肾移植患者FK506血药浓度与肝功能检测指标的相关性分析

李美珠，刘朝律，林裕玲，覃燕梅，何振辉

（1.佛山市第一人民医院检验科，广东 佛山 528000；2.佛山科学技术学院医学院医学检验系，广东 佛山 528000；3.广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东 湛江 524023）

肾移植患者FK506血药浓度与肝功能检测指标的相关性分析

李美珠1，刘朝律2，林裕玲2，覃燕梅3，何振辉2

（1.佛山市第一人民医院检验科，广东 佛山 528000；2.佛山科学技术学院医学院医学检验系，广东 佛山 528000；3.广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东 湛江 524023）

目的 探讨肾移植患者血他克莫司(FK506)治疗窗浓度与肝功能检测指标的相关性。方法采用酶放大免疫测定法对85例肾移植患者进行FK506血药浓度监测，根据肾移植术后FK506血药浓度分为高浓度组(10～20 ng/ml)40例和低浓度组(5～10 ng/ml)45例。同时检测两组患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和谷氨酰转肽酶(GGT)水平。结果肝功能异常率按TBIL、AST、ALT、GGT顺序分别为FK506高浓度组(5.0 ng/ml、2.5 ng/ml、15.0 ng/ml、25.0 ng/ml)、低浓度组(6.7 ng/ml、11.1 ng/ml、22.2 ng/ml、24.4 ng/ml），两组比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；两组患者的FK506血药浓度与AST、ALT、GGT、TBIL水平无相关性(rs＜0.3，P＞0.05)。结论肾移植术后患者肝功能检测指标与FK506血药浓度无相关。

肾移植；FK506；血药浓度；肝功能

FK506通用名为他克莫司(Tacrolimus)，属于钙调神经磷酸酶抑制剂，临床上主要用于肝、肾等器官移植术后的免疫抑制治疗，药效是环孢素A(CsA)的10～100倍。但FK506治疗范围狭窄，治疗剂量和中毒剂量非常接近，而且其药物代谢的个体差异很大[1-2]。因此，需要对FK506的血药浓度进行监测，以确保用药的安全和有效。FK506治疗主要的不良反应是引起肾损伤，也有文献报道FK506可致肝脏损害、糖尿病、肺部感染等[3-4]。但FK506治疗引起肝功能损伤的研究较少，FK506对肝功能的影响尚未有明确的结论。本文通过对85例肾移植患者定期进行FK506血药浓度及肝功能检测，分析在不同FK506血药浓度水平时肝功能的变化，以探讨FK506治疗浓度与肝功能指标的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2012年7月至2014年4月在我院监测FK506血药浓度的85例肾移植患者为研究对象，其中男性59例，女性26例；年龄19～70岁，平均(44.3±12.0)岁，男女比例约2.3:1。根据肾移植术后FK506血药浓度水平将患者分为高浓度组(10～20 ng/ml)40例和低浓度组(5～10 ng/ml)45例，标本均来自本院肾内科患者。

1.2 免疫抑制剂治疗方案 肾移植患者术后采用FK506+MMF(霉芬酸酯)+强的松三联免疫抑制方案，每一位患者所用强的松和霉酚酸酯的剂量基本相同。患者移植术后第3天开始服用FK506，起始剂量为0.1～0.15 mg/(kg·d)，早晚间隔12 h分两次服用，以后根据FK506血药浓度及患者临床情况及时调整用药剂量。血药浓度监测和肝功能，如丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和谷氨酰转肽酶(GGT)数据均来自移植术后一个月内。

1.3 采集样本 患者用药后12 h(次日清晨给药前)，使用含有EDTA抗凝剂的一次性真空采血管采静脉血2 ml，混匀后用于FK506血药浓度检测，所需的样本为全血200 μl；同时用干燥管抽血3 ml，分离血清备用。

1.4 检测方法 FK506浓度采用 DADE Vival-E药物浓度分析仪测定，操作步骤严格按照FK506检测试剂说明书进行；ALT、AST、TBIL、GGT各浓度采用西门子ADVIA2400全自动分析仪测定。我院成人正常参考范围分别为血GGT 10～60 U/L，TBIL 5.1～21 μmol/L，ALT 9～50 U/L，AST 15～40 U/L，超出范围上限视为异常，四项检测指标，在标本送检后1 h内出结果。

1.5 统计学方法 应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组之间均值比较采用独立样本t检验，率的比较采用χ2检验，采用Spearman等级相关分析，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同FK506血药浓度患者的肝功能异常比较 FK506不同血药浓度患者的肝功能异常发生率比较差别均无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

表1 不同FK506血药浓度患者的肝功能异常比较[例（%）]

2.2 不同FK506血药浓度患者的肝功能指标比较 两组患者的肝功能检测指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

表2 不同FK506血药浓度患者的肝功能检测指标比较(±s)

表2 不同FK506血药浓度患者的肝功能检测指标比较(±s)

组别ALT(U/L)AST(U/L)GGT(U/L)TBIL(μmol/L)低浓度组(n=45)高浓度组(n=40)t检验P值39.34±22.57 30.77±22.48 1.75＞0.05 20.04±19.45 21.00±20.31 0.22＞0.05 49.27±46.53 54.58±32.00 0.61＞0.05 10.44±5.30 10.75±4.76 0.28＞0.05

