云南乌金猪与约大乌猪低氧适应性的研究

李美荃，张春勇，安清聪，潘洪彬，陈克嶙，郭荣富

(云南农业大学动物科学技术学院，云南省动物营养与饲料重点实验室，昆明 650201)

云南乌金猪与约大乌猪低氧适应性的研究

李美荃，张春勇，安清聪，潘洪彬，陈克嶙，郭荣富*

(云南农业大学动物科学技术学院，云南省动物营养与饲料重点实验室，昆明 650201)

旨在探明云南高原乌金猪与约大乌猪低氧适应差异。采集60日龄乌金猪与约大乌猪各30头(公母各半)血样，检测乌金猪和约大乌猪血液血红蛋白含量(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞数目(RBC)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)和氧饱和度生理表征参数。屠宰60日龄乌金猪与约大乌猪各12头(公母各半)，采用Real-time PCR方法检测心、肝、肺、肾、空肠、回肠、十二指肠、皮肤、肌肉、胰腺、睾丸或卵巢12种组织中HIF-1α、VEGF、EPO基因的表达。结果显示，乌金猪HGB和RBC极显著(P<0.01)高于约大乌猪，而HCT和MCH低于约大乌猪，乌金猪氧饱和度高于约大乌猪，但差异不显著 (P>0.05)。在乌金猪与约大乌猪的各个组织中均检测到HIF-1α、VEGF、EPO基因mRNA的表达；在低氧适应基因中，HIF-1α基因在肝、肺、胰腺、肾和皮肤组织表达量最高，VEGF基因在肝、肺和胰腺表达量最高，EPO基因在肾和肝表达量最高；HIF-1α、VEGF、EPO基因在两猪种中的表达量趋势一致，约大乌猪组织中的总体表达量高于乌金猪的表达量；母猪低氧适应基因的总体表达量显著高于公猪。乌金猪低氧适应生理表征参数明显高于约大乌猪，在多数组织约大乌猪低氧适应基因的表达高于乌金猪。但对其高原低氧适应性机制有待进一步研究。

乌金猪；约大乌猪；HIF-1α；VEGF；EPO；基因表达

高海拔低氧是高原猪种生存与种属繁衍的重要生态环境，高原本地猪种与培育猪种相比，其贮脂能力强，肌肉中亚油酸、亚麻油酸和花生油酸含量高，肉质好，其耐粗饲、抗病力和抗氧化能力更强，但生长速度缓慢、繁殖率低。高原猪种是高原民族重要的动物蛋白质来源之一，是发展高原养猪业的珍稀种质资源。高原猪种长期生活在高原低氧生态环境条件下，形成了独特的生物学和遗传特性，表现出更强的抗逆性。本地猪种和培育猪种对高原环境的适应性表现出明显差异性，这可能与高原猪种低氧适应基因密切相关。因此，研究不同猪种高原低氧适应基因表达和作用，对开发和利用高原猪种具有重要参考价值。

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF) 和促红细胞生成素(EPO)是哺乳动物重要的低氧适应基因。G.L.Semenza等首次发现了一种能特异性地结合于EPO的低氧反应元件上的蛋白，称之为HIF-1α[1]。HIF-1是由α和β两个亚基形成的异二聚体，其中HIF-1α蛋白是在低氧调节中起主要功能的亚基，对氧敏感，而HIF-1β蛋白对氧不敏感，因此HIF-1的活性主要取决于α亚基的活性[2-4]。HIF-1通过调节多种低氧反应基因的表达，调节糖与能量代谢，影响新血管的生成，细胞的发育、增殖与凋亡，铁代谢，糖酵解等过程[5-6]。I.Mylonis等报道，低氧条件下，HIF-1还可以通过介导刺激Lipin1的表达，来促进甘油三脂的积累[7]。M.Parsanejad等报道，DJ-1可调控VHL/HIF-1信号传导通路[8]。E.M.De Francesco等报道，GPER通过雌激素介导激活HIF-1α/VEGF信号通路[9]。VEGF和EPO是低氧诱导因子的靶基因，VEGF是细胞因子的一种，能促进内皮细胞的增殖，广泛存在于动物组织中具有高度特异的血管内皮细胞有丝分裂时期[10-11]，EPO对机体红细胞的生成起着重要的调控作用，主要作用于骨髓造血细胞[12]。D.A.Vesey等通过体外试验证实，高浓度的EPO(400 U·mL-1)可以刺激低氧条件下的合成和细胞增殖，抑制细胞凋亡[13]。高原低氧环境显著影响血液中的血红蛋白(HGB)和红细胞数(RBC)。T.H.Jessen等报道，安第斯雁(Andeangoose)生活在南美海拔5 000～6 000 m高原，其血红蛋白也显示高的血氧亲和力[14]。血红蛋白与低氧环境密切相关，其含量变化直接影响低氧适应基因的表达。D.Yoon报道，HIFs在调控铁代谢与红细胞生成中起了重要的作用[15]。

