液基薄层细胞学检测在宫颈病变临床筛查中的应用

粟燕，何春

(广西壮族自治区妇幼保健院儿科1、妇产科2，广西南宁530000；

液基薄层细胞学检测在宫颈病变临床筛查中的应用

粟燕1，何春2

(广西壮族自治区妇幼保健院儿科1、妇产科2，广西南宁530000；

目的评估液基薄层细胞学(TCT)检测在宫颈病变临床筛查中的价值。方法选择2011年8月至2014年8月在我院就诊经TCT检测异常的宫颈病变患者700例，根据TCT检测结果分为不典型鳞状细胞和腺细胞(ASCUS)、低度及高度鳞状上皮内病变(LSIL/HSIL)、鳞癌或腺癌(SCC/AC)，并随后进行了高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测和经宫颈活检。将三种方法的检测结果进行对比。结果700例患者的TCT检测结果为ASCUS 364例(52.0%)，LSIL 256例(36.6%)，HSIL 72例(10.3%)，SCC例8例(1.1%)；宫颈活检结果为正常或炎症332例(47.4%)，宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CIN I)216例(30.9%)，宫颈上皮内瘤变Ⅱ级(CINⅡ)72例(10.3%)，宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ)72例(10.3%)，宫颈癌(CC)8例(1.1%)；HR-HPV阳性496例(70.9%)，阴性204例(29.1%)；HR-HPV阳性率随着TCT检查分级ASCUS、LSIL、HISL的增高而增高（P＜0.05）。结论TCT与人乳头瘤病毒检测、宫颈活检符合率均较高，为宫颈病变重要的临床筛查和诊断方法，能及时发现大量的宫颈病变。

液基薄层细胞学；宫颈活检；宫颈病变；假阴性

宫颈病变为当今女性常见疾病，而宫颈癌(CC)是其中最差结局之一。CC为女性生殖道系统中最常见的恶性肿瘤，其发病率逐年提高并且开始趋于年轻化[1-2]。研究发现，90%以上的高级别宫颈上皮内瘤变(CIN)患者伴随高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染，持续的HR-HPV感染是CIN和CC发生的必要条件[1]，大量研究表明，CC是唯一对医学干预相对较敏感的恶性肿瘤，其癌前病变阶段长，且CIN I是可以逆转的病变，因此对于CIN的及早诊断是阻断CC前病变进展的有效策略[2-3]。近年来，液基薄层细胞学(TCT)已取代传统的巴氏涂片，其配合HPV检测以及镜下活检，可对患者进行早期诊断，进而有望早期治疗[3]。笔者对我院700例TCT检测异常的宫颈病变患者进一步采取HR-HPV及宫颈活检进行检测，并对TCT在宫颈病变筛查中的有效性进行评价，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2011年8月至2014年8月在我院就诊经TCT检测异常的宫颈病变患者700例。患者年龄21～75岁，平均(43.5±12.1)岁，孕次1～2次，平均(1.3±0.7)次，均有性生活史，且取材前3 d内无阴道用药及冲洗，排除孕期、合并自身免疫性疾病、肝肾疾病以及其他慢性疾病患者，排除在我院或外院已经做过阴道镜活检确诊为CIN者以及已经治疗过的病例。本次研究工作已经获得医院伦理委员会的批准，所有研究均在患者知情并同意的情况下展开。

1.2 方法

1.2.1 TCT检测和宫颈活检方法检查过程严格按照说明书的要求进行，确保每个涂片中含5 000～8 000个鳞状细胞，且均清晰可见。宫颈病变分级标准：不典型鳞状细胞和腺细胞(ASCUS)、低度及高度鳞状上皮内病变(LSIL/HSIL)、鳞癌或腺癌(SCC/ AC)。根据阴道镜下的特征及醋酸试实验、碘染色实验的信息进行宫颈活检的综合判断，确定宫颈活检部位，在CC好发部位宫颈鳞柱交界处进行准确取材，获取组织后送检。宫颈活检分级为：①正常宫颈上皮或炎症；②CIN分为CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ级和原位癌；③早期浸润癌和浸润癌。其中病理学分级的正常或炎症、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及CC分别对应宫颈细胞学分级的正常或良性、LSIL、HSIL、HSIL和SCC。

1.2.2 HR-HPV检查采用凯普HR-HPV分型一次检测6、11、42、43、44、16、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304等21个基因型。患者的宫颈细胞标本采用凯普宫颈细胞收集方法在非月经期收集并保存于4℃恒温冰箱中，检测应用导流杂交基因芯片技术(Hy-briMax美国专利号5741674和6020187)进行，结果判断：对病毒DNA型别利用基因芯片特异的分型探针进行检测，阳性结果为有感染高危型别[4]。

