血清自身抗体和抗核抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的价值



血清自身抗体和抗核抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的价值

欧阳艳君

(辽宁省盘锦市辽河油田总医院 消化内科, 辽宁 盘锦, 124010)

关键词:自身免疫性肝病; 自身免疫性肝炎; 原发性胆汁性肝硬化; 原发性硬化性胆管炎

自身免疫性肝病(ALD)是因过度自身免疫反应造成的一类肝脏疾病，发病机制尚不明确，临床主要包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)及原发性硬化性胆管炎(PSC)，前者主要表现为肝细胞受累坏死，后二者主要为肝外胆管细胞受累[1], 3种疾病均可进展为肝硬化，甚至肝癌[2]。因此合适的自身抗体检查，及时并准确诊断该类疾病，对患者的治疗及预后有重要意义。本研究检测自身免疫性肝病患者的部分自身相关抗体，包括抗平滑肌抗体(ASMA)、抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体(AMA)，探讨3者在ALD诊断中的价值，现报告如下。

1资料与方法

选取2013年4月-2015年4月在辽宁省盘锦市辽河油田总医院住院的经病理检查确诊的ALD患者132例设为ALD组，均符合2011年中华医学会风湿病学分会制定的诊断标准[3]。排除标准[4]: ① 合并丙型肝炎病毒(HCV)、戊型肝炎病毒(HEV)、艾滋病病毒(HIV)等病毒感染者; ② 合并自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)等患者; ③ 近期内接受过透析治疗、输血、服用抗凝药等患者。其中男58例，女74例，年龄18～66岁，平均(36.6±10.4)岁；AIH患者49例，PBC患者55例，PSC患者28例。同时选取50例未累及肝脏的其他自身免疫病的患者作为非ALD组，50例同期健康体检者为对照组，男女各半，年龄16～70岁，平均(38.4±12.1)岁。3组年龄、性别等一般资料可比(P>0.05)。

3组均于入院后抽取静脉血分离血清，以1∶100稀释，采用间接免疫荧光法检测血清ANA、ASMA、AMA。严格根据肝脏马赛克间接免疫荧光法检测试剂盒(德国欧盟公司)操作说明书，以HEP-2细胞及大鼠肝、肾和胃组织的冰冻切片作抗原。室温下，抗原与血清共孵育30 min，加入异硫氰酸荧光素(FITC)标记的第二抗体，室温孵育30 min，清洗，甘油封片，荧光显微镜观察结果。

使用EURO LineScan软件(德国欧蒙公司)自动判读标本的阴阳性和着色强度，结果由2位不知情资深医师共同分析。

2结果

2.13组抗ANA、ASMA、AMA阳性检出率比较

ALD组ANA阳性数92例，阳性率69.70%(92/132); ASMA阳性数36例，阳性率为19.70%(26/132)；AMA阳性数59例，阳性率为44.70%(59/132)。非ALD组ANA阳性16例，阳性率为32.00%(16/50)；对照组ANA阳性2例，阳性率为4.00%(2/50)；非ALD组及对照组ASMA、AMA的阳性检出率均为0%。ALD组ANA阳性率显著高于非ALD组与对照组(P<0.01)。

2.2ALD组3种患者ANA、ASMA、AMA阳性

检出率比较

AIH患者ANA阳性表达率为81.63%(40/49)，以胞浆颗粒型为主，少部分具有核点型、核颗粒型等；PBC患者ANA阳性率83.64%(46/55)，可见核膜型、核仁型、均质型、胞浆纤维型及混合型等；PSC患者ANA阳性率较低，为21.43%(6/28)。核型多为核颗粒、核均质型。AIH、PBC患者ANA阳性率差异显著(P<0.01)，且二者均显著高于PSC患者(P<0.01)。PSC患者ANA阳性率与非ALD组差异无统计学意义(P>0.05)。