2.3 FK506血药浓度与肝功能指标的相关性 在FK506低浓度组中，FK506血药浓度与ALT、AST、GGT、TBIL浓度的相关系数rs分别为-0.175 3、-0.040 2、-0.184 1、0.090 6，P值分别为 0.129 8、0.723 4、0.102 1、0.439 7；在FK506高浓度组中，FK506血药浓度与ALT、AST、GGT、TBIL浓度的相关系数rs分别为-0.233 3、-0.186 0、-0.181 9、-0.215 8，P值分别为0.336 4、0.445 8、0.456 2、0.374 9。按α=0.05检验水准，可以认为两组病例中FK506血药浓度与ALT、AST、GGT、TBIL水平无相关性。

3 讨论

本研究采用均相酶免疫法测定全血中FK506血药浓度。样本中FK506与试剂中标记有重组葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(rG6PDH)的FK506竞争性地与FK506的单克隆抗体结合(该抗体结合FK506后可抑制rG6PDH的活性)，活性的游离型的rG6PDH与氧化型烟酰胺嘌呤二核苷酸(NADH)辅酶相偶联而转化为还原型酰胺嘌呤二核苷酸(NAD)，通过检测NADH吸光度的动态变化而测出FK506浓度。根据文献报道[5-6]，该方法的分析测量范围为2.0～30.0 ng/ml，分析灵敏度为2.0 ng/ml，特异性强，精密度好，平均回收率为(98.0±8.8)%，该法与液相色谱-质谱联用(LC-MC)法具有良好的相关性，是临床上测定FK506较为准确的免疫学方法。

王意如等[7]报道国内FK506治疗引起的肝功能异常率为8.41%。本研究结果显示患者服用FK506后ALT、AST、GGT超过参考范围的比率均高于10%，甚至达到25%，可能是本课题病例组部分患者在用药前存在肝功能指标异常，也可能是本课题研究例数较少，各指标水平分布存在片面性，而导致本研究肝功能结果异常率的偏高；同时高低两组之间异常率比较差异无统计学意义(P＞0.05)，说明FK506用药浓度在5～20 ng/ml内对肝功能影响无差别。报道FK506引发的肝功能异常大多为暂时性的，停药后患者的肝功能一般情况下会恢复正常。

有文献[8]报道FK506治疗后不同血药浓度组ALT、TBIL比较差异有统计学意义。本研究结果显示，FK506高、低血药浓度组肝功能检测指标(ALT、AST、GGT、TBIL)比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；另在FK506血药浓度与肝功能指标的相关性分析中，结果显示，两组患者血清肝功能4项指标与FK506血药浓度均无相关性；通过对两组病例在手术前、后肝功能检测各指标进行比较，发现结果差异无统计学意义。其中个别FK506浓度大于治疗窗浓度的病例结果差异亦无统计学意义，表明FK506的治疗浓度对肝脏的毒性较小，其可能原因为FK506的治疗窗浓度远小于引起肝毒性的阈浓度。另有文献[9]报道，FK506在动物实验中具有促进肝细胞和神经细胞再生的作用，其机制涉及抑制自然杀伤细胞的活性。总之，FK506的治疗浓度窗对肝功能指标未引起改变。由于本研究收集病例存在局限性，FK506在临床器官移植中的长期疗效及对肝脏的毒副作用仍有待于进一步研究。

综上所述，肾移植患者的FK506血药浓度与肝功能检测指标没有相关性。

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Correlation analysis of FK506 blood concentration with liver function index in renal transplant recipients.

LI Mei-zhu1,LIU Chao-lv2,LIN Yu-ling2,TAN Yan-mei3,HE Zhen-hui2.1.Department of Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Foshan,Foshan 528000,Guangdong,CHINA;2.Specialty of Medical Laboratory,Medical School of Foshan Science and Technology College,Foshan 528000,Guangdong,CHINA;3.Research Institute of Biochemistry and Molecular Biology,Guangdong Medical School,Zhanjiang 524023,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation between blood tacrolimus(FK506)therapeutic window concentration and liver function index in renal transplant recipients.MethodsThe FK506 concentration in blood of 85 renal transplant recipients were detected by the enzyme-multiplied immunoassay test(EMIT).According to the FK506 concentration after renal transplantation,the subjects were divided into high concentration(10～20 ng/ml)group(n=40)and low concentration(5～10 ng/ml)group(n=45).The alanine aminotransferase(ALT),aspartate aminotransferase (AST),total bilirubin(TBIL)and glutamyltranspeptidase(GGT)in two groups were determined.ResultsFor abnormal liver function,the TBIL,AST,ALT and GGT was respectively 5.0 ng/ml,2.5 ng/ml,15.0 ng/ml and 25.0 ng/ml in high concentration group,and 6.7 ng/ml,11.1 ng/ml,22.2 ng/ml and 24.4 ng/ml in low concentration group.The difference between the two groups was not statistically significant(P＞0.05).There was no correlation between the FK506 concentration andALT,AST,GGT and TBIL levels in two groups(rs＜0.3，P＞0.05).ConclusionThe liver function indexes of patients after renal transplantation are not correlated to the blood concentration of FK506.

Renal transplantation;FK506;Blood concentration;Liver function

R699.2

A

1003—6350（2015）17—2549—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.17.0923

2014-12-27)

广东省大学生创新创业训练计划项目(编号：201411847042)

何振辉。E-mail：hezhenhui@tom.com