1.3 统计学方法应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计数资料以百分比表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TCT检查结果700例患者的TCT检测结果为ASCUS 364例(52.0%)，LSIL 256例(36.6%)，HSIL 72例(10.3%)，SCC例8例(1.1%)。TCT诊断ASCUS 364例中，284例经宫颈活检确认，其余80例诊断为CINⅠ，为TCT诊断过低，无诊断过度出现；LSIL 256例，宫颈活检130例CINⅠ，符合率为50.8%，TCT诊断过低80例(CINⅡ64例，CINⅢ14例)；72例HSIL中，66例与宫颈活检结果一致，其符合率为91.7%；TCT检查SCC 8例，宫颈活检CC8例，符合率为100%，见表1。

表1700 例患者TCT检查与宫颈活检结果比较[例（%）]

2.2700 例患者TCT检查与HR-HPV检查结果比较HR-HPV阳性496例(70.9%)，阴性204例(29.1%)，且HR-HPV阳性率随着TCT检查分级ASCUS、LSIL、HISL的增高而增高(P＜0.05)，在HISL与SCC分级比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

表2700 例患者TCT检查与HR-HPV检查结果比较[例（%）]

3 讨论

宫颈上皮内瘤变(CIN)作为一系列宫颈浸润癌癌前病变的统称，它与浸润癌的发展有紧密联系[5-6]，多发于25～35岁女性。CIN的发展存在两种截然不同的现象，一是在发展过程中自然消退，另一种是在发展过程中显示出癌变潜能[7]。研究发现，有90%以上高级别CIN患者存在着高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的感染，持续的HR-HPV感染是CIN和CC发生的必要条件。大量研究表明，CC患者癌前病变的发展时间长，大部分CINⅠ级患者是可以逆转为正常的。研究显示CC患者若能在早期检出，其治愈率高达95%以上[8-9]。因此对于CIN的及早诊断是阻断CC前病变进展的有效策略。

尽管目前CC筛查方式和手段较多，但仅采用单一的手段仍存在许多问题和缺陷，寻找经济的且特异度和灵敏度均能满足需求的联合筛查方法成为了当前研究的热点。TCT已取代传统的巴氏涂片，联合HPV检测和镜下活检，可使患者在早期获得明确诊断。其对异常细胞的诊断率与传统的巴氏涂片相比较可提高13%，而低度以上病变检出率可提高65%。除此之外，该法获取的保存液还可以用于其他指标的检测，可以显著提高宫颈病变的检出率。TCT检查对检测的宫颈细胞行TBS细胞学分类诊断，加强了病理学和临床的沟通，使标本的可信度得到增加。TCT检测使传统涂片的缺陷和不足得到纠正，可深入至颈管内取材以获得脱落细胞，取材后可将其即刻浸入细胞保存液，从而使取材器上的全部标本得以保存，并且在薄片中结构完整、清晰度高、异常细胞更易分辨，从而能够降低假阴性率[10]。本研究发现，TCT细胞学检查与宫颈活检对于HSIL和SCC的符合率分别为91.7%和100%，且病变程度越高，组织病理学检查与细胞学结果更加一致。HR-HPV感染是CC及癌前病变发病的重要指标[11-12]，通过HR-HPV DNA的检测可将已患CC和存在癌前病变的妇女筛选出来，同时，HR-HPV检测可使单纯依据TCT造成的漏诊率大大减少[13]，使CIN及以上病变的检出率大为提高。越来越多的研究发现，HR-HPV亚型检查比宫颈细胞学检查的灵敏度更高[14-15]。本次研究发现，HR-HPV检测与TCT检查在LSIL和HISL的符合率分别为84.4%和100%，且HR-HPV阳性率随着TCT检查分级ASCUS、LSIL、HISL的增高而增高。但在HISL与SCC分级比较差异无统计学意义。

综上所述，TCT与HPV检测、宫颈活检符合率均较高，为宫颈病变重要的临床筛查和诊断方法，能及时发现大量的宫颈病变。三者联合检测可更早的发现宫颈癌及其癌前病变，为宫颈癌的筛查与防治提供了有效的手段。

[1]Wu YM,Wang T,He Y,et al.Clinical management of cervical intraepithelial neoplasia in pregnant and postpartum women[J].Archives of Gynecology and Obstetrics,2014,289(5)∶1071-1077.

[2]张燕,杨红梅,董丽萍,等.宫颈脱落细胞学病理组织学检查和人乳头瘤样病毒检测在诊断宫颈病变中的临床意义[J].河北医学,2014,35(9)∶1509-1511.

[3]He Y,Wu YM,Zhao Q,et al.High-risk human papilloma virus management in pregnancy with cervical intraepithelial neoplasia during pregnancy and postpartum in China[J].Journal of Obstetrics and Gynaecology Research,2014,40(2)∶538-544.

