鸭坦布苏病毒病诊断方法及防治措施

2015-04-03 15:36王善辉
兽医导刊 2015年18期
关键词:布苏鸭群引物

王善辉

(江苏省徐州生物工程职业技术学院动物工程系,江苏徐州 221006)

鸭坦布苏病毒病诊断方法及防治措施

王善辉

(江苏省徐州生物工程职业技术学院动物工程系,江苏徐州 221006)

鸭坦布苏病毒病是一种以出血性卵巢炎为主要病变特点的新发、急性、烈性传染病该病,给我国养鸭业造成了巨大的经济损失。论文就鸭坦布苏病毒病临床诊断方法、病毒分离鉴定、防治措施进行综述,以期为鸭坦布苏病毒病的诊断与防控提供参考。

鸭坦布苏病毒;传染病;诊断;防治

自2010年春季开始,我国福建、浙江、上海、山东等主要鸭养殖密集区由南到北暴发了一种以出血性卵巢炎为主要病变特点的新发、急性、烈性传染病,给我国养鸭业造成了巨大经济损失。经病原分离及基因测序,已确定其病原为鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)[1]。国内外学者开展针对该病的病原学、诊断技术、疫苗等方面的相关研究工作。本文对DTMUVD诊断方法及防治措施作一综述,以期为DTMUV防控提供参考。

1 临床诊断

1.1 临床症状

感染鸭主要表现为采食量突然下降,随之产蛋率大幅度下降,群内发病率达100%,病死率为0~12%。体温升高,排绿色稀粪。感染后期,出现腿瘫、转圈等神经症状[2]。

1.2 病理变化

病理剖检主要表现为卵巢出血、变性、萎缩和破裂;卵泡严重出血、坏死;多数病鸭肝脏淤血、肿大、坏死;具有神经症状的发病鸭可见脑膜出血,脑组织水肿。

2 实验室诊断

2.1 病毒的分离与鉴定

采集发病鸭的卵泡膜、肝脏、脾脏等组织,可分离到病毒。万春和等[3]从病死种鸭的卵巢、肝脏等病变组织分离到DTMUV。

2.2 RT-PCR方法

RT-PCR技术具有快速、特异、简便等优点,是目前DTMUV准确、简单诊断的主要方法。张帅等[4]设计了一对特异性引物,建立了检测DTMUV的一步法RT-PCR方法。

2.3 荧光定量RT-PCR方法

实时荧光定量PCR技术实现了PCR扩增反应的实时跟踪和定量检测,是当前动物疫病检测技术中简单、快速、敏感、特异的检测技术。研究人员在E基因序列区内设计了用于TaqMan荧光定量RT-PCR的一对特异性引物及TaqMan探针,分别建立了检测DTMUV的荧光定量RT-PCR方法。

2.4 套式RT-PCR方法

套式PCR,是使用两对PCR引物扩增完整的片段。如果第一次扩增产生了错误片段,则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低。因此,巢式PCR的扩增非常特异。黄欣梅等[5]根据鹅黄病毒JS8O4株全基因序列,设计了2对特异性引物,分别建立了快速检测DTMUV的半套式RT-CR方法及套式RT-PCR方法。

2.5 RT-LAMP方法

RT-LAMP即环介导等温扩增技术,因其具有无需PCR仪、操作简便、反应迅速灵敏度高等优点,特别适合在现场和基层部门应用。李兆龙等[6]根据禽新型黄病毒E蛋白基因序列,在保守区设计了6条特异性引物,分别建立了检测MDTUV的RT-LAMP方法。

2.6 血清学检测方法

国际上通用的黄病毒属血清学检测方法有ELISA、琼脂扩散试验(AGP)、血凝抑制试验(HI)等。姬希文等[7]用纯化的FX2010株作为包被抗原,建立了检测DTMUV血清抗体的间接ELISA法。谢星星等[8]、傅秋玲等[9]也先后建立了关于E蛋白的间接ELISA方法并用于临床检测。

3 防治措施

3.1 预防

消灭传播媒介,全场除草灭蚊。加强饲养管理,适当补充营养药。鸭群饲喂抗病毒中药、干扰素进行预防,发病鸭群同时喂给抗生素,预防继发感染。2011年有鸭坦布苏病毒病油乳剂灭活疫苗相关报道,推荐免疫程序为开产前2~3周免疫2次,间隔2周。2014年中国农业科学院科研人员研制的“鸭坦布苏病毒病活疫苗”,可较好地预防本病。

3.2 治疗

该病目前没有特效治疗药,只能采取对症治疗措施。发病期间,经常对鸭场进行彻底消毒,在鸭群的饮水中添加抗病毒药物,同时使用清热解毒的中草药和增强鸭体免疫力的黄芪多糖,并添加多维和矿物质。发病鸭群可适当添加多维及中药如清温败毒散,提高鸭群抵抗力。或饲料中单独添加白术、水飞蓟素、仙人掌、白花蛇舌草等对发病有所减轻。

[1] 滕巧泱,颜丕熙,张旭,等.一种新的黄病毒导致蛋鸭产蛋下降及死亡[J].中国动物传染病学报,2010,18(6):1-4.

[2] 李玉峰,马秀丽,于可响,等.一种从鸭新分离的黄病毒研究初报[J].畜牧兽医学报,2011,42(6):885-891.

[3] 万春和,施少华,程龙飞,等.一种引起种(蛋)鸭产蛋骤降新病毒的分离与初步鉴定[J].福建农业学报,2010,25(6):663-666.

[4] 张帅,云涛,叶伟成,等.鸭坦布苏病毒一步法RT-PCR检测方法的建立和应用[J].浙江农业学报,2012,24(1):37-40.

[5] 黄欣梅,赵冬敏,刘宇卓,等.禽黄病毒套式RT-PCR检测方法的建立及应用[J].畜牧与兽医,2012,44(6):5-8.

[6] 李兆龙,陈仕龙,林锋强,等.禽新型黄病毒RT-LAMP检测方法的建立[J].畜牧兽医学报,2012,43(4):659-663.

[7] 姬希文,闰丽萍,颜丕熙,等.鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2011,33(8):630-634.

[8] 谢星星,李银,李祥瑞,等.检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法建立及初步应用[J].畜牧与兽医,2014,46(5):24-30.

[9] 傅秋玲,陈珍,施少华,等.鸭坦布苏病毒E蛋白包被抗原间接ELISA方法的建立[J].福建农业学报,2015,30(1):1-5.

王善辉(1977—),女,内蒙古人,博士,讲师,研究方向:分子病毒学与免疫学。

徐州市科技项目(XM13B120);徐州生物工程职业技术学院科研课题(2013B03)。

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