乌金猪属于高原放牧性猪种，主要分布在云南、贵州、四川 3省接壤的乌蒙山和大、小凉山地区，已形成不同类群，主要有贵州省的柯乐猪，云南富源的大河猪，昭通市的昭通猪和四川省的凉山猪，均属西南型猪种。乌金猪耐粗饲，优质健壮，适应高原低氧生态环境，但生长速度慢、脂肪沉积高、瘦肉率低。而约大乌猪属于新培育杂交猪种，含有25%乌金猪血缘。本地乌金猪日增重约250 g，瘦肉率约45%；而约大乌猪日增重约800 g，瘦肉率57%以上，杂交改良明显提高了杂交猪种的瘦肉率和生长速度。藏猪也是高原猪种，长期生长于高原环境具有较强低氧适应能力，刘金凤等报道，藏猪EPO基因相对于长白猪出现多个位点突变，推断藏猪可能是由于长期缺氧环境导致基因突变[16]。高原低氧是影响高原猪种健康和遗传生长潜力的重要生态因素，云南乌金猪具有较强的适应性和抗逆性，而具有本地乌金猪血缘的约大乌猪具有较好的生长速度和瘦肉率，在云南独特的生态条件下，乌金猪与约大乌猪的健康和生产性能存在明显差异，这可能与高原低氧适应基因表达和作用密切相关。本试验以乌金猪和约大乌猪为研究对象，检测高原低氧血液生理表征参数，采用实时荧光定量法研究约大乌猪与乌金猪不同组织中HIF-1α、VEGF、EPO基因的差异性表达，探讨乌金猪与约大乌猪高原低氧适应基因之间的差异。

1 材料与方法

1.1 血样和组织样品采集

本试验中乌金猪来自云南省富源县大河镇的大河猪场，海拔2 610 m，42日龄断奶，与培育的约大乌猪在相同日粮类型和饲养管理下饲养至60日龄，选择乌金猪(12.63±0.82)kg和约大乌猪(18.92±0.69)kg各30头(1/2♂，1/2♀)，采用Pulse Oximeter Model 300，经猪耳缘测定氧饱和度(Beijing Choice Electronic Technology Co.，Ltd.)，空腹12 h，经前腔静脉采血10 mL，使用肝素抗凝管获得全血，非肝素抗凝管用于分离血清(3 000 r·min-1)，血常规采用BC-1800全自动血液细胞分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)进行测定，采用试剂盒(南京建成公司)测定HGB、HCT、RBC、MCH和MCHC参数。随后从已采血的乌金猪与约大乌猪中随机各选取12头(6♂，6♀)屠宰，共24头，收集心、肝、肺、肾、十二指肠、空肠、回肠、皮肤、肌肉、胰腺、睾丸或卵巢12种组织，剔除脂肪组织，迅速剪碎，液氮速冻，-80 ℃保存。

1.2 总RNA提取

各组织总RNA提取按照RNA simple Total RNA Kit(北京天根)试剂盒说明书进行，每50～100 mg 组织加1 mL裂解液。各组织经过研磨粉碎匀浆后，加入氯仿萃取。最后得到的总RNA溶解于超纯水中，总RNA的纯度与浓度分别用分光光度计在260与280 nm下检测。

