不同脂肪源饵料对日本沼虾抗氧化机能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影响

赵卫红　於叶兵　王资生　吕富　吕林兰

摘要：为研究几种植物油（大豆磷酯、豆油、花生油、菜籽油和鱼油对日本沼虾抗氧化机能及肝胰腺和卵巢中脂肪酸含量的影响，在基础配合饲料中分别添加6%鱼油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油，饲养雌性日本沼虾（063～075 g40 d。结果表明，肌肉中超氧化物歧化酶（SOD活力除鱼油组显著低于菜籽油组外，其余各组之间差异不显著；大豆磷脂组肝胰腺SOD活力显著低于其他各组。大豆磷脂组和菜籽油组肌肉过氧化氢酶（CAT活力显著高于鱼油组、豆油组和花生油组，大豆磷脂组、豆油组和菜油组肝胰腺CAT活力显著高于鱼油组和花生油组。肝胰腺和卵巢均检测到了饲料中未检测到的 C20 ∶[G-3]2n-6，鱼油组显著低于其他各组。鱼油组肝胰腺和卵巢EPA（C20 ∶[G-3]5n-3含量和n-3/n-6的值均显著高于其他各组，n-6高不饱和脂肪酸（PUFA含量显著低于其他各组；大豆磷脂组卵巢亚油酸（C18 ∶[G-3]2n-6含量显著高于鱼油组、花生油组和菜籽油组；豆油组肝胰腺n-6 PUFA含量显著高于鱼油组、花生油组和菜籽油组；花生油组卵巢DHA（C22 ∶[G-3]6n-3含量和n-3/n-6的值仅次于鱼油组，且均高于其他各组；菜籽油组肝胰腺单不饱和脂肪酸含量显著高于其他各组。综上所述，豆油和菜籽油可以一定程度上代替鱼油应用于日本沼虾饲料中。

关键词：日本沼虾；植物油；超氧化物歧化酶；过氧化氢酶；脂肪酸

中图分类号： S96612+2文献标志码： A

文章编号：1002-1302（201412-0266-06[HS][HT9SS]

收稿日期：2014-09-25

基金项目：国家自然科学基金（编号：31101887；江苏省自然科学基金（编号：B2011419、B2012675；江苏省企业博士聚集项目。

作者简介：赵卫红（1973—，女，江苏东台人，博士，副教授，硕士生导师，从事水产动物繁殖、营养与免疫方面的教学与科研工作。Tel：（051588298190；E-mail：misszwh@163com。

日本沼虾（Macrobrachium nipponense别称青虾、河虾，隶属于节肢动物门甲壳纲十足目游泳亚目长臂虾科沼虾属，广泛分布于我国和东南亚地区，其肉味鲜嫩，营养丰富，深受消费者的青睐[1]，是我国重要的传统淡水养殖经济虾类之一。其养殖需要大量配合饲料，其中鱼油作为优质脂肪源是必须添加的成分。鱼油由于加工资源所限，全球鱼油产量近10年来一直徘徊不前，而水产养殖业对鱼油的需求逐年提升，另一方面人们越来越关注鱼油所带来的益处，使得对于直接供人类消费的鱼油需求增加，因此，鱼油一直处于供不应求的状态，价格居高不下，成为制约水产养殖效益的瓶颈。寻找一种物美价廉、来源广泛的脂肪源全部或部分代替鱼油将是水产养殖业发展的必然趋势。植物油原料广泛，产量逐年升高，菜籽油的年产量在近10年来增加了18倍[5]。而且植物油由于价格低廉，富含不饱和脂肪酸，成为水产养殖的重要脂肪源[5]。植物油代替鱼油已成功广泛运用于对脂类利用能力较高的鲑鳟鱼类[6]。在虾蟹类养殖过程中也出现了采用亚麻籽油、豆油、菜籽油和花生油等植物油不同程度地取代鱼油且在生长和繁殖方面具有较好表现的报道。如亚麻籽油、加拿大菜籽油和豆油对斑节对虾（Penaeus monodon的促生长作用显著高于鳕鱼肝油[7]。豆油对提高中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis产卵力的效果优于鱼油[8]。更多报道显示鱼油和植物油的混合作用更佳[9]。脂肪源的营养价值在很大程度上取决于脂肪酸的不饱和程度及各种脂肪酸的比例。一般认为，富含n-6和n-3系列的高度不饱和脂肪酸（HUFA的海水鱼油及其与植物油的混合油对虾蟹类的营养价值要高于HUFA含量较低的动物油和植物油[10]。有研究表明，植物油对虾蟹类促生长作用与植物油中亚麻酸（LNA和亚油酸（C18 ∶[G-3]2n-6，LOA的含量有关，冷水性的日本对虾（Marsupenaeus japonicus Bate[11]和中国对虾（Penaeus chinensis[12]LNA的作用优于LOA，而温水性的斑节对虾[13]和印度对虾（Penaeus indicus[14]LOA的作用优于LNA。