AIH、PBC、PSC患者ASMA阳性检出率分别为53.06%(26/49)、18.18%(10/55)、0%; AMA阳性检出率分别为16.33%(8/49)、92.73%(51/55)及0%。AIH患者ASMA阳性检出率显著高于PBC患者(P<0.01)、AMA阳性检出率显著低于后者(P<0.01)。

2.3ANA与ASMA、AMA联合检测诊断的

灵敏性与特异性

ANA与ASMA联合检测对AIH的检出率最高；ANA与AMA联合检测对PBC的检出率最高。以非ALD组为参照, ANA与ASMA单独和联合应用对AIH诊断的灵敏度分别为80.40%、66.26%、89.42%; 特异性分别为90.22%、78.30%、92.22%。ANA与AMA单独和联合应用对PBC诊断的灵敏度分别为83.64%、58.18%、92.73%，特异性分别为89.53%、95.06%、96.25%。

3讨论

ALD是由自身免疫反应引起的病理机制不明性肝脏综合征，主要包括AIH、PBC、PSC及这3种肝病并发的重叠综合征。ALD自身抗体检测及肝组织特征检查对其鉴别诊断、治疗以及发病机制的研究中具有重要作用[5-6]。AIH在中、青年女性人群中发病率较高[7]，病情易进展为肝硬化，死亡率极高，因此早期诊断和阻断病情进展十分重要。国际自身免疫性肝炎小组[8]根据AIH患者血清中自身抗体种类，将其分为3种亚型，其中ANA、ASMA阳性为主要特征I型，抗肝肾微粒抗体I型抗体、抗肝细胞溶质抗原Ⅰ型抗体阳性为主要特征的Ⅱ型，以及血清中抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体阳性的Ⅲ型。

ANA可见于多种结缔组织疾病和其他自身免疫性疾病，对AIH的诊断不具有特异性。ASMA靶抗原分为肌动蛋白和非肌动蛋白，对I型AIH的诊断有重要意义。研究[9]表明，血清抗体检查同时出现高滴度ASMA与ANA，AIH诊断率达100%。本研究中，AIH患者ASMA、ANA的检出率分别为53.06%、81.63%明显高于非ALD组患者，且二者联合检测AIH诊断率提高至89.42%, 特异性为92.22%，表明ANA联合ASMA检测可准确诊断AIH，与李晔[10]的研究结果一致。

PBC是一种慢性肝内胆汁淤积性疾病，中老年女性人群中发病率较高，确诊时多数患者已到晚期。有研究[11]报道PBC多种自身抗体检测中，ANA阳性率最高，核型主要以胞浆颗粒为主，其次为核点型。本研究PBC患者ANA阳性率83.64%, 显著高于非ALD组，可见核膜型、核仁型、均质型、胞浆纤维型及混合型等，与上述研究一致。美国肝病学会PBC诊断指导认为AMA阳性是PBC重要的免疫学诊断指标，研究[12]表明95.00%以上的PBC患者AMA检测为阳性。本研究PBC患者AMA阳性率92.73%，略低于该值，可能是因为标本量过小造成的。而本研究ANA与AMA联合检测对PBC诊断的灵敏度提高至92.73%，特异性为96.25%，表明ANA联合AMA检测可准确诊断AIH，与李晔[13]的结果一致。

PSC主要以胆汁淤积综合征为主，ANA阳性率较低，其他抗体检测的阳性率也不高，并且特异性不强[14]。本研究中，PSC患者ANA阳性率为21.43%，与非ALD组差异无统计学意义；ASMA、AMA的阳性率为0%。结果提示自身抗体检测无法作为PSC诊断的可靠依据。这一结果的原因，一方面可能由于纳入的PSC病例数太少，另一方面可能是本研究所选择的自身抗体指标有限，因此对PSC还有待进一步研究。

参考文献

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基金项目:中国高校医学期刊临床专项资金(11520899)

收稿日期:2015-05-10

中图分类号:R 575

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2015)23-191-02DOI: 10.7619/jcmp.201523075