1.3 反转录

采用相同浓度的总RNA样品按反转录试剂盒(TaKaRa)说明书要求配制RT反应液。用于实时荧光定量的RT产物(cDNA)于-20 ℃保存。

1.4 实时荧光定量PCR

上述cDNA用于实时荧光定量PCR相关基因根据GenBank上猪的HIF-1α、VEGF、EPO以及GAPDH、18S、β-actin序列，采用Primer Express Software设计引物。引物由生工生物公司合成(表1)。采用Eva GreenⅠ染料法，反应在Bio-Rad CFX96TMReal-Time PCR Systems上进行。反应体系为20 μL：SsoFastTM EvaGREEN®Supermix 10 μL(BIO-RAD，美国)，上下游引物(10 μmol·L-1)各1.0 μL，cDNA模板2.0 μL，加灭菌去离子水至20 μL。样品分装于96孔板(BIO-RAD)中，透光盖(BIO-RAD)盖紧。HIF-1α反应条件：95 ℃ 10 s；95 ℃ 5 s，57 ℃ 20 s，72 ℃ 15 s，40个循环。VEGF与HIF-1α反应条件相同。EPO反应条件：95 ℃ 10 s；95 ℃ 5 s，55 ℃ 20 s，72 ℃ 15 s，40个循环。

表1 RT-qPCR引物信息

Table 1 Information of primers used for RT-qPCR

基因Gene引物(5'→3')Primersequence引物长度/bpLength产物长度/bpProductlengthGenBank登录号GenBankaccessionNo.HIF-1αF-TAGAACATGATGGGTCACR-ACAGGCTAAGTCAGAGGG1818176EF070345VEGFF-GCTACTGCCGTCCAATCR-CACACTCCAGACCTTCG1717135AF318502EPOF-TGCTTCTGCTGTCCTTGCR-GCCCATCGTGGCATTTTCG1819134NM_214134GAPDHF-ACATCAAGAAGGTGGTGAAGR-ATTGTCGTACCAGGAAATGAG2020179NM_001206359.1β-actinF-TCTGGCACCACACCTTCTR-TGATCTGGGTCATCTTCTCAC1821114XM_003124280.218SF-GAGCGAAAGCATTTGCCAAGR-GGCATCGTTTATGGTCGGAAC2021101AY265350

1.5 数据分析

所有组织低氧适应基因的表达量均是以GAPDH、18S、β-actin为内参基因，最终以相对表达量来表示，相对荧光定量计算方法采用M.W.Pfaffl[17]的方法。所有数据均采用Excel进行整理，利用SPSS 17.0统计软件进行统计处理，对乌金猪和约大乌猪生理表征参数测定结果采用t检验，结果用”平均数±标准差”表示，各组织间的基因表达采用Duncan法进行多重比较；两品种间的统计采用DYES进行处理。

2 结 果

2.1 总RNA的提取

由图1可知，本研究所提取RNA的28S条带的亮度大于18S，5S条带很淡，表明RNA完整性好，无明显降解。经分光光度计检测，所提取RNA的A260 nm/A280 nm为 1.8～2.0，可用于后续研究(图1)。

2.2 相关基因的实时荧光定量PCR检测

图2为HIF-1α、VEGF、EPO荧光定量PCR产物2%琼脂糖凝胶电泳图，图3为HIF-1α、VEGF和EPOcDNA通过实时荧光定量所得熔解曲线。如图3所示熔解曲线为单一峰，无非特异性扩增。

图1 总RNA提取电泳图Fig.1 Agarose gel electrophoresis result of total RNA

1.HIF-1α；2.VEGF；3.EPO图2 琼脂糖凝胶电泳检测HIF-1α、VEGF、EPOFig.2 Agarose gel of the HIF-1α，VEGF and EPO

图3 实时定量PCR反应产物熔解曲线HIF-1α(a)、VEGF(b)、EPO(c)、GAPDH(d)Fig.3 Melting curve analysis for HIF-1α(a)，VEGF(b)，EPO(c)，GAPDH(d)

2.3 血液生理表征参数测定结果

乌金猪与约大乌猪的HGB、HCT、RBC、MCH、MCHC、氧饱和度检测结果如表2所示，乌金猪血液HGB和RBC极显著高于约大乌猪(P<0.01)，HCT、MCH、MCHC和氧饱和度两猪种间差异不显著(P>0.05)。

表2 乌金猪与约大乌猪血液生理表征参数测定结果

Table 2 The results of blood physiological parameters measurement

类别Class约大乌猪Yuedawupig乌金猪Wujinpig血红蛋白含量/(g·L-1)HGB117.500±6.868**128.530±8.047红细胞数目/(1012·L-1)RBC7.199±0.627**7.903±0.502红细胞压积/(L·L-1)HCT0.461±0.0290.424±0.033平均血红蛋白含量/pgMCH16.290±1.06616.040±0.788平均血红蛋白浓度/(g·L-1)MCHC277.600±11.150278.750±10.208氧饱和度/(vol·dL-1)Oxygensaturation91.950±3.26893.950±4.006

