VITEK2-COMPACT全自动微生物分析仪的正确度验证

王 燕，钱耀先，陈 俊，周光莉，杨云敏，马思雨，吴世木

（兴义市人民医院检验科，贵州562400）

VITEK2-COMPACT全自动微生物分析仪的正确度验证

王 燕，钱耀先，陈 俊，周光莉，杨云敏，马思雨，吴世木

（兴义市人民医院检验科，贵州562400）

目的验证VITEK2-Compact全自动微生物分析系统鉴定和药物敏感性试验的正确度。方法用纸片扩散（K-B）法和细菌鉴定仪（ATB）鉴定系统作为评价VITEK2-Compact全自动微生物分析系统药物敏感性试验和鉴定的参考方法，14株已知室间质评菌株和19株临床菌株分别用VITEK2-Compact和参考方法鉴定和药物敏感性试验，并对结果做统计学分析。结果VITEK2-Compact鉴定与所选定ATB参考鉴定方法比较，符合率为100.00%。药敏卡与K-B法结果标准符合率为96.90%：一般错误率为2.35%，严重错误率为0.75%，重大错误率为0.00%。结论VITEK 2-Compact全自动微生物分析系统的正确度能满足临床要求，可应用于临床微生物实验室临床标本的细菌鉴定及药敏试验。

微生物敏感性试验； 纸片扩散抗菌试验； 正确度； 最小抑制浓度

当今微生物室的鉴定及药敏试验工作已由传统的手工试验发展到今天的全自动微生物分析系统，因其快速简便，目前在许多临床实验室已广泛应用。但其鉴定及药敏结果的准确是否满足临床要求，是临床检验人员及临床医生最为关注的，因此，特针对这种情况，作者对实验室的VITEK2-Compact全自动微生物分析系统做了正确度的验证，检验该系统的正确度是否满足临床需求，以保证检验结果的准确，更好地为临床服务。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 卫生部室间质评菌株14株（肠杆菌科5株，葡萄球菌4株，肠球菌2株，链球菌1株，念珠菌2株）。2014年本科分离出的19株临床菌株（8株肠杆菌科，3株葡萄球菌，2株肠球菌，4株非发酵菌，2株链球菌）。

1.1.2 仪器和试剂

1.1.2.1 仪器 VITEK2-Compact全自动微生物分析仪。

1.1.2.2 试剂 VITEK2-Compact GN13药敏卡，VITEK2-CompactGN鉴定卡，VITEK2-CompactGP鉴定卡VITEK2-Compact GP67药敏卡，VITEK2-Compact GP68药敏卡，VITEK2-Compact YST鉴定卡，ATB鉴定板条。哥伦比亚血琼脂培养基[梅里埃（上海）生物制品有限公司]，M-H琼脂培养基[梅里埃（上海）生物制品有限公司]，K-B药敏纸片（Oxoid Limited）。

1.2 方法

1.2.1 质控 细菌鉴定卡用霍氏肠杆菌ATCC700323、嗜麦芽ATCC17666、铅黄肠球菌ATCC700327、腐生葡萄球菌ATCCBAA-750做质控检测。药敏卡用大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC29213、粪肠球菌ATCC29212做质控检测。K-B法用大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923进行质控监测。

1.2.2 细菌鉴定 VITEK2-Compact鉴定卡及ATB鉴定板条均按照厂家提供的仪器和本实验室的SOP文件操作规程要求进行操作，每个菌株测定1次，收集数据。

1.2.3 药物敏感性检测 VITEK2-Compact药物敏感性卡检测按照仪器的SOP文件操作规程要求进行操作，纸片扩散（K-B）法按照美国临床实验室标准化协会（CLSI）标准要求操作，每个菌株做对应药物敏感性试验1次，收集数据。

1.2.4 超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）和耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）确证试验

