婴幼儿急性上呼吸道感染病原菌及其药物敏感性分析

李 玲

（湖北省新华医院检验科，武汉 430015）

婴幼儿急性上呼吸道感染病原菌及其药物敏感性分析

李 玲

（湖北省新华医院检验科，武汉 430015）

目的了解引起婴幼儿急性上呼吸道感染（AURI）的病原菌的分布及其药物敏感性。方法对本院住院的340例AURI患儿进行细菌分离培养及药敏试验。结果共分离出病原菌64株（18.82%），其中肺炎球菌18株（5.29%），流感嗜血杆菌14株（4.12%），金黄色葡萄球菌10株（2.94%）。此外，还分离出6株乙型溶血性链球菌，7株鲍曼不动杆菌和5株肺炎克雷伯菌。金黄色葡萄球菌中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占80%。主要病原菌的药敏试验结果表明，肺炎球菌对万古霉素、亚胺培南和头孢噻肟较敏感；流感嗜血杆菌对亚胺培南全部敏感，对第二、三代头孢、阿奇霉素、喹诺酮类也较敏感；MRSA对万古霉素、替考拉宁全部敏感，对其他大部分常见抗菌药物高度耐药。结论本地区细菌性婴幼儿AURI已经出现病原体多样、耐药性上升趋势。尽早确定病原菌及其药物敏感性是合理使用抗菌药物的关键；开展相关流行病学调查，深入研究耐药菌株的遗传学特性及其进化规律是制定有效预防措施的基础。

急性上呼吸道感染； 病原菌； 药敏试验

急性上呼吸道感染（AURI）是小儿时期的最常见疾病之一，但其病原诊断常落后于临床治疗［1］。为了解小儿急性上呼吸道感染的细菌学特点，并帮助临床医生合理选用抗菌药物，对2012年1月至12月在本院住院治疗的急性上呼吸道感染患儿进行咽部病原菌分离培养及药敏试验，并结合抗菌药物应用情况进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 自2012年1月1日至12月31日，本院儿科共收治AURI患儿509例，其中340例在治疗前取咽拭子进行细菌分离培养。该部分患儿年龄为8个月至2岁，女120例、男220例。所有患儿均主诉近日内有发热、流涕或咳嗽等症状。有18例（5.29%）就诊前2～3天在外院已使用青霉素治疗。340例患儿中，急性扁桃体炎12例、化脓性扁桃体炎3例、喉炎4例，有9例治疗6天临床症状消失而胸片示肺炎。全部病例均符合AURI诊断标准［2］。

1.2 仪器与试剂 5%绵羊血琼脂平板和5%脱纤维兔血巧克力平板（含杆菌肽300mg/L）购自广州金域医学检验中心，琼脂基础培养基及Ⅹ、Ⅴ、ⅩⅤ因子纸片购自美国Oxoid公司。

1.3 方法

1.3.1 细菌分离培养 咽拭子标本分别接种血琼脂平板和巧克力平板。将血平板放于35℃温箱培养18～24h，巧克力平板放于10%CO2温箱（35℃）培养至72h。可疑菌落涂片，Gram＇s染色并分离、鉴定。对疑似嗜血杆菌的小菌落进行“卫星”试验，阳性者为嗜血杆菌属，只在ⅩⅤ因子纸片周围生长且不发生溶血现象者为流感嗜血杆菌。

1.3.2 细菌鉴定和药敏试验 用法国梅里埃公司的ATB全自动细菌及药敏鉴定分析仪及配套试条板进行细菌鉴定及药敏试验，根据美国国立临床实验室标准化委员会（NCCLS）1997年的标准进行结果判定［3］。

2 结 果

2.1 病原菌分离培养结果 340例咽拭子标本中共分离到64株病原菌，总阳性率为18.82%，见表1。病原菌中以肺炎球菌最为多见，共18株，占病原菌总数的28.13%，在标本中的阳性率为5.29%；其次为流感嗜血杆菌14株，占病原菌总数的21.88%，阳性率为4.12%；金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌也是主要病原菌之一，并且在3例急性扁桃体炎和12例化脓性扁桃体炎中分离出的病原菌均为这两种细菌。除了上述4种呼吸道常见病原菌外，还分离到了7株鲍曼不动杆菌和5株肺炎克雷伯菌，它们占病原菌的构成比分别为10.94%和7.81%，在标本中的阳性率分别为2.06%和1.47%。上述6种主要病原菌中，有3例患儿为双重病原菌阳性。此外，还培养出卡他莫拉氏菌、绿脓杆菌、变形杆菌和森林假丝酵母各1例。另有多例甲型链球菌，因该菌一般为非致病常住菌，故未予统计。

2.2 药敏试验 对10株金黄色葡萄球菌进一步鉴定，发现其中8株耐甲氧西林，占金黄色葡萄球菌总数的80%。三类细菌对常见抗菌药物的药敏试验结果见表2，肺炎球菌对万古霉素全部敏感，对亚胺培南和三代头孢也较敏感，但出现27.8%耐青霉素菌株。MRSA对大部分类别的抗菌药物表现出高度耐药，仅对万古霉素和替考拉林全部敏感，另外，呋喃妥因也对大部分MRSA表现出较好的体外抑菌活性。流感嗜血杆菌对亚胺培南全部敏感，对第二、三代头孢、阿奇霉素、喹诺酮类也较敏感，对红霉素和磺胺药物的敏感性较差。