**.P<0.01

2.4 不同猪种间HIF-1α、VEGF、EPOmRNA的差异表达

HIF-1α、VEGF、EPOmRNA基因在乌金猪与约大乌猪间的差异表达趋势如图4所示。空肠、回肠、肌肉、睾丸、卵巢中HIF-1α 表达量乌金猪高于约大乌猪，十二指肠、睾丸和空肠中VEGF表达量乌金猪高于约大乌猪，EPOmRNA的表达各组织均为约大乌猪高于乌金猪。

乌金猪与约大乌猪各个组织中均用实时荧光定量检测到HIF-1α mRNA的存在(图4a)。在约大乌猪各组织中，HIF-1α 在肝、肺、胰腺表达最高，而肌肉与回肠表达最低。乌金猪与约大乌猪的表达趋势一致。乌金猪与约大乌猪各个组织中均用实时荧光定量检测到VEGFmRNA的存在(图4b)。在约大乌猪各组织中，VEGF在肝、肺、胰腺表达最高，而肌肉与回肠表达最低。乌金猪与约大乌猪的表达趋势一致。乌金猪与约大乌猪各个组织中均用实时荧光定量检测到EPOmRNA的存在(图4c)。在约大乌猪各组织中，EPOmRNA表达量最高的是肾和肝，表达量最低的是十二指肠和肌肉。乌金猪与约大乌猪的表达趋势一致。可以明显的看出EPO在十二指肠中几乎无表达。

2.5 公猪与母猪之间HIF-1α、VEGF、EPOmRNA的差异表达

HIF-1α、VEGF、EPOmRNA基因在乌金猪与约大乌猪的公、母猪的差异表达趋势如图5所示。低氧适应基因在约大乌猪的总体表达量要显著高于乌金猪(P<0.05)，母猪低氧适应基因平均表达量高于公猪。除乌金猪VEGF差异显著(P<0.05)外，其他均差异极显著(P<0.01)。

3 讨 论

在高原低氧生态条件下，围绕本地乌金猪与培育猪种约大乌猪的低氧适应性，本研究检测了乌金猪与约大乌猪血液生理表征参数、不同组织HIF-1α、VEGF、EPO基因表达量，研究结果表明，血液生理表征参数和低氧适应基因表达与低氧适应能力之间密切相关，其机制有待进一步研究。

3.1 高原低氧环境猪种血液生理表征参数的变化

血红蛋白作为氧的载体，其含量与血氧亲和力一直是高原动物耐受低氧环境的研究热点。据报道，高海拔地区动物血红蛋白含量明显高于低海拔地区，苟潇报道，高原安第斯鸡从4 000 m运到海平面饲养两代，结果发现血氧亲和力降低[18]，证实了高海拔地区动物独特的血红蛋白机制。而强巴央宗等研究报道藏猪的RBC、HGB和HCT指标低于高海拔饲养的长白猪，说明藏猪对高原低氧反应不敏感，低氧适应性强[19]。 本研究发现，乌金猪的血液生理表征参数HGB和RBC极显著高于约大乌猪，而HCT、MCH低于约大乌猪，氧饱和度高于约大乌猪，但差异不显著。乌金猪长期生活在云南高海拔地区，已形成适应低氧独特且稳定的血红蛋白机制，而约大乌猪为新培育品种，其HGB、RBC和氧饱和度低于乌金猪。本研究发现，乌金猪和约大乌猪血液生理表征参数存在明显差异，结果提示，低氧生理表征参数变化与低氧适应能力有关。

3.2 乌金猪与约大乌猪不同组织中低氧适应基因表达的特异性

本研究检测了肝、肾、肺、胰腺、心、肌肉、皮肤、睾丸、卵巢、十二指肠、空肠和回肠12种组织HIF-1α、VEGF、EPO基因表达量，结果表明，乌金猪与约大乌猪不同组织低氧适应基因表达谱存在明显差异，结果显示与高原低氧适应性密切相关。