有关植物油在日本沼虾中的作用还未见报道。肝胰腺是甲壳动物脂肪吸收和储存的重要器官，在甲壳动物免疫、繁殖等生理过程中发挥着重要作用[15-16]。本试验通过检测饲喂不同植物脂肪源一段时间后的日本沼虾肝胰腺和卵巢中脂肪酸的含量，并结合其肌肉和肝胰腺中超氧化物歧化酶（SOD和过氧化氢酶（CAT活力，从免疫机能的角度筛选出适合日本沼虾的替选脂肪源，为优化饲料配方、降低饲料成本提供理论基础。

1材料与方法

11试验虾及其饲养

日本沼虾购江苏省盐城市海纯路菜市场。试验前于水族箱中暂养7 d，暂养期间每天投喂2次（分别为08：00和14：00剪碎的蚬肉。选取附肢完整、活泼健康、大小一致（063～075 g的雌虾540尾，随机分成6组，每组分3个小组，每小组30尾，每个小组3个重复，分别放入15个玻璃水族箱（长32 cm 、宽60 cm、高40 cm，水深20 cm内，每天 08：00 和 14：00 投喂自制饲料，每次投饲率为虾湿质量的 2%～3%，根据摄食情况适当调整投喂量。每天投饵2 h后吸取残饵和粪便，养殖期间每天换水1/4。24 h充氧，溶氧量≥55 mg/L，加热棒控温，水温（25±2 ℃。

12试验饲料

参照 SC/T 1066—2003《罗氏沼虾配合饲料》水产行业标准及日本沼虾营养需求相关文献[17-21]设计基础饲料配方，以优质进口鱼粉、豆粕和菜粕为主要蛋白源，分别以鱼油、大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油为脂肪源，油脂添加水平为质量的6%，配制5组试验饲料。饲料原料经粉碎过 60目筛，混合均匀后加工成颗粒饲料，晾干并保存于冰箱中备用。基础饲料配方为30%鱼粉、20%豆粕、10%菜粕、143%啤酒酵母、10%淀粉、02%胆固醇、1%明胶、13%磷酸二氢钙料、2%食盐、1%甜菜碱、4%复合维生素和矿物质预混（预混料为1 kg饲粮提供维生素E 60 mg、维生素B1 15 mg、维生素B2 30 mg、维生素B6 15 mg、维生素B12 05 mg、维生素D3 3 000 IU、维生素 5 mg、维生素A 15 000 IU、生物素 25 mg、叶酸50 mg、泛酸钙50 mg、烟酸75 mg、Cu 3 mg、Fe 25 mg、肌醇1 000 mg、Mn 15 mg、n 700 mg、I 06 mg。各试验组饲料脂肪酸组成见表1。endprint

[F（W26][HT6H][J]表1日本沼虾饲料脂肪酸组成[HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W72，W212W]脂肪酸种类[B（][BHDWG12，W212W]脂肪酸含量（%

[BHDWG12，W42。3，W4。2W]鱼油大豆磷脂豆油花生油菜籽油[BW]

