ODC和CD105在良性、癌前和恶性外阴肿瘤中的表达及意义

东 敏，刘建华，阮正一

(上海交通大学附属第九人民医院妇科，上海 200010)

ODC和CD105在良性、癌前和恶性外阴肿瘤中的表达及意义

东 敏，刘建华，阮正一

(上海交通大学附属第九人民医院妇科，上海 200010)

目的探讨鸟氨酸脱梭酶(Ornithine decarboxylase，ODC)和CD105蛋白(Cluster of differentiation 105，CD105)在外阴癌变中的作用。方法选取30例外阴鳞癌、30例外阴上皮内瘤变和30例外阴正常表皮，采用免疫组化的方法进行研究。分析ODC和CD105表达与外阴鳞癌的临床病理特征。结果ODC和CD105在正常外阴组织中的阳性率明显低于外阴上皮内瘤变组织和外阴鳞癌组织，而于外阴上皮内瘤变组织中的阳性率明显低于外阴鳞癌组织，差异均有显著统计学意义(P＜0.01)，ODC与细胞分化程度密切相关(P＜0.05)，CD105与临床分期和淋巴转移密切相关(P＜0.05)。结论ODC和CD105在外阴鳞癌发生和发展中具有重要的意义。

鸟氨酸脱羧酶；CD105蛋白；外阴鳞癌；外阴上皮内瘤变

外阴癌(Vulvar carcinoma)占女性生殖系统恶性肿瘤的3%～5%，其中外阴鳞癌最为常见，占外阴癌的80%～90%[1]。外阴癌的患病率仅次于宫颈癌、卵巢癌和宫体癌，是女性恶性肿瘤发生的第4位的恶性肿瘤。近年来，随着性传播疾病的发病率的增高，外阴癌的发病率呈现逐年增加的趋势，严重危害妇女的身心健康。外阴癌的发生是一个逐年的过程，但是良性癌前如何发展为外阴癌的机制还不是很清楚[2]。本研究通过免疫组化的方法，检测鸟氨酸脱梭酶(ODC)和CD105蛋白(CD105)在外阴正常组织、外阴上皮内非瘤样病变、外阴上皮内瘤样病变及外阴鳞状细胞癌中的表达，旨在探讨ODC和CD105在外阴癌形成中的机制，为临床预防外阴癌的发生提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年1月至2014年6月间我院病理科存档的外阴鳞癌组织30例，外阴上皮内瘤变组织30例和正常外阴组织30例进行研究。外阴鳞癌按组织分化程度分为：高分化22例，中分化20例，低分化18例；按有无淋巴结转移分为有淋巴结转移24例，无淋巴结转移36例。

1.2 方法 所有石蜡切片脱蜡至水后，在3% H2O2去离子水30ml中孵育10min；在修复后分别滴加一抗，在4℃的温度下过夜，第二天磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3次；滴加生物素标记的二抗工作液，37℃孵育30min，PBS冲洗3次；滴加辣根酶标记链霉卵白素，37℃孵育30min，PBS再次冲洗3次；二氨基联苯胺(DAB)显色；自来水充分冲洗、苏木复染、脱水透明、常规封片。用PBS代替一抗做阴性对照。

1.3 结果判定 ODC阳性反应定位于细胞质和细胞膜上，无阳性细胞为0分，＜10%为1分，10%～50%为2分，≥50%为3分，无着色为0分，轻度着色为1分，中度着色为2分，重度着色为3分，＜3分为阴性(-)，≥3分为阳性(+)。而CD105表达于血管内皮细胞质,判断标准参照Weidener的方法进行[3]进行。凡单个内皮细胞或内皮细胞群呈现棕色或者黄色染色，认为是一个可计数的微血管，在微血管最多的区域，数3个不同高倍视野下微血管数，如果微血管数平均值≥3个，则为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件包进行数据分析，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 ODC和CD105在良性、癌前和恶性外阴肿瘤中的表达 ODC和CD105在正常外阴组织中的阳性率明显低于外阴上皮内瘤变组织和外阴鳞癌组织，于外阴上皮内瘤变组织中的阳性率明显低于外阴鳞癌组织，而明显高于正常外阴组织，差异均有显著统计学意义(P＜0.01)，见表1。