*.P<0.05；**.P<0.01.The same as below图4 约大乌猪与乌金猪HIF-1α(a)、VEGF(b)和EPO(c)基因在各组织的表达Fig.4 Relative gene expression of HIF-1α(a)，VEGF(b) and EPO(c) in tissues in Yuedawu pigs and Wujin pigs

图5 约大乌猪与乌金猪的公、母猪HIF-1α(a)、VEGF(b)和EPO(c)基因的平均表达量Fig.5 Relative gene expression of HIF-1α(a)，VEGF(b) and EPO(c) in tissues of female and male in Yuedawu pigs and Wujin pigs

肝HIF-1α和VEGF基因表达最高，而EPO表达也相对较高，这表明肝与低氧适应基因密切相关。赵同标等采用Northem杂交技术，检测了HIF-1αmRNA在高原鼠兔多种组织中均有表达，其中脑的表达量最高，其次为肾，而心、脾和肝的表达相对较低[20]。这与本试验的结果不完全一致，可能是与高原低氧特殊的生态环境及不同动物，猪种健康状况相关。L.Tacchini等体外试验证实，肝内肝细胞生长因子能激活 HIF-1α基因[21]。S.Anavi等报道，常氧环境下，肝内的胆固醇可激活HIF信号通路[22]。云南本地猪与培育猪种长期处于高原低氧生态环境中，低氧应激可能使猪的肝发生适应变化，从而诱导肝低氧适应基因表达升高，这一推测有待研究证实。

在肺中，HIF-1α和VEGF基因表达相对较高，与其他组织相比差异极显著。血红蛋白是从肺携带氧经由动脉血运送给机体各组织，而氧气的供应及血红蛋白运输氧气的能力与低氧适应基因直接相关，这与苟潇研究的藏鸡胚胎低氧适应的血红蛋白分子机制是相一致的[18]。Y.Liang等与A.Abbasi等的研究也证实了高原鸟类血红蛋白有高的血氧亲和力[23-24]。胰腺内胰岛分泌胰岛素，调节糖代谢。邹多宏等报道，HIF-1α可激活的下游因子包括一些糖代谢相关酶，糖酵解酶等[25]。低氧条件下，上调CD147是通过HIF-1α与Sp1共同加速糖酵解及肿瘤的进程达到的[26]。本研究发现，低氧适应基因在胰腺中表达很高，目前未见相关报道，对低氧适应基因在胰腺中的高表达及其作用机制值得研究。

在肾中，HIF-1α和VEGF均有表达，而EPO表达最高，与其他组织相比差异极显著，这与E.D.Zanjani等研究结果一致[27]。肾对氧供给和氧张力的变化较敏感，很容易受到缺氧性损伤。相关报道也证实EPO在胎儿时期由肝分泌，成体主要由肾分泌。EPO是调节红细胞生成的多肽类激素，在氧气稀薄的高原，EPO可以通过促进红细胞生成缓解因所吸入空气氧浓度低而导致的慢性缺氧损伤。N.S.Patel等报道，在缺血再灌注损伤时，每日给予EPO治疗，可保护肾[28]。 在皮肤中，乌金猪和约大乌猪HIF-1α基因表达相对较高，推测可能有利于猪增强皮肤表面低氧适应能力。小肠不仅是动物饲料养分消化吸收和代谢的主要场所，也是机体重要的低氧适应器官。本研究表明，低氧适应基因在十二指肠、空肠和回肠中表达量有一定的差异。关于高原猪种肠道组织与低氧适应基因及其养分消化吸收之间的关系仍需研究。

本研究显示，低氧适应基因在肌肉和心等器官中表达相对较低。但心是高原猪种和高原低氧适应基因的重要器官，心与氧气含量及血红蛋白数量密切相关，推测其与低氧适应基因也有一定关系，需进一步研究。

3.3 低氧适应基因对猪品种与性别的表达差异

在高原低氧环境条件下，猪品种和性别是影响低氧适应基因表达的重要因素，从而可能改变猪的低氧适应能力和生产性能。

本研究表明，约大乌猪有9个组织HIF-1α和VEGF基因表达高于乌金猪，而全部组织的EPO基因表达均为约大乌猪高于乌金猪。由此推测，由于乌金猪长期生长于高原地区可能已具有稳定的低氧环境适应的遗传基础。约大乌猪是新培育的含乌金猪血缘的生产猪种，推测是由于机体尚未形成稳定的低氧适应机制，所以在高原低氧环境下通过上调低氧适应基因的表达来适应低氧环境。本试验结果显示，利用现代遗传育种理论和技术，经过多代选育而成的具有本地乌金猪血缘的约大乌猪不仅提高了生长速度和瘦肉率，其低氧适应性也发生了显著变化，结果与猪的低氧适应能力密切相关。