[BHDG4mm，W72，W42DW，W42YQ1，W42DW，W4。2DWW]C12 ∶[G-3]0099035019031026

[BHDW]C14 ∶[G-3]0417543472534585

C15 ∶[G-3]0014054033054047

C16 ∶[G-3]0 14222784229426982241

C17 ∶[G-3]0痕量034028029023

C18 ∶[G-3]0249734795827748

C20 ∶[G-3]01089075059271156

C22 ∶[G-3]0痕量062051353105

C24 ∶[G-3]0痕量031017159041

总饱和脂肪酸3294352376849563972

C14 ∶[G-3]n-3030008009005003

C16 ∶[G-3]n-9621861576859683

C18 ∶[G-3]n-914071668191012961155

C20 ∶[G-3]n-9367368389402778

C22 ∶[G-3]n-92677723863831282

C24 ∶[G-3]n-90200030041075

总单不饱和脂肪酸27123677330029863976

C16 ∶[G-3]3n-3071040064063063

C20 ∶[G-3]5n-31155740653548722

C22 ∶[G-3]6n-3518363251283322

∑n-3174411439688941107

C18 ∶[G-3]2n-63083701229356409

C20 ∶[G-3]4n-6167141142149138

∑n-64755111371505547

总多不饱和脂肪酸22191654233913991654

未知脂肪酸1779319593659398[HJ][BG）F][F）]

13取样

饲养40 d，取样前停食24 h，每组随机挑选10尾虾解剖，取其肌肉、肝胰腺和卵巢，置于-70 ℃超低温冰箱中保存待测。

14SOD、CAT活力和总蛋白含量的测定

SOD、CAT的活力和总蛋白含量均采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定。SOD活力单位定义：1 mg组织蛋白在1 mL反应液中SOD抑制率达50%时所对应的SOD量为1个SOD活力单位；CAT活力单位定义：1 mg组织蛋白1 s分解 1 mmol 的H2O2的量为1个活力单位。

按质量体积比加生理盐水制成10%的组织匀浆，3 000 r/min 离心10 min，然后取上清用生理盐水稀释，肌肉组织按照1 ∶[G-3]9稀释成1%组织匀浆液，肝胰腺组织按照 1 ∶[G-3]19 稀释成05%组织匀浆液，用于测定SOD、CAT活力和总蛋白含量。

15脂肪酸含量的测定

脂肪酸含量的测定方法：参照文献[22]提取各组样品中的脂肪，[JP2]参照文献[23]对其油脂进行皂化及甲酯化；分别吸取1 μL脂肪酸甲酯样品进行气相色谱-质谱分析，气相色谱-质谱仪为Thermo Quest Trace GC/MS，色谱柱采用30 m×025 mm×025 μm SUPELCO GC/MS毛细管柱，气化室温度与传输线温度分别为250、280 ℃；程序升温步骤为初温 50 ℃，10 ℃/min升高至280 ℃，保持10 min。分流比为 10 ∶[G-3]1，进样量为1 μL；质谱条件为EI电离源，信增器电压为1 200 V，离子源温度为230 ℃，四极杆温度为150 ℃。全扫描（SCAN质量为45～500 mau；将样品质谱图与NIST标准图库质谱图进行匹配，确认样品中的脂肪酸类别，采用归一化法计算组分的相对含量。

16数据处理和分析

试验数据均以“平均值±标准差”表示，用SPSS 180对数据进行单因素方差分析，用Duncans法进行多重比较。

2结果与分析

21不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺SOD活力的影响

不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺SOD活力的影响结果见表2。菜籽油组肌肉和肝胰腺SOD活力均显著强于鱼油组，花生油组肝胰腺SOD活力显著强于鱼油组和豆油组，大豆磷脂组肝胰腺SOD活力显著低于其他各组。

[F（W9][HT6H][J][WTH]表2不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺SOD活力的影响[WTB][HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W9，W20W]脂肪源[B（][BHDWG12，W20W]SOD活力（U/mg

[BHDWG12，W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

[BHDG12，W9Q2，W10。2DWW]鱼油7369±385b7845±274b

[BHDW]大豆磷脂7727±220ab5778±038c

豆油7889±716ab7974±305bendprint

花生油8097±1048ab9728±791a

菜籽油9154±524a10060±075a[HJ][BGF]

[JP2]注：同列数据后不同小写字母表示差异显著（P<005。表3同。[F]

