P16、ER、CEA在宫颈腺癌和子宫内膜癌鉴别诊断中的临床意义*

杨伟洪 钟守军 段立峰 米贤军

宫颈腺癌（cervical adenocarcinoma）较鳞癌少见，而近年来有研究显示，与宫颈鳞癌相比，宫颈原发腺癌发病率逐渐升高，在西方国家中宫颈腺癌在宫颈癌中占比为25%左右。据文献报道宫颈腺癌可发生于18~84岁妇女，其平均发病年龄与宫颈鳞癌相仿，约49岁左右，多发生于更年期妇女，近年发病有年轻化趋势[1]。子宫内膜腺癌和宫颈原发腺癌生物学行为均可向下扩展与向上延伸，宫颈腺癌多数起源于宫颈管内膜，最常见的为颈管内膜型，它可向子宫内膜方向分化形成子宫内膜样癌和透明细胞癌，亦可向输卵管上皮方向分化形成浆液乳头状腺癌[2-3]。子宫内膜腺癌也可以呈现浆液性改变，两者有时在组织形态上具有相似之处，在活检和诊刮标本中来依靠形态学区分两者比较困难的。两者的治疗及手术方式不同，因此宫颈腺癌和子宫内膜腺癌的鉴别诊断很重要。本研究采用SP免疫组化法检测32例子宫颈腺癌和32例子宫内膜腺癌中P16、ER和CEA蛋白的表达情况并进行回顾性分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2003年1月-2014年1月确诊原发性宫颈腺癌标本32例及子宫内膜腺癌32例石蜡包埋标本，

其中宫颈腺癌组患者年龄30~72岁，中位年龄45.2岁；子宫内膜腺癌组年龄28~68岁，中位年龄43.8岁。

1.2 试剂与方法 ER鼠抗人单克隆抗体、CEA单克隆抗体购自上海长嘉生物技术有限公司，P16单克隆抗体购自美国罗氏生物技术有限公司，为即用型抗体，免疫组化试剂盒以及DAB显色剂均购自美国罗氏公司。石蜡切片常规脱蜡后应用全自动免疫组化染色仪（美国罗氏公司）进行免疫组化染色，每批染色设置均设已知阳性及阴性对照。

1.3 结果判断 P16蛋白阳性定位于胞核和/或胞质，ER蛋白阳性定位于细胞核，CEA蛋白阳性定位于胞质和/或胞膜。根据阳性细胞在组织中所占面积分为4个等级：<5%为（-）、5~10%为弱（+）或可疑（+）、10%~30%为阳性，≥30%为强阳性。阴性、弱阳性及可疑阳性组合并为阴性病例组，阳性及强阳性合并为阳性病例组。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对收集的数据进行整理与统计分析，计数资料采用 字2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

P16、ER和CEA阳性表达率在子宫颈腺癌中分别为65.63%（21/32）、28.13%（9/32）、81.25%（26/32）， 而 在子宫内膜腺癌中分别为9.36%（3/32）、75.00%（24/32）、43.75%（14/32）。子宫颈腺癌中P16、CEA阳性表达率高于子宫内膜腺癌中（P<0.05），子宫内膜腺癌中ER的阳性表达率明显高于子宫颈腺癌（P<0.05），见表1。

表1 P16、ER和CEA在宫颈腺癌及子宫内膜腺癌组织中的表达 例（%）

3 讨论

子宫内膜腺癌属于妇科常见恶性肿瘤，其发病率居高不下。近年来，宫颈腺癌发病率也逐渐提高。宫颈原发腺癌和子宫内膜癌的来源通常难以判定，临床诊断中通常难以对子宫颈原发腺癌、宫体下段子宫内膜腺癌予以诊断，特别是采用诊刮方法诊断时，更难以得到准确的诊断结果。即使在患者手术后对患者子宫全切标本展开分析，对两者展开组织学定位也存在一定难度。然而，在临床治疗中，对子宫内膜腺癌、宫颈原发腺癌予以准确诊断，是确定有效治疗措施、选定合理手术方案、对预后进行转归评价的必要条件，子宫颈腺癌与子宫内膜样腺癌具有不同的手术方式和治疗方案，患者的预后也不同，如子宫内膜腺癌对激素治疗敏感性好，患者预后较好，然而宫颈腺癌对激素治疗并不敏感，如将宫颈腺癌误诊为子宫内膜腺癌则会影响患者治疗效果，导致治疗最佳时机延误，故而探讨两者有效的诊断方法具有重要意义。

