微柱凝胶法检出AxB亚型1例报告

姚文娟，周 军，陈 琪

（湖北医药学院附属人民医院输血科，湖北十堰442000）

·个案与短篇·

微柱凝胶法检出AxB亚型1例报告

姚文娟，周 军△，陈 琪

（湖北医药学院附属人民医院输血科，湖北十堰442000）

白血病患者入院输血，交叉配血时复查血型，鉴定血型时正反定型不符，为确保输血安全准确鉴定血型，运用了血型血清学与分子生物学检测方法进行鉴定，结果为AxB亚型所致，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 患者来院 本院住院患者。

1.2 仪器与试剂 BaSo2005－1离心机、FYQ免疫微柱孵育机、血型血清学用离心机TD－3A。实验所用人源性抗－A血清、抗－B、抗－AB、抗－H血清以及抗人球蛋白试剂均由上海市血液中心生产；ABO、RHD血型定型检测卡（单克隆抗体）交叉配血卡等微柱凝胶卡和不规则抗体筛选细胞由长春博讯生物技术有限公司提供；反定型用A型红细胞（Ae）、B型红细胞（Be）、0型红细胞（Oe）、自身红细胞（ze）和均由本实验室自制。

1.3 方法

1.3.1 血型血清学试验方法 首先排除人为因素，重新采集血液样本鉴定血型，采用试管法和微柱凝胶卡法常规检测ABO血型和不规则抗体，并进一步做吸收放散试验；在此期间严格核对试剂有效期、离心机转速、时间和离心力，检查其他器材有无污染，严格按照操作规程和注意事项［2］进行操作。

1.3.2 分子生物学实验 送往上海血液中心检测。

2 结 果

2.1 微柱凝胶卡法血型鉴定 正定型为B型，反定型为AB型。由于患者属白血病患者，应考虑会影响到红细胞凝集的因素，因此在做微柱凝胶卡法血型鉴定前，先利用0.9%生理盐水将该患者EDTA抗凝红细胞洗4次，配置成0.8%的红细胞悬液，再进行试验。ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）正反定型结果不一致，不能直接确定血型。由于所有试验严格按照操作规程进行，排除了试剂和人为操作因素，结果可信，该患者血型无法鉴定。由于我科试剂有限，重新采集标本送市中心血站检测，见表2～4（见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”）。

2.2 交叉配血试验结果 同时取3份B型献血员血样和该患者血样进行交叉配血试验，结果显示主侧不凝集次侧弱凝集；分别与3个O型献血员血样做交叉配血试验次侧均呈强凝集现象；另取3人份AB型献血员血样做交叉配血试验，主次侧均不凝集，患者血样自身对照无凝集，抗体筛查及直接抗球蛋白试验均呈阴性。由此判断该患者血型非B型，有可能血型为：（1）AB型（A抗原减弱）；（2）AxB亚型。

2.3 分子生物学结果 通过把该标本送往上海血液中心，抽取标本白膜层进行分子生物学测序证实确实存在A基因。进一步证实为AxB亚型。

3 讨 论

临床输血安全的保障依赖着ABO血型鉴定的准确性，血型鉴定一旦出现差错，将严重威胁患者的生命安全［3］。当发现血型正反定型结果不一致时，笔者第一时间查找原因，在排除人为操作及试剂因素后，结合临床以及辅助血清学试验做进一步鉴定。

患者本人为粒细胞性白血患者，易导致弱抗原或抗原缺失。查阅相关资料证明粒细胞性白血病时由于H转移酶缺乏或合成受抑制，使血型抗原减弱。患者血型正反定型结果不一致可能因为血型抗原减弱引起［4］，但不能排除亚型的可能。

ABO血型亚型又称ABO变异型，经血型血清学检查试验，显示正反定型不符以及抗原性减弱为主要特征的多种表现型。此患者常规血型鉴定ABO血型正定为B型，反定型为AB型，而在交叉配血时发现该患者与多个B型献血员配血次侧弱凝集；与O型血样配血试验次侧凝集；与AB型血样配血主次侧均不凝集；患者血样自身对照无凝集；抗体筛查及直接抗球蛋白试验均呈阴性。说明患者血型非B型，有可能血型为：（1）AB型（A抗原减弱），（2）AxB亚型。

本例患者血清学试验均显示B抗原正常，A抗原明显减弱或阴性而吸收放射试验论证患者红细胞上存在1＋A抗原，抗－A人源血清不发生凝集，与O型人的抗A1B发生凝集符合AxB亚型血清学特征，提示为亚型。标本送往上海血液中心进行分子生物学测序证实确实存在A基因，进一步证实为AxB亚型。AxB亚型较为罕见，在常规血型鉴定时很容易被定错血型，引起交叉配血不合，若输血科人员疏忽大意可造成严重的输血事故，因此常规ABO血型定型应该做正反定型，两种血型鉴定结果相互验证可以防止某些A、B亚型的漏检及其错误结果，使血型鉴定结果更为准确可靠，从而保证临床输血安全。对于ABO正反定型不符的疑难血型，除了做血型血清学检测外，还应进一步通过测序做分子生物学检测，两者相结合正确鉴定血型。

［1］胡丽华.临床输血学检验［M］.北京：人民卫生出版社，2012：19.

［2］范瑾，张珏.ABO血型鉴定中正反定型不一致时的分析与探讨［J］.上海医药，2013，34（17）：37－39.

［3］范瑾.输血前不规则抗体筛查的临床意义［J］.上海医药，2012，33（7）：24－25.

［4］曹奎杰，何鸣镝，刘峰，等.再障引起A型血型抗原减弱1例［J］.临床血液学杂志：输血与检验版，2007，4（4）：187－188.

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.073

C

1673－4130（2015）03－0432－02

2014－09－25）

△通讯作者，E－mail：363615397＠qq.com。