22不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺CAT活力的影响

不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺CAT活力的影响结果见表3。除鱼油组外，日本沼虾肝胰腺CAT活力均高于肌肉。大豆磷脂组和菜籽油组肌肉中CAT活力显著高于鱼油组、豆油组和花生油组，大豆磷脂组、豆油组和菜籽油组肝胰腺CAT活力显著高于鱼油组和花生油组。

[F（W8][HT6H][J][WTH]表3不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺CAT活力的影响[WTB][HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W9，W20W]脂肪源[B（][BHDWG12，W20W]CAT活力（U/mg

[BHDWG12，W10。2W][XXSX2-SX192]肌肉肝胰腺[BW]

[BHDG12，W9Q2，W10。2DWW]鱼油253±010de183±098b

[BHDW]大豆磷脂869±036a1578±080a

豆油239±024e2032±273a

花生油330±056cd665±065b

菜籽油451±022b1416±224a[HJ][BG）F][F）]

23不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺脂肪酸含量的影响

不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺脂肪酸含量的影响结果见表4。饲喂不同脂肪源的日本沼虾肝胰腺脂肪酸种类的组成较一致，饱和脂肪酸如C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C20 ∶[G-3]0的含量差异不显著，但不饱和脂肪酸的含量差异较大。鱼油组EPA（C20 ∶[G-3]5n-3和n-3多不饱和脂肪酸含量均显著高于其他各组；鱼油组n-6 PUFA含量显著低于其他各组；n-3/n-6 的值显著高于于其他各组。豆油组和大豆磷脂组 C18 ∶[G-3]2n-6、C20 ∶[G-3]2n-6和多不饱和脂肪酸含量较高。菜籽油组饱和脂肪酸（SFA含量最低，而C18 ∶[G-3]n-9、C22 ∶[G-3]n-9和单不饱和脂肪酸总量显著高于其他各组。[FL]

[F（W30][HT6H][J]表4不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺脂肪酸组成的影响[HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W72，W522W]脂肪酸种类 [B（][BHDWG12，W522W]肝胰腺脂肪酸含量（%

[BHDWG12，W102。5W]鱼油组大豆磷脂组豆油组花生油组菜籽油组[BW]

[BHDG12，W72，W102。5W]C12 ∶[G-3]0019±010a014±002a015±005a015±008a013±012a

[BHDW]C13 ∶[G-3]0003±003a003±001a004±001a003±003a痕量

C14 ∶[G-3]0869±064a418±074b424±013b420±092b321±084b

C15 ∶[G-3]0074±008a054±020ab035±033b043±017ab032±006b

C16 ∶[G-3]01769±134ab1844±197a1572±072bc1628±022abc1455±086c

C17 ∶[G-3]0039±009a027±010a027±006a010±015b006±002b

C18 ∶[G-3]0495±012b612±079a520±014ab473±069b338±025c

C19 ∶[G-3]0002±002a002±002a001±001a002±002a003±001a

C20 ∶[G-3]0027±005a050±031a051±035a044±039a055±047a

C22 ∶[G-3]0009±006b014±011b015±001b057±033a009±004b

C24 ∶[G-3]0003±003ab003±004ab002±003ab016±014a001±001b

总饱和脂肪酸3310±022a3043±269ab2665±101b2711±293b2230±182c

C16 ∶[G-3]n-9920±084a508±091b438±019b514±054b450±090b

C18 ∶[G-3]n-92698±194c3059±478c2927±212c3697±308b4630±155a

C20 ∶[G-3]n-9333±028a198±018b222±014ab231±092ab320±050a

C22 ∶[G-3]n-9178±019ab124±007b109±015b125±095b256±041a

C24 ∶[G-3]n-9015±006a005±004a005±006a009±010a005±003a

总单不饱和脂肪酸4146±106bcd3894±577cd3700±185d4576±198b5662±081a

C20 ∶[G-3]5n-31092±017a636±165b620±000b493±114bc349±032c

C22 ∶[G-3]6n-3360±039a271±070a283±045a270±052a109±025b

∑n-31452±052a906±233b903±045b762±165b459±047cendprint

C18 ∶[G-3]2n-6477±077c1641±113ab2068±204a1399±164b1276±063b

C20 ∶[G-3]2n-6055±007c232±081ab292±057a215±048ab149±028bc

C20 ∶[G-3]4n-6104±055a056±023ab045±006b038±012b024±003b

∑n-6637±046c1929±198ab2403±141a1653±128b1449±082b

总多不饱和脂肪酸2089±082bc2835±805ab3305±096a2415±327bc1908±129c

n-3/n-6228±015a075±017b038±004b050±025b032±002b

未知脂肪酸455±032228±021330±017298±015200±006[HJ][BG）F]

