液相色谱-质谱联用技术在水产品兽药残留检测中的应用

陈京都，吴红军，成强，王龙根，臧素娟

(扬州市农产品质量监督检测中心，江苏扬州 225101)

液相色谱-质谱联用技术在水产品兽药残留检测中的应用

陈京都，吴红军，成强，王龙根，臧素娟

(扬州市农产品质量监督检测中心，江苏扬州 225101)

液相色谱-质谱联用技术逐渐成为水产品中兽药残留检测的重要手段。从技术原理、样品处理方法的改进和新方法的应用，以及多兽药残留同时分析等方面论述了液相色谱-质谱联用技术在水产品兽药残留检测中的应用与进展。

水产品；兽药残留；检测；液相色谱-质谱联用仪

水产品在养殖过程需要使用兽药来提高产品的质量和产量，所用兽药的种类较为复杂，除了消毒剂、防腐剂，还有杀虫、驱虫类，抗生素类，磺胺类、呋喃类和喹诺酮类抗菌药等，个别情况下还会使用某些激素类的兽药［1］，违规或过量使用导致的药物残留不仅会通过环境和食物链的作用间接对人体健康造成危害，还会造成产地环境的污染，从而影响我国养殖业的发展。水产品中兽药的使用与残留越来越受到广泛的关注，已经颁布实施与水产品质量安全相关的法律法规如《渔业法》、《农产品质量安全法》、《动物防疫法》、《兽药管理条例》、《水产养殖质量安全管理规定》等为水产品质量安全提供了有力保障，除此之外，还需要准确的分析手段为法律法规的实施提供技术支撑。

液相色谱-质谱联用技术综合了液相色谱的高分离能力和质谱的高选择性、高灵敏度以及能够准确提供化合物的相对分子质量和结构信息等优点，具有分析时间短，对高沸点、难挥发和热不稳定化合物的分析能力强等优势［2］，在农产品和食品质量安全检测分析领域得到了广泛应用［2-4］。笔者结合近几年来的研究，从样品前处理的改进及多组分兽药残留分析等方面介绍了液相色谱-质谱联用技术在水产品兽药残留检测方面的应用，并对今后的发展趋势进行了展望。

1 液相色谱-质谱联用技术原理

液相色谱-质谱联用技术的应用起步于20世纪70年代，经历了30多年的发展，直至大气压离子化接口技术的出现，才成为常规应用的重要分析方法。目前在农产品和食品检测方面应用最广泛的是大气压电喷雾离子化(ESI)技术和大气压电化学离子化(APCI)技术［5］。液相色谱-质谱联用仪主要由液相色谱系统和质谱系统两部分组成，样品由液相系统进入，经色谱柱分离，被分离的组分依次进入质谱系统，在离子源中离子化，离子聚焦于质量分析器中，根据质荷比而分离，分离后的离子信号转化为电信号，传递至计算机数据处理系统，根据质谱峰的强度和位置对样品的成分和结构进行分析［6］。

2 在水产品兽药残留检测中的应用

2.1 样品前处理方法的改进

水产品基质较为复杂，含有较多的蛋白质、脂肪等物质，容易对目标化合物的检测产生干扰。液相色谱法对样品前处理的净化要求较高，如果净化效果不好会干扰目标物的定性和定量，甚至导致目标物被基质掩盖而无法检测。液相色谱-质谱联用技术的多反应监测模式(MRM)具有显著提高检测灵敏度、选择性，以及抑制基质干扰的特点［7］，与液相方法相比，样品前处理得到了很大改进，样品处理过程更加简单。梅光明等［8］建立的水产品中喹乙醇代谢物残留量的超高效液相色谱-质谱联用测定方法，样品只需经乙酸乙酯提取、液-液萃取净化、吹干，流动相定容，即可检测。郑香平等［9］在孔雀石绿和结晶紫等前处理中，提取样品时加入酸性氧化铝，可以有效去除油脂，省去了氧化铝小柱脱脂和丙磺酸小柱的净化步骤，缩短了样品前处理时间。李小玲等［10］建立的测定诺氟沙星、环丙沙星与恩诺沙星药物残留的高效液相色谱-串联质谱方法，样品经乙腈提取，正己烷脱脂，旋转蒸发浓缩，即可进行定性和定量分析。液相方法测定红霉素残留的前处理大多采用提取、固相萃取、浓缩等处理步骤，不但成本高，而且时间较长。于慧娟等［11］等研究了氯化钠净化和正己烷净化的液-固萃取和液-液萃取相结合的净化方法，可以有效去除乙腈提取液中的部分蛋白质，大部分脂溶性杂质及对虾、河蟹样品中的各种色素处理过程简单、快速。传统方法检测水产品中氯霉素类药物，需要进行衍生化，操作复杂，准确度低，梅光明等［12］采用超高效液相色谱-电喷雾串联质谱仪，无需衍生化，样品经乙酸乙酯提取，正己烷脱脂净化，流动相溶解定容即可检测，检测结果表明该方法适用于水产品中氯霉素类药物残留的快速检测。