表1 ODC和CD105在良性、癌前和恶性外阴肿瘤中的表达(例)

表2 ODC在外阴鳞癌患者不同临床病理特征中表达的比较(例)

2.3 CD105在外阴鳞癌患者不同临床病理特征中表达的比较 经过观察，CD105与临床分期和淋巴转移密切相关(P＜0.05)，而与患者的年龄和细胞分化程度无关(P＞0.05)，见表3。

2.2 ODC在外阴鳞癌患者不同临床病理特征中表达的比较 经过观察，ODC与细胞分化程度密切相关(P＜0.05)，而与患者的年龄、临床分期、淋巴转移无关(P＞0.05)，见表2。

表3 CD105在外阴鳞癌患者不同临床病理特征中表达的比较(例)

3 讨 论

ODC是多胺生物合成的第一个关键酶，其人体内表达受严格的控制，在正常组织中表达水平较低，但在恶性肿瘤等快速增长的组织中ODC的水平明显增加，ODC是细胞生长、分化的调控所必须的酶[4-5]。目前的研究显示ODC在多种恶性肿瘤中均发挥调控作用，与肿瘤的浸润、转移和及血管生成均密切相关。国外的一项研究对47例大肠癌、5例腺瘤和4例正常大肠黏膜中ODC的水平进行研究分析，结果发现大肠癌和腺癌的活性显著高于正常黏膜组织，并发现具有高ODC水平高的患者长期生存率较低[6]。Zell等[7]研究了大肠癌患者生存率与ODC多态性的相关性，结果发现ODC基因rs2302615与大肠癌患者生存率呈现明显的相关性。Xu等[8]研究显示胃癌组织中ODC水平明显升高，并且ODC水平与肿瘤恶性程度呈现明显的正相关性。以往的研究结果显示ODC的调节通路中多种致癌因素可引起ODC的调节异常，从而导致细胞癌变，本研究结果显示ODC在正常外阴组织中的阳性率明显低于外阴上皮内瘤变组织和外阴鳞癌组织，并且ODC与外阴鳞癌组织细胞分化程度密切相关。这一结果说明ODC在外阴鳞癌发病过程中同样发挥重要作用。

近年来，血管生成相关因素已经成为肿瘤研究的热点内容。CD105作为一种新近发现的血管内皮标记的新成员，目前已经成为临床研究的热点。CD105是一种调节转化生长因子受体复合物。在机体患有非肿瘤病变中，例如慢性疼痛、心肌损伤和风湿性关节炎组织中，CD105可以发挥修复病变组织的功能[9-11]。而在恶性病变中，CD105与肿瘤增生和肿瘤转移均密切相关，在肿瘤增殖和转移过程中与其血管生成密切相关[12]。Schmming等[13]研究显示CD105在口腔鳞状细胞癌中的表达明显高于邻近的正常黏膜，并与鳞状细胞癌的分期和转移密切相关。Pang等[14]研究显示乳腺癌组织中CD105的mRNA含量要明显高于乳腺癌周组织的含量。本研究结果显示CD105在正常外阴组织中的阳性率明显低于外阴上皮内瘤变组织和外阴鳞癌组织，并且CD105与外阴鳞癌组织的临床分期和淋巴转移密切相关，这说明CD105不但与外阴鳞癌组织发生密切相关，而且与外阴鳞癌组织浸润和淋巴转移密切相关，可能是在外阴鳞癌癌细胞浸润和转移过程中产生新生血管有关。

综上所述，ODC和CD105表达与外阴鳞癌发病密切相关，并且CD105在外阴鳞癌浸润和淋巴转移中发挥重要作用。因此，笔者认为ODC和CD105可能成为外阴鳞癌治疗的靶器官，但是本研究存在样本含量较小、未对患者进行长期随访的局限性，今后将进一步扩大样本含量并对患者进行长期随访，以研究ODC和CD105与外阴鳞癌预后的相关性。

[1]Roux-Dessarps LA,Ribeiro L,May P,et al.How I do…an abdominoperineal resection with a Taylor flap reconstruction for vulvar carcinoma[J].Gynecol Obstet Fertil,2014,42(2):132-135.

