头孢拉定残留溶媒分析方法学的确认

2015-04-01 02:03董萍

机电信息 2015年5期

董萍

（上海新亚药业有限公司新先锋药厂，上海201203）

0 引言

由于药品具有特殊性，因此对其进行检验方法学的确认是必须的，其可以确保样品分析的准确性、精密性，使广大民众可以放心安全地使用药品。根据新版GMP第223条规定，符合下列情形之一的，应当对检验方法进行验证：（1）采用新的检验方法；（2）检验方法需变更的；（3）采用《中华人民共和国药典》及其他法定标准未收载的检验方法；（4）法规规定的其他需要验证的检验方法。又根据《中华人民共和国药典（2010版增补本）》中残留溶媒测定项的要求，现对本公司生产的头孢拉定残留溶媒分析方法进行确认，以证明该分析方法在实验室条件下的适用性。

《中华人民共和国药典（2010版增补本）》规定对残留溶媒的测定可采用高效气相色谱法。高效气相色谱法（GC）以永久性气体为流动相（通常叫载气），利用流动相和固定相中的分配系数的差别，从而在两相间反复多次分配，使原来分配系数差别很小的各组分分离开来。气相色谱法的分析对象多为分子质量小于1 000、低沸点、易挥发、热稳定性好的化合物。

1 确认实验所用仪器与试剂/试药

1.1 实验所用的主要仪器

气相色谱仪：7890A，Agilent；顶空进样器：7697A，Agilent；分析天平：FA1604S，上海天平仪器厂；色谱柱：HP-1（60m×0.53mm×5 μm），Agilent；色谱工作站：Rev.C.01.03，Agilent。

1.2 实验所用的试剂/试药

丙酮（分析纯）：500m L/瓶，宜兴市达华化工有限公司；头孢拉定（注射用）：原料药，上海新亚药业有限公司。

2 确认的方法

2.1 色谱条件

检测温度：250℃；进样口温度：200℃；分流比：10:1；空气流速：400m L/min；氢气流速：40m L/min；氮气流速：15 psi（2.2 kPa）；柱温：80℃；进样量：1.0 m L；顶空条件：顶空瓶10m L；平衡温度：80℃；平衡时间30m in；定量环温度：100℃；传输管温度：110℃。

2.2 供试品储备液配制

精密称取供试品1.0 g置于10m L容量瓶，加内标液至刻度，摇匀。

2.3 对照储备液配制

精密称取丙酮0.3 g置于50m L容量瓶，加水至刻度，摇匀。

2.4 供试品溶液配置

吸取供试品储备液3m L置于顶空瓶，密封瓶盖，摇匀。

2.5 对照品溶液配置

吸取对照品储备液10m L置于100m L容量瓶中，加水至刻度，再吸取3m L置于顶空瓶中，密封瓶盖，摇匀。

2.6 残留溶剂含量的计算

按外标法以峰面积计算残留溶剂含量：

3 确认内容

3.1 确认依据

《中华人民共和国药典（2010版增补本）》中关于残留溶媒测定项的要求。

3.2 专属性试验

吸取对照品储备液10m L置于100m L容量瓶中，加水至刻度，再吸取3m L置顶空瓶中，密封瓶盖，摇匀。制备对照品储备液5份，各进样1针，得到各物质峰面积的平均值的RSD（相对标准偏差）、分离度及保留时间。表1为各溶剂的峰面积、RSD、塔板理论数，图1～图5分别为各专属性色谱图，并根据下列公式计算相对标准偏差：

式中S——样本标准偏差；

x——计算结果的算术平均值。

式中 n——样品总数；

i——物料中某成分的各次测量值。

根据表1数据，各溶剂峰的塔板理论数均大于5 000，符合验证要求。

3.3 定量限

以S/N=10计算定量限（其中，S为灵敏度，N为噪声），依次稀释对照品储备液。表2为丙酮定量限。

3.4 回收率

3.4.1 样品残留溶剂原有含量

1 g样品中残留溶剂的原有含量如表3所示。

3.4.2 重复性试验

精密移取储备液8m L置于100m L容量瓶，加水稀释至刻度，作为溶液1；精密移取储备液10m L置于100m L容量瓶，加水稀释至刻度，作为溶液2；精密移取储备液12m L置于100m L容量瓶，加水稀释至刻度，作为溶液3。分别取3份样品，每份1.0 g，分别置于10 m L容量瓶中，分别加入溶液1、溶液2、溶液3至刻度，作为样品溶液1、样品溶液2、样品溶液3，每种样品溶液吸取3m L置于顶空瓶，摇匀，各进3针。