QuEChERS方法是近年来发展起来的一种新型药物多残留样品前处理方法［13］，因其具有快速(quick)、简单(easy)、廉价(cheap)、有效(effective)、可靠(rugged)和安全(safe)的特点而得名。QuEChERS处理过程包括3个步骤［14］：（1）样品用有机溶剂萃取，同时加入盐以促使溶剂与水相分离；（2）混合体系经过振摇和离心后，取部分有机相与吸附剂混合，利用分散固相萃取进一步净化；（3）混合物离心后所得上清液被直接用于分析测定。QuEChERS方法虽然面世不久，但已经被广泛采纳且应用于农产品和食品检测中［15-16］，在水产品检测方面已有不少相关报道。Molina等［17］采用QuEChERS、液相与飞行时间质谱(LC-TOF-MS)联用的方法分析虾中的13种常用抗生素和兽药，该法能很好地排除基质干扰，回收率为58%～133%。Dong等［18］研究了QuEChERS方法在水产样品前处理中的应用，其通过减少样品量达到较好的净化效果，并取得了较好的回收率。罗辉泰等［19］将QuEChERS法应用于鱼肉的药物多残留分析，通过优化样品预处理方法及色谱-质谱测定条件，建立了一次提取同时测定鱼肉中激素及氯霉素类共30种药物残留的方法。卜明楠等［20］采用QuEChERS前处理方法，结合液相色谱串联质谱技术，建立了可以同时测定虾肉中72种兽药残留的方法，通过添加回收试验验证，该法可满足检测要求。

2.2 多兽药残留组分同时分析

水产养殖过程中使用的兽药越来越呈现出多样化、复杂化，兽药残留的检测需求也从以前的单一品种测定发展到现在多种兽药残留同时检测。液相色谱-质谱联用法因其具有良好的适用性，可同时定性、定量、高灵敏度及分析时间短的特点，已成为多种兽药残留检测的主要方法。王志杰等［21］采用多反应监测正离子模式，同时对水产品中的15种喹诺酮类药物进行定性和定量测定，方法简便快捷，平均回收率为66%～121%。曹军等［22］采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱联用法 测定水产品中19种喹诺酮类兽药残留，3个添加水平中，小龙虾样品加标回收率为70.5%～112.6%，鮰鱼样品加标回收率为70.2%～113.8%。黄德凤等［23］针对水产品中磺胺类药物的多残留问题而建立的同时测定水产品中19种磺胺类药物残留的高效液相色谱-串联质谱法方法，通过梯度洗脱，将具有相同定性离子的磺胺良好分离，方法简便、快速，回收率为80%～105%，适用于批量样品的检测。李向军等［24］建立的同时测定24种性激素的高效液相色谱-串联质谱法，实现了3类性激素的同时定量及定性确证分析。