[4]侯安丽,张玉娟,李秀芬,等.液基薄层细胞学联合DNA定量方法对宫颈病变诊断试验的评价[J].中国实验诊断学,2012,16(4)∶653-655.

[5]牛秋娥,郭喜开,孙晓玲,等.宫颈液基细胞学结合阴道镜筛查宫颈病变临床分析[J].中国药物与临床,2014,38(7)∶947-948.

[6]Pastuszak-Lewandoska D,Bartosińska-Dyc A,Migdalska-Sęk M, et al.HPV16 E6*II gene expression in intraepithelial cervical lesions as an indicator of neoplastic grade∶a pilot study[J].Medical Oncology,2014,31(3)∶1-7.

[7]荆翠红,于龙广.TCT联合HPV-DNA检测在宫颈早期病变筛查中的应用[J].山东医药,2013,53(36)∶108-109,封3.

[8]徐曦,袁远霞,颜浩,等.液基细胞学联合阴道镜在早期宫颈病变筛查中的应用分析[J].海南医学院学报,2011,17(1)∶106-108.

[9]Munkhdelger J,Kim G,Wang H,et al.Performance of HPV E6/E7 mRNA RT-qPCR for screening and diagnosis of cervical cancer with ThinPrep®Pap test samples[J].Experimental and Molecular Pathology,2014,97(2)∶279-284.

[10]贾伟,黄礼年.液基薄层细胞学在肺癌诊断中的进展[J].中华全科医学,2012,10(7)∶1133-1134.

[11]Jing L,Zhong X,Huang W,et al.HPV genotypes and associated cervical cytological abnormalities in women from the Pearl River Delta region of Guangdong province,China∶a cross-sectional study[J]. BMC Infectious Diseases,2014,14(1)∶388.

[12]甘密密,张锡流.DNA定量分析及TCT技术诊断宫颈病变的临床研究[J].实用妇产科杂志,2014,30(9)∶674-677.

[13]Mc Menamin M,Mc Kenna M.Stability of human papillomavirus (HPV)in cervical ThinPrep specimens previously lysed with glacial acetic acid∶Effect on cobas 4800 HPV test performance[J].Cancer Cytopathology,2014,122(4)∶250-256.

[14]关嵩青,叶菲.高危型HPV联合TCT检测在宫颈病变Leep术后的应用价值[J].中国实验诊断学,2013,17(2)∶353-357.

[15]Papillo JL,Zarka MA,St John TL.Evaluation of the ThinPrep Pap test in clinical practice[J].Acta Cytologica,2011,42(1)∶203-208.

Application of thinprep cytologic test in the screening of cervical lesions

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SU Yan1,HE Chun2.Department of Paediatrics1,Department of Gynaecology and Obstetrics2,Maternal and Child Health Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region,Nanning 530000,Guangxi,CHINA

ObjectiveTo evaluate the value of thinprep cytologic test(TCT)in the screening of cervical lesions.MethodsSeven hundred patients with cervical lesions showing abnormalities in TCT in our hospital from October 2009 to September 2012 were selected.The patients were divided into three classifications according to TCT results∶undetermined significance atypical squamous cells and glandular cells(ASCUS),low-grade squamous intraepithelial lesions(LSIL)or high-grade squamous intraepithelial lesions(HSIL),squamous cell carcinoma(SCC)or adenocarcinoma(AC).The three groups of patients then underwent high-risk human papillomavirus(HR-HPV)testing and transvaginal cervical biopsy.The test results of the three methods were compared.ResultsTCT results showed 364 cases(52.0%)of ASCUS,256 cases(36.6%)of LSIL,72 cases(10.3%)of HSIL,and 8 cases(1.1%)of SCC cases.Cervical biopsy results showed 332 cases(47.4%)of normal or inflammation,216 cases(30.9%)of cervical intraepithelial neoplasia(CIN)Ⅰ,72 cases(10.3%)of CINⅡ,72 cases(10.3%)of CINⅢ,and 8 cases(1.1%)of cervical cancer.According to HR-HPV testing,496 cases(70.9%)were diagnosed as HR-HPV-positive,and 204 cases (29.1%)were diagnosed as negative.The higher the classification of TCT(ASCUS,LSIL and HISL)was,the higher the HR-HPV positive rate was(P＜0.05).ConclusionTCT is of a high consistent rate with human papillomavirus testing and cervical biopsy,which could serve as an important clinical diagnostic method for cervical lesions.

Thinprep cytologic test(TCT);Cervical biopsy;Cervical lesions;False-negative

R711.74

A

1003—6350（2015）12—1839—03

2015-01-06)

粟燕。E-mail：suyan576@163.com

doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2015.12.0659