注：同行数据后不同小写字母表示差异显著（P<005。表5同。[F）]

[FL（22]24不同脂肪源对日本沼虾卵巢脂肪酸的影响

不同脂肪源对日本沼虾卵巢脂肪酸含量的影响结果见表5。不同脂肪源对日本沼虾卵巢C12 ∶[G-3]0、C13 ∶[G-3]0、C19 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]n-9脂肪酸的含量影响不显著（P>005）。鱼油组的亚油酸、C20 ∶[G-3]2n-6含量及n-6/n-3比值均显著低于其他各组（P<005），EPA含量显著高于其他各组（P<005）。大豆磷脂组亚油酸含量最高，显著高于鱼油组、花生油组和菜籽油组（P<005）。花生油组C16 ∶[G-3]0和C22 ∶[G-3]0均显著高于其他各组（P<005）。鱼油组和花生油DHA（C22 ∶[G-3]6n-3）含量组差异不显著（P>005），且显著高于豆油组和菜籽油组（P<005）。

3结论与讨论

31不同脂肪源对日本沼虾肌肉和肝胰腺SOD和CAT活力的影响

SOD是清除氧自由基的重要酶类，也是机体内唯一以O2-[G-3]·[JP2]为底物的酶，它的作用是催化O2-[G-3]·歧化为过氧化氢和O2，维持细胞内的氧自由基处于低量无害状态[24]。本试验发现菜籽油肌肉和肝胰腺中SOD活力均显著高于鱼油组，与斑马鱼（Danio rerio的研究结果[25]一致。相关文献报道菜粕和花生粕代替鱼粉也能提高血清、肌肉或肝胰腺SOD活力，且这种增加效益与添加量有关，添加量越高，SOD活力越强[26-28]。[FL]

[F（W29][HT6H][J]表5不同脂肪源对日本沼虾卵巢脂肪酸组成的影响[HTSS][STB]

[HJ5][BG（！][BHDFG3，W72，W522W]脂肪酸种类[B（][BHDWG12，W522W]卵巢脂肪酸含量（%

[BHDWG12，W102。5W]鱼油组大豆磷脂组豆油组花生油组菜籽油组[BW]