各类兽药的理化性质差异较大，水产品中兽药残留检测主要以分类检测为主，一次测定仅仅局限于同一类别药物，存在检测周期长、成本高、效率低等弊端。实现同时测定不仅节省了时间，提高了效率，减少了有机溶剂的用量，降低了对环境的污染，还在一定程度上实现了药物残留的快速检测，为水产品质量安全的监管和确保消费者安全提供了重要支撑。对此国内学者也做了大量的研究和应用工作。刘正才等［25］建立的同时测定鳗鱼中15种磺胺、3种喹诺酮类以及4种四环素族抗生素残留的超高效液相色谱-串联质谱方法，5，10，20 μg/kg三个添加水平的平均回收率为72.4%～97.3%。万译文等［26］建立的水产品中12种喹诺酮类和磺胺类药物残留量同时测定的方法，其检出限为1.0 μg/kg，定量限为2.0 μg/kg，回收率达到69.5%～121.9%，具有较高的重现性和选择性。王志杰等［27］建立的鳗鱼和虾中33种喹诺酮类和磺胺类药物残留量的高效液相色谱-串联质谱测定方法，目标化合物的峰强度与质量浓度的线性关系良好(r＞0.99)，平均回收率为66%～123%。罗辉泰等［28］建立的高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中四环素类、喹诺酮类、磺胺类、磺胺增效剂和三苯甲烷类共5大类33种药物残留的方法，目标药物在相应的浓度范围内线性良好，相关系数均大于0.99，在3个不同浓度添加水平下，平均回收率为63.6%～115.2%。郭萌萌等［29］采用多选择反应监测模式、正负离子切换扫描方式下对氯霉素类、三苯甲烷类染料、磺胺类、氟喹诺酮类和四环素类5类共23种渔用药物残留进行定性和定量分析，目标化合物可在12 min内实现良好分离，平均添加回收率为50.4%～118.5%。李仲超［30］运用液相色谱-质谱技术建立的可同时测定水产品(鱼、虾和贝)中78种兽药的方法，目标兽药在0.1～100 μg/kg范围内线性良好，4 μg/kg和20 μg/kg两个加标量条件下鱼、虾、贝肉的加标回收率分别为40.8%～125.6%，42.9%～131.9%和43.5%～136.4%，方法检测限为0.1～0.5 μg/kg。

3 展望

农产品质量安全问题屡屡出现，农产品的分析检测已成为研究的重点和关注的焦点。液相色谱-质谱联用技术虽然已经被广泛应用到农产品检测领域，但由于农产品基质成分复杂、无法建立通用的前处理方法依然是面临的主要问题，充分利用现有技术建立简单、低成本、环保、可靠的分析方法是农产品检测的主要发展方向。随着联用技术的日渐成熟，液相色谱-质谱联用法在农产品检测分析方面将会发挥重要的作用。

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《宇航计测技术》简介

宇航计测技术》创刊于1981年，是国家科委批准的国家级技术性刊物。《宇航计测技术》曾荣获国家、北京市和航天系统优秀科技期刊奖；为我国首批中文核心期刊、计量核心期刊和国家统计用刊；目前，本刊已成为《中国学术期刊》（光盘版），《中国导弹与航天文摘》(CAMA)与《中国期刊网》全文收录用刊。

中国标准刊号为ISSN1000-7202/CN11-2052/V，全国各地邮局均可订阅,邮发代号为18-123。

广告经营许可证：京丰工商广字第0013号。

主编：孙海燕电话：010-88528714通信地址：北京市142信箱408分箱邮编：100039

《宇航计测技术》2015年第4期目次

一种固定式多齿分度台校准装置的自动控制系统

光电跟踪瞄准系统的多光轴平行度校准方法研究

导弹侵切角测量方法研究

国产工业摄影测量相机精度测评

光学坐标测量机的搭建与实现

电子称防作弊方法和监管系统的研究

无介质硅压阻式压力/压差传感器的研制

变PID参数控制在电动齿轮燃油泵中的应用

一种螺栓拉伸器校准方法研究

基于火箭测量系统的无线传感器网络技术研究

基于磁滞电机的无人机舵回路设计

RNSS/INS深耦合高动态导航接收机测试方法研究

M-FSVM在可靠性寿命分布模式识别中的应用

应变测量仪自动校准系统设计

一种基于FPGA单芯片的IRIG-B时间编码技术及其实现

遥测中间装置模拟量变换器故障诊断方法

基于量化控制的校准/检测实验室质量管理及实践

对JJG52-2013在使用中的问题探讨

Applications of LC-MS Technology in Drug Residues Detection of Aquatic Product

Chen Jingdu, Wu Hongjun, Cheng Qiang, Wang Longgen, Zang Sujuan
(Yangzhou City of Agricultural Products Quality Supervision and Inspection Center， Yangzhou 225101， China)

The liquid chromatography-mass spectrometry was becoming important method for the detection of drug residues in aquatic products. The application and progress of liquid chromatography-mass spectrometry technology in the detection of drug residues in aquatic products were discussed from principle, improvement of sample preparation, new methods and multi-veterinary drug residue analysis.

aquatic product; veterinary drug residue; determination; high performance liquid chromatography-mass spectrometry

O657.6

：A

：1008-6145(2015)05-0105-03

10.3969/j.issn.1008-6145.2015.05.029

联系人：陈京都；E-mail：chenjingdu1985@163.com

2015-06-28