本研究结果显示，HIF-1α、VEGF、EPO基因在约大乌猪与乌金猪的各个组织中均是母猪明显高于公猪。提示，在云南高原低氧的情况下，由于母猪的生产繁殖特性相对于公猪较为复杂，母猪的低氧应激反应可能大于公猪，母猪相对于公猪更容易受到高原低氧的应激。因此，高原低氧环境应激与母猪特有繁殖生理及其低氧适应性可能形成新的研究领域。

4 结 论

综上，在云南高原低氧的复杂生态环境中，乌金猪低氧适应生理表征参数明显高于约大乌猪；多数组织约大乌猪低氧适应基因的表达量高于乌金猪，低氧适应基因在约大乌猪与乌金猪的表达具有组织差异性与品种特异性；母猪低氧适应基因的表达量明显高于公猪。低氧适应基因表达差异与猪低氧适应能力之间的内在联系有待进一步研究。

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(编辑 郭云雁)

The Study of Hypoxia Adaptive Differences of Yunnan Wujin and Yuedawu Pigs

LI Mei-quan，ZHANG Chun-yong，AN Qing-cong，PAN Hong-bin，CHEN Ke-lin，GUO Rong-fu*

(KeyLaboratoryofAnimalNutritionandFeedScienceofYunnanProvince，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China)

This study aimed to ascertain the differences of hypoxia adaptation between Yunnan plateau Wujin pig and Yuedawu pig.Blood samples of 30 Wujin pigs and 30 Yuedawu pigs were collected(Half male and female)on 60 days.The blood HGB，HCT，RBC，MCH，MCHC and oxygen saturation were determined.The gene expressions ofHIF-1α ，VEGFandEPOwere determined by real-time PCR in heart，liver，lung，kidney，jejunum，ileum，duodenum，skin，muscle，pancreas，testes and ovaries of Yuedawu and Wujin pigs(half male and female).The results showed that HGB and RBC of Wujin pigs was significant higher than that of Yuedawu pigs(P<0.01)，and hematocrit (HCT) and MCH was lower than Yuedawu pigs.Oxygen saturation of Wujin pigs was higher than that of Yuedawu pigs，without significant differences(P>0.05).HIF-1α，VEGF，EPOmRNA were detected in various tissues of Yuedawu and Wujin pigs.The gene expressions ofHIF-1α，VEGFandEPOin most tissues of Yuedawu pigs were higher than that in Wujin pigs，and main expression tissues forHIF-1α andVEGFwere liver，lungs and pancreas in 2 pig breeds，whereasEPOwas mainly expressed in kidney and liver，the trends ofHIF-1α，VEGFandEPOgenes expression in 2 pig breeds is consistent.In 2 pig breeds，the hypoxia adaptation gene expressions of sows were significantly higher than that of boar.The HGB，RBC and oxygen saturation of Wujin pigs was significantly higher than that of Yuedawu pigs.Physiological characterization parameters of hypoxia adaptation of Wujin pig were significantly higher than Yuedawu pig.Hypoxia adaptation gene expression in most tissues of Yuedawu pig were higher than that in Wujin pig.But the mechanisms of hypoxia adaptation need to be researched in the further.

Wujin pigs；Yuedawu pigs；HIF-1α；VEGF；EPO；gene expression

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.06.012

2014-07-28

云南省重大科技专项项目(2012ZA018)；云南现代农业生猪产业技术体系(A3007381)

李美荃(1986-)，女，黑龙江哈尔滨人，博士生，主要从事猪抗病营养的分子基础研究，E-mail：limeiquan2010@163.com；张春勇(1975-)，男，硕士，讲师，主要从事猪抗病营养的分子基础研究。二者并列为第一作者

*通信作者：郭荣富，博士，教授，博导，E-mail：rongfug@163.com

S828；S813.3

A

0366-6964(2015)06-0965-09