存在着显著差异(P<0.01)。表明在50—150mg/kg的范围内AMH-D可以对S-180肿瘤的生长起到有效的抑制作用。
②AMH-D与CP合用用药有明显的抑制肉瘤S-180的生长的作用,相对于对照组而言,在平均瘤重方面存在着显著差异(P<0.01)。相对于CP组而言,其存在着显著性差异(P<0.05)。这一结果表明两种药物联合具有协同作用。
在临床上治疗肿瘤的各种化疗药物往往具有较大的毒性,而且很容易使肿瘤产生耐药性,所以现在越来越多的人开始关注寻找天然植物药物。作为一种特殊真菌的提取物,AMH经过很多研究证明其体外肿瘤抑制作用非常突出。现在我国开发抗癌植物药的时候主要是研究一些抑瘤作用显著的的抗癌药物上,而这些药物在抗癌的时候往往也会对机体正常细胞的生长产生影响。
在本次研究中对AMH-D的体内抗肿瘤作用进行了研究,结果显示,AMH-D可以对小鼠S-180的生长起到显著的抑制作用,小鼠体重的增长也受到了AMH-D的影响。环磷酰胺与AMH-D的联合抗癌作用表明两种药物联合使用的抗肿瘤作用具有协同性。这一结果表明,该植物提取物对抗肿瘤药物抗癌作用效果具有促进作用,因此在临床中有可能作为联合抗肿瘤药物。
综上所述,AMH-D的抗肿瘤活性非常显著,其抗肿瘤开发和应用前景比较好。
[1]焦河玲,邓虹珠,王晓娟,等.苦豆子总碱对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用[2].中国实验方剂学杂志,2011,2(17):163-165.
[2]范良华,陈海峰,陈思静.几种天然植物中抗肿瘤药物的研宄进展[J].大众科技,2009(09):142-143.
[3]严淑,刘宝瑞.七种天然生物碱抗肿瘤作用研究进展[J],现代肿瘤医学,2010(06):1227-1230.