1.2.4.1 ESBLs用K-B药敏纸片头孢他啶，头孢他啶/克拉维酸。头孢噻肟，头孢噻肟/克拉维酸确认，按照美国CLSI标准要求操作。

1.2.4.2 MRS用K-B药敏纸片头孢西丁确认，按照CLSI标准要求操作。

1.2.5 结果分析 （1）鉴定结果分析。将所有鉴定结果分为4类进行分析。①首选鉴定：VITEK2-Compact鉴定百分率大于或等于85%；②低分辨鉴定：VITEK2-Compact鉴定百分率小于85%，给出2～3个等百分比鉴定结果，并提供补充试验；③属对种错鉴定：VITEK2-Compact鉴定株属名均与已知菌结果相同，但种名不同；④正确鉴定：首选鉴定与低分辨鉴定菌株之和。（2）药物敏感性结果分析。药物敏感性结果按以下4种情况进行分析。①标准符合率（CA）：VITEK2-Compact药敏结果与K-B法结果利用CLSI解释规则进行解释，其结果完全一致；②严重错误（VME）：K-B法结果为R，而VITEK 2-Compact药敏结果为S；③重大错误（ME）：K-B法结果为S，而VITEK 2-Compact药敏结果为R；④一般错误（MIE）：KB法结果为S或R，而VITEK2-Compact药敏结果为I；或K-B法结果为I，而VITEK2-Compact药敏结果为S或 R[1-4]。

2 结 果

2.1 细菌鉴定结果

2.1.1 2014年卫生部室间质评菌株鉴定结果 所选取的9株菌株均来自不同标本，其鉴定率结果符合要求，见表1。

表1 VITEK2-Compact对室间质评菌株的鉴定结果

2.1.2 2014年卫生部室间质评菌株药敏结果 所选取的9株菌株均来自不同标本，其药敏结果与已知结果比较，见表2～5。

表2 VITEK2-Compact对室间质评菌株（肠杆菌）细菌药敏试验结果与已知结果比较

表3 VITEK2-Compact室间质评菌株（葡萄球菌）药敏试验结果与已知结果比较

2.1.3 临床细菌鉴定结果 选取的15株临床菌株同时用VITEK2和ATB鉴定系统鉴定，除2株肺链ATB鉴定值为88.4%外，其余2种方法鉴定值均大于95.0%，首选鉴定和正确鉴定均为100%，低分辨鉴定和属对种错鉴定均为0。见表6。

表4 VITEK2-Compact室间质评菌株（肠球菌）药敏试验结果与已知结果比较

表5 VITEK2-Compact室间质评菌株（肺炎链球菌）药敏结果与已知结果比较

2.2 VITEK2-Compact药物敏感性检测结果与K-B法检测结果的比较

2.2.1 肠肝菌科细菌药物敏感性检测结果 在8株肠肝菌科-抗菌药物组合中VME和ME，2株细菌-妥布组合中出现MIE，2株细菌-头孢吡肟组合中出现MIE。在所比对的14种抗菌药物中12种抗菌药物的符合率为100.0%，总符合率为96.4%。见表7。

表6 VITEK2-Compact与ATB鉴定结果比较

表7 8株肠肝菌科细菌VITEK2-Compact药敏与K-B法结果比较

2.2.2 非发酵菌药物敏感性检测结果 在4株非发酵菌-抗菌药物组合中无VME和ME，1株不动-复方新诺明组合中出现MIE，1株不动-头孢曲松组合中出现MIE，1株不动-庆大霉素组合中出现MIE。在所比对的14种抗菌药物中11种抗菌药物的符合率为100%，总符合率为94.4%。见表8。

表8 4株非发酵菌VITEK2-Compact药敏与K-B法结果比较

2.2.3 葡萄球菌药物敏感性检测结果 在3株葡萄球菌-抗菌药物组合出现1例VME、ME及MIE，在所比对的12种抗菌药物中11种抗菌药物的符合率为100.0%，总符合率为97.0%，见表9。

表9 4株葡萄球菌细菌VITEK2-Compact药敏与K-B法结果比较

2.2.2 肠球菌药物敏感性检测结果 在2株肠球菌-抗菌药物组合中，无VME、ME和MIE，在所比对的9种抗菌药物中9种抗菌药物的符合率为100%，总符合率为100%，见表10。

2.3 ESBLS和MRS测定结果 VITEK2-Compact检测ESBLs和MRS结果与K-B纸片确认结果比较，其8株试验株的ESBLS符合率为100%，3株MRS试验株符合率为100%。见表11。

表10 2株肠球菌细菌VITEK 2-Compact药敏与K-B法结果比较

表11 VITEK2-Compact对ESBLs和MRS测定结果与确诊结果比较

2.4 结果报告时间

2.4.1 VITEK2-Compact鉴定结果报告时间 在所选取的19株临床菌株中VITEK2-Compact鉴定时间最短的是粪肠球菌和大肠埃希菌，且时间都相对较短。最长的是肺炎克雷伯菌和屎肠球菌。但时间均小于10 h。见表12。

表12 VITEK2-Compact鉴定结果报告时间（h）

2.4.2 VITEK2-Compact药物敏感性结果报告时间 在所选取的19株临床菌株中VITEK2-Compact药敏时间最短的是肺炎克雷伯菌，最长的是肺炎链球菌。除1株铜绿假单胞菌和肺链时间大于10 h外，其余时间均小于10 h。见表13。