[2]Hantschmann P,Sterzer S,Jeschke U,et al.P53 expression in vulvar carcinoma,vulvar intraepithelial neoplasia,squamous cellhyperplasia and lichen sclerosus[J].Anticancer Res,2005,25(3A): 1739-1745.

[3]Kim CF,Jackson EI,Woolfendena E,et al.Identification of bronchioalveolar stem cells in normal lung and lung cancer[J].Cell, 2005,121(6):823-835.

[4]Casero RA,Marton LJ.Targeting polyamine metabolism and function in cancer and other hyperproliferativediseases[J].Nat Rev Drug Discov,2007,6(5):373-390.

[5]Casero RA,Woster PM.Recent advances in the development of polyamine analogues as antitumor agents[J].J Med Chem,2009,52(2): 4551-4573.

[6]Hoshino Y,Terashima S,Teranishi Y,et al.Ornithine decarboxylase activity as a prognostic marker for colorectal cancer[J].Fukushima J Med Sci,2007,53(1):1-9.

[7]Zell JA,Ziogas A,Ignatenko N,et al.Associations of apolymorphism in the ornithine decarboxylase gene withcolorectal cancer survival[J].Clin Cancer Res,2009,15(19):6208-6216.

[8]Xu CX,Yan YF,Yang YP,et al.Downregulation of ornithine decarboxylase by pcDNA-ODCr inhibits gastric cancer cell growthin vitro[J].Mol Biol Rep,2011,38(2):949-955.

[9]Freemont AJ,Jeziorska M,Hoyland JA,et al.Mast cells in the pathogenesis of chronic back pain:a hypothesis[J].J Pathol,2002,197 (3):281-285.

[10]Shyu KG,Wang MT,Wang BW,et al.Intramyocardial injection of naked DNA encoding HIF-1alpha/VP16 hybrid to enhance angiogenesis in an acute myocardial infarction model in therat[J].Cardiovasc Res,2002,54(3):576-583.

[11]Matsuno H,Yudoh K,Uzuki M,et al.Treatment with the angiogenesis inhibitor endostatin:a novel therapy in rheumatoid arthritis[J].J Rheumatol,2002,29(5):890-889.

[12]Duff SE,Li C,Garland JM,et al.CD105is important for angiogenesis:evidence and potential applications[J].FASEB J,2003,17(9): 984-992.

[13]Schmming R,Marme D.Endoglin(CD105)in squamous cell carcinoma of the oral cavity[J].Head Neck,2002,24(2):151-156.

[14]Pang D,Liu F,Xue YW,et al.Clinicopathologic significance of CD105mRNA expression in human breast carcinoma[J].Zhonghua Zhong Liu Za Zhi,2005,27(1):38-40.

Expression and significance of ODC and CD105in benign,precancerous and malignant vulvar tumors.

DONG Min,LIU Jian-hua,RUAN Zheng-yi.Department of Gynaecology,the Ninth People's Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200010,CHINA

ObjectiveTo discuss the role of ornithine decarboxylase(ODC)and cluster of differentiation 105(CD105)in vulvar tumor.MethodsThirty cases of malignant vulvar tumors,30 cases of vulvar intraepithelial neoplasia,and 30 cases of normal vulvar tissue were studied by immunohistochemistry.ODC and CD105expression and clinical pathological features of vulvar squamous carcinoma were further analyzed.ResultsThe positive expression rate of ODC and CD105in normal vulvar tissues was significantly lower than that in the genital intraepithelial neoplasia and squamous cell carcinoma of the vulva,and the positive rate in vulvar intraepithelial neoplasia was significantly lower than that in vulvar squamous cell carcinoma tissue,with statistically significant difference(P＜0.01).ODC was closely related to the degree of cell differentiation(P＜0.05),and CD105was closely related to clinical stage and lymph node metastasis(P＜0.05).ConclusionODC and CD105had vital significance in the development of vulvar squamous carcinoma(HCC).

Ornithine decarboxylase(ODC);Cluster of differentiation 105(CD105);Vulvar squamous carcinoma;Vulvar intraepithelial neoplasia

R737.35

A

1003—6350（2015）04—0481—03

2014-09-09)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.04.0176

上海高校青年教师培养资助计划[编号：沪教委人(2011)87号文公布]

刘建华。E-mail：fl81955664715@163.com