原发性宫颈腺癌近年在普通人群中的发病率有逐渐上升的趋势。肿瘤大体上无特征性改变。组织学可分为以下几种类型：黏液性腺癌、子宫内膜样腺癌、透明细胞腺癌、浆液性腺癌、中肾腺癌等[4]。其中宫颈管亚型是最常见的类型，约占宫颈腺癌的70%，镜下表现类似颈管上皮细胞，并有黏液分泌，黏液不显著时不易与侵犯宫颈的子宫内膜腺癌区分。子宫内膜样腺癌亚型仅在高分化时才有可能从形态上与子宫内膜腺癌鉴别。本次研究通过免疫组化方法对子宫内膜腺癌、宫颈原发腺癌组织中的P16、ER、CEA等表达情况进行检查，探讨P16、ER、CEA检查在两者鉴别诊断中的应用价值，以期为临床提供有力依据。

基因P16是一种定位于人类染色体9p21的肿瘤抑制基因，该区域容易出现染色体杂合、倒置及易位等现象，是细胞周期调节蛋白之一，它可竞争抑制细胞素DI与CDK4结合，并特异性地抑制CDK4的活性，使抑癌基因Rb的蛋白处于非磷酸化的活性状态，从而阻止细胞由Gl期进入S期，抑制细胞繁殖。若P16ink4A基因出现突变，可导致细胞异常增生。Negri等[5]通过免疫组化检测28例宫颈原位腺癌与浸润性宫颈腺癌时，发现P16阳性表达率100%，而高危HPV感染率100%，由此可知P16属于宫颈腺癌标志物。生物学研究表明，宫颈原发腺癌与高危型HPV关系密切[6]，高危型HPV E7病毒蛋白可与Rb结合并使其失活.导致P16蛋白的过度表达[7-8]。P16在宫颈原发腺癌中弥漫阳性或强阳性表达，在子宫内膜癌中阴性或弱阳性表达[9-11]。从这一结论可知，在子宫内膜腺癌、宫颈原发腺癌鉴别诊断中P16可发挥重要的应用价值。有研究显示，ER在在宫颈内膜腺癌中并无表达，而在子宫内膜腺癌中有所表达。Alkushi等[12]报道ER在子宫内膜腺癌中有较强表达，阳性率在70%~90%之间，在宫颈原发腺癌中通常为弱表达，阳性率在10%~40%之间；CEA是提取自胎儿肠、结肠腺癌的肿瘤相关抗原，是内胚层分化缩短，其在肿瘤组织内阳性表达率较高。正常组织中胆囊上皮细胞、胃肠中均有CEA的表达，而宫颈腺癌、宫颈鳞癌中均有表达，故而CEA并无明显特异性。相关研究显示，在宫颈原发腺癌中大多呈广泛阳性或强阳性表达，阳性率为50%~100%，子宫内膜腺癌中常呈灶性表达，阳性率为0~50%。

在本研究中，P16、ER、CEA在宫颈原发腺癌中的阳性表达率分别为65.63%、28.13%、81.25%，在子宫内膜腺癌中则分别为9.36%、75.00%、43.75%，P16、CEA在子宫颈腺癌多数病例中广泛阳性或强阳性表达而在子宫内膜腺癌中灶性弱阳性或阴性表达，ER在子宫内膜腺癌中高表达而在宫颈腺癌中低表达，差异有统计学意义，与之前的报道基本一致[13-15]，提示P16、ER、CEA蛋白联合检测表达作为辅助性的免疫组织化学标记来鉴别子宫颈腺癌和子宫内膜腺癌具有较好的临床应用价值。

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