表13 VITEK2-Compact药物敏感性结果报告时间（h）

3 讨 论

ATB鉴定是在享誉全球的细菌鉴定“金标准”——API细菌鉴定系统的基础上，将其API20项生化反应增加到32项，这样ATB系统的鉴定范围更广，鉴定准确性更高，能鉴定大于或等于600种菌株，并且试验操作简便，操作过程标准化，易于保证结果准确可靠，所以本试验特选用在“金标准”API基础上改良的ATB鉴定作为VITEK2-Compact鉴定的参考方法。K-B纸片法依据美国CLSI和WHO推荐的药物敏感性试验，其中CLSI-100文件中指出手工纸片法头孢他啶，头孢他啶/克拉维酸。头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸确认作为判断ESBLs的标准方法；K-B药敏纸片头孢西丁作为判断MRS的标准方法。所以本试验选定ATB鉴定及K-B纸片法来评价VITEK2-Compact的正确度[5-7]。

本次试验选用2013年至2014年部分室间质评菌株做鉴定及药敏试验，其中室间质评鉴定菌株9株，鉴定率均大于95%，与已知结果符合率为100%。8株室间质评菌株做药敏试验，葡萄球菌、链球菌和肠球菌与已知结果符合率为100%，但肠杆菌科-呋喃妥因有2株菌与已知结果出现一般不符合，既已知结果是S，试验结果I，而试验组中肠杆菌科-呋喃妥因2株菌在VITEK2-Compact结果是I，K-B纸片法结果是R，都低1个梯度，与已知结果相差1个梯度，可能原因是菌液浓度偏高导致，但其真正原因有待实践工作中做更多的试验分析比较得出。

选用的19株临床菌株均是临床常见致病菌，与ATB鉴定及K-B药敏结果比较，其VITEK2-Compact的鉴定结果与ATB结果符合率为100%，药敏试验结果总符合率为96.90%，达到CLSI的要求——既当一种新方法的建立与参考方法比较大于或等于90%，获得了较好的结果。但在试验中还是出现了MIE（2.35%）、ME（0.75%）。一般错误在肠杆菌科中主要是呋喃妥因及妥布霉素，非发酵菌中主要是鲍曼不动杆菌菌株——复方新诺明、庆大霉素及头孢曲松抗菌药物，其结果都是相差1个梯度，可能与配置菌液浓度有关。VME主要是葡萄球菌科-苯唑西林抗菌药物，但试验中通过头孢西丁纸片确认为S，初步分析也可能是操作时菌液浓度调制不好导致，但因其实验株过少，不能充分证明，其真正原因有待下一步在实践工作中进行大量的试验数据分析研究。

在临床工作中，由于抗生素的广泛使用，患者耐药率逐年升高，产ESBLs及MRS的菌株明显增加，因此，在工作中对ESBLs和MRS的检测工作就更加重要。从表7中可以看出，VITEK2-Compact上ESBLs和MRS与K-B纸片法结果有很好的符合率，达到100%，满足临床需求[8-10]。

传统的手工鉴定及药敏需要较长的时间，且操作繁琐，而VITEK2-Compact无论在鉴定及药敏试验都能较快地得出结果，如大肠及粪肠菌鉴定在2.75 h就能报告，肺克药敏在5.25 h，大大满足了临床需求，为医生更早、更好地选择抗菌药物提供了依据。

从以上试验数据总结可以看出，无论是室间质评菌株或临床菌株，虽然存在一般错误和严重错误，但其试验鉴定值及药敏结果符合率，鉴定及药敏报告时间都能完全满足临床需求，获得了较好的正确度。对于试验中出现的少部分一般错误及严重错误不吻合的，实践工作中加做K-B药物敏感性纸片，必要时做其他补充药物敏感性试验，以弥补仪器这方面结果的不足，保质保量地把检验结果反馈给临床，更好地为临床服务。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2015.10.033

：B

：1009-5519（2015）10-1524-05

2015-01-22）

王燕（1982-），女，贵州兴义人，主管检验师，主要从事临床微生物检验工作；E-mail：56294606@qq.com。