[BHDG12，W72，W102。5W]C12 ∶[G-3]0016±001a017±004a016±008a023±007a024±006a

[BHDW]C13 ∶[G-3]0003±001a003±001a002±002a003±002a002±001a

C14 ∶[G-3]0548±004a295±066b277±091b367±073b366±082b

C15 ∶[G-3]0072±004ab074±017a044±014bc058±019ab024±008c

C16 ∶[G-3]02130±028b1960±082b2030±278b2449±073a2077±142b

C17 ∶[G-3]0080±001a076±021a056±011ab078±019a035±016b

C18 ∶[G-3]0698±001c698±084c738±018bc797±045ab734±022bc

C19 ∶[G-3]0005±001a006±004a003±001a005±002a003±002a

C20 ∶[G-3]0023±002c029±004bc023±007c042±013ab043±006a

C22 ∶[G-3]0002±001c006±001b002±001c012±003a004±002bc

C24 ∶[G-3]0痕量002±001a痕量002±001a痕量

总饱和脂肪酸3575±035a3164±284b3189±432b3836±352a3312±127b

C16 ∶[G-3]n-9831±004a633±195ab488±087bc573±275abc335±139c

C18 ∶[G-3]n-92389±081bc2234±287c2597±090abc2437±096bc2742±142ab

C20 ∶[G-3]n-9252±004a157±049b170±029b208±475ab250±031a

C22 ∶[G-3]n-9183±152a056±023a054±001a067±013a040±009a

C24 ∶[G-3]n-9005±003a003±001a痕量004±000a痕量

总单不饱和脂肪酸3659±064ab3081±016c3309±025bc3289±032c3367±046bc

C20 ∶[G-3]5n-31475±029a859±156bc882±177b938±183b638±159c

C22 ∶[G-3]6n-3557±039a348±008b232±072c488±079ab206±064cendprint

∑n-32032±009a1207±148bc1114±249cd1426±107b844±179d

C18 ∶[G-3]2n-6212±059c1848±013a1455±080ab932±068b1036±053b

C20 ∶[G-3]2n-6062±011d178±027bc241±031a228±033ac210±063abc

C20 ∶[G-3]4n-6010±006a054±072a050±012a039±017a痕量

∑n-6283±076c2081±058a1747±035ab1199±087b1246±103b

总多不饱和脂肪酸2315±086bc3288±207a2860±286ab2625±179bc2090±193c

n-3/n-6745±197a059±005b076±051b117±018b068±033b

未知脂肪酸451±011467±029642±019250±0201231±073[HJ][BG）F][F）]

[FL（22]也有文献报道，菜籽油与鱼油相比虽然可以提高异育银鲫（Carassius auratus gibelio血清SOD活力，但是与鱼油组差异不显著[29]。上述报道的差异可能与菜籽油的添加量不同有关。

CAT是一种含铁的氧化酶，与产生H2O2的酶类相偶联，使H2O2分解为水和分子氧。本试验发现，与鱼油组比较，大豆磷脂、豆油花生油和菜籽油均可以提高日本沼虾肝胰腺CAT活力，且大豆磷脂、豆油、和菜籽油的作用显著，与斑点叉尾鮰（Lctalurus punctatus Rafinesque中的研究结果[30]一致。不同脂肪源的差异实质上就是脂肪酸组成及比例的差异，本试验中几种植物油饲料中亚油酸含量均高于鱼油组，而鱼油组饲料中（EPA+DHA含量最高。杨鸢劼等发现，在饲料中添加亚油酸组的黄鳝（Monopterus albus血清中CAT活力显著高于在饲料中添加（EPA+DHA组的活力[31]。这可能是本试验中植物油能提高肝胰腺CAT活力的原因。

32肝胰腺中SOD、CAT活力与脂肪酸含量的关系

SOD酶活力的增强，会减少体内氧自由基的积累，减少不饱和脂肪酸的氧化，提高不饱和脂肪酸的含量。本试验中发现菜籽油组肝胰腺中SOD力最高，其次为花生油组，肝胰腺中不饱和脂肪酸也是在菜籽油组含量最高，其次为花生油组。本试验肝胰腺中SOD和CAT活力出现了不对称性，也就是说各脂肪源组肝胰腺中SOD和CAT活力没有出现同时增强或减弱的现象。有学者认为，这种不对称性会引起体内氧自由基的积累，从而使不饱和脂肪酸的氧化，降低不饱和脂肪酸的含量[32-33]。本试验中除了发现肝胰腺中SOD活力和肝胰腺中单不饱和脂肪酸含量之间的正相关性，并没有发现SOD和CAT的不平衡性和单不饱和脂肪酸含量之间具有相关性。此假说是基于CAT作用于SOD产物H2O2理论基础上产生的，即SOD活力越高，分解的O2-[G-3]·越多，产生的H2O2也越多，因此机体会产生越多的CAT来清除H2O2，但是体内参与清除H2O2的酶不仅仅只有CAT，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px也具有清除H2O2的功能[34]，所以本试验现象可能是由于不同试验组产生不同活力的GSH - Px所致。

33不同脂肪源对日本沼虾肝胰腺和卵巢脂肪酸组成的影响

本试验中豆油组的饲料与肝胰腺PUFA含量均最高，鱼油组饲料与肝胰腺的EPA含量最高，上述结果表明，日本沼虾肝胰腺中PUFA的组成与其饲料密切相关。与Deering等研究结果[7，35]一致。饲料中所含脂肪酸是虾类体组织脂肪酸特别是必需脂肪酸的重要来源，饲料脂肪含量及质量将影响体组织脂肪酸组成[36]。

饲料中未检测到C20 ∶[G-3]2n-6，但是在每组试验虾肝胰腺和卵中均检测到数量不等的C20 ∶[G-3]2n-6。郭志峰等在对日本沼虾不同发育阶段卵巢中脂肪酸进行了测定和比较的时候，发现日本沼虾卵巢进入生长期开始出现C20 ∶[G-3]2n-6[37]，本试验虾卵巢发育处于Ⅲ期，即为郭志峰等所指生长期。另外有研究表明，日本沼虾肝胰腺是卵巢发育的重要营养源[15-16]，本试验研究发现卵巢（y和肝胰腺（x中C20 ∶[G-3]2n-6含量有着较强的相关性：y=-0257x2+1562x-0083（r2=078，这种相关性为上述结论提供了新的证据。本试验发现鱼油组C20 ∶[G-3]2n-6含量最低，卵巢和肝胰腺中含量分别为（055%±007%和（062%±011%，其他各组卵巢和肝胰腺中含量均较高（149%～292%，造成这种差异及该脂肪酸在卵巢发育过程中的作用有待进一步研究。

试验虾肝胰腺和卵巢中的含量最高的脂肪酸均为 C18 ∶[G-3]n-9，肝胰腺中为2698%～4630%，卵巢中为2234%～2988%。与郭志峰等对日本沼虾卵巢中脂肪酸的测定结果[37]一致。斑节对虾中也有类似的报道，且斑节对虾卵巢发育过程中C18 ∶[G-3]1n在肝胰腺中不断积累[38]。表明 C18 ∶[G-3]n-9 是日本沼虾卵巢发育的重要能源物质。

EPA和DHA是水产动物性腺发育所需的重要营养因子，影响着生物体的卵巢发育、卵子孵化和幼体成活力[39-41]。本试验结果显示，鱼油组肝胰腺EPA含量和卵巢DHA含量显著高于其他各组。结果表明，虾体肝胰腺和卵巢中的EPA和DHA与饲料中的含量差异不完全一致，比如豆油饲料组DHA含量最少，肝胰腺和卵巢中DHA含量均分别为菜籽油组含量最低。表明EPA与DHA的吸收不仅和其在饲料中的含量有关，而且与饲料中各脂肪酸的配比有关，虾体具有合成少量DHA和EPA的能力[42-43]，可能也是造成这种差异的原因之一。endprint

本试验中植物油组（大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢亚油酸显著高于鱼油组，与虹鳟的研究结果[44]一致。有学者认为，植物油可以将鱼体内亚油酸延长并去饱和为n-3 PUFA（EPA和DHA[45-46]。本研究发现植物油组（大豆磷脂、豆油、花生油和菜籽油肝胰腺和卵巢中EPA显著低于鱼油，DHA与鱼油组差异不显著，本研究结果与虹鳟（Oncorhynchus mykiss和大西洋鲑鱼（Salmo salar中的研究结果[47-48]一致。表明虾体内可能不具有将亚油酸延长并去饱和为EPA和DHA的作用，也有可能因为日本沼虾卵巢发育需要较多的亚油酸。据相关文献报道，在卵巢发育过程中，日本沼虾卵巢和肝胰腺中EPA的含量逐渐下降，而亚油酸含量逐渐上升[38]。

综上所述，大豆磷脂可以提高卵巢亚油酸的含量，豆油可以提高肝胰腺n-6 PUFA和卵巢亚油酸的含量，花生油可以提高卵巢DHA和n-3/n-6的值，菜籽油可以提高肝胰腺MUFA和卵巢n-3 MUFA含量。其中亚油酸、n-6 PUFA、DHA和n-3 PUFA对甲壳动物免疫机能和繁殖性能均具有一定的促进作用[49-50]。因此，大豆磷脂、豆油、花生油与菜籽油作为日本沼虾备选脂肪源均具有一定的积极作用，其中大豆磷脂和豆油的作用相似，但大豆磷脂会降低肝胰腺SOD活力，花生油会降低肝胰腺CAT活力，与此相反，豆油可以提高肝胰腺CAT活力，菜籽油可以提高肌肉和肝胰腺中SOD和CAT活力。因此，豆油和菜籽油在日本沼虾饲料中可以一定程度上代替鱼油，具体替代方案还需要结合日本沼虾生长等指标进一步研究阐明。

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