3 讨 论

AURI是小儿感染性疾病的“百病之源”，也是应用抗菌药物频率最高、数量最多的疾病。大部分AURI由呼吸道合胞病毒、腺病毒等病毒引起，少部分为细菌感染，近年来，由支原体、衣原体、军团菌等非典型病原体引起的AURI也不容忽视［1］。由于AURI病原体在生物学特性和药物敏感性方面可能相距甚远，因此，准确及时地判定AURI的病原体是合理用药的关键。

对于细菌引起的AURI，病原体主要为肺炎球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌和卡他莫拉氏菌，但在不同国家和地区，病原菌的构成比（或阳性率）并不相同。在美国等发达国家，大样本（16 213例）的“呼吸系统疾病监测计划”（Respiratory surveillance program，RESP）发现，鼻咽拭子中病原菌阳性率为34%，主要病原菌及其构成比分别是：肺炎球菌（11.3%）、流感嗜血杆菌（21.7%）、卡他莫拉氏菌（28.9%）和金黄色葡萄球菌（17.9%）［4］。在同为发展中国家的越南，呼吸道感染小儿4周后肺炎球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉氏菌的携带率分别为50%、39%和17%［5］。在经济相对落后的塞内加尔乡村，肺炎球菌和流感嗜血杆菌扮演主要致病菌角色［6］。在我国，较近的流行病学调查结果表明，小儿AURI的主要病原体及其阳性率分别是流感嗜血杆菌（5.91%）、肺炎球菌（3.76%）、金黄色葡萄球菌（2.15%）和乙型溶血性链球菌（1.08%）；而在1岁以下的健康婴幼儿中，这4种细菌的携带率分别为：6.41%、29.49%、3.85%、0%［7］。结合这些地区的抗菌药物使用情况可知，在抗菌药物使用较为谨慎的地区，细菌性AURI的病原体主要为肺炎球菌和流感嗜血杆菌等典型病原体，而在抗菌药物使用较广泛的地区，AURI的病原体日趋复杂。

本文的研究对象来自现代电子工业密集地区，外来人口在居民中的比例较高，并且流动频繁，生活水平和医疗状况也差异较大。本文研究结果表明，340份咽拭子标本中分离出64株病原菌，阳性率18.82%，略高于国内文献报道，是否说明该地区AURI患儿易发生继发感染？本文肺炎球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌等主要AURI病原菌的阳性率与国内文献报道结果大致相当，但鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌在小儿AURI中作为主要病原菌出现是一个不容忽视的问题。通常情况下，这些细菌在长期应用抗菌药物而菌群失调或院内感染患者中较易出现。但本文发现，本院2岁以下AURI患者中接近3%患儿由此两种细菌引起，这在AURI的病原学研究和临床治疗中都应该引起重视。

340例患儿中，诊断急性扁桃体炎12例，化脓性扁桃体炎3例，有9例按AURI治疗5天临床症状消失但胸片示肺炎，其咽部病原菌培养阳性率100%，并且扁桃体炎病原体均为乙型溶血性链球菌或者金黄色葡萄球菌。说明咽部病原菌培养在AURI的诊断和鉴别诊断中具有一定的意义。中华医学会儿科学分会呼吸组制定的《急性上呼吸道感染抗菌药物合理使用指南》指出，对单纯根据临床症状和体征并不能完全区别扁桃体炎是病毒性还是细菌性者，必须早期进行咽部病原菌培养才能作出鉴别诊断［8］。

本文细菌性AURI的病原体中，肺炎球菌是首要病原体，耐青霉素肺炎球菌比例接近30%。该类肺炎链球菌对红霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑、氯霉素和克林霉素等普遍多重耐药，并出现耐三代头孢菌株。国内其他地区也报告耐青霉素肺炎球菌比例逐年上升［9－10］，针对这一现状，有必要对本地区儿童咽部肺炎球菌的携带率及其血清型进行调查，以选择合适的肺炎球菌多糖疫苗预防肺炎球菌感染，减少抗菌药物的使用，降低耐药菌株出现的压力。

除肺炎球菌外，流感嗜血杆菌也是儿童呼吸道感染的主要病原菌之一。近年来由嗜血杆菌引起的感染有逐渐上升的趋势，但该菌培养要求较高，分离率偏低［7，11－12］。本文分离的14株流感嗜血杆菌的药敏试验结果显示，流感嗜血杆菌患儿可首选阿奇霉素、头孢类或氨曲南、亚胺培南等抗菌药物，效果较好。

本研究中，金黄色葡萄球菌在病原菌构成中位居第三，但其重要性不容忽视。因此类细菌中MRSA高达80%，接近广东其他地区从多种标本中分离出的 MRSA比例［13］。并且MRSA对β－内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、克林霉素和四环素类抗菌药物高度耐药，显示出多重耐药特点。从药敏试验结果看，治疗MRSA首选药物是万古霉素，但万古霉素副作用大，替考拉宁可作为替代药物。呋喃妥因虽敏感性较高，但仅用于治疗泌尿道感染，因该药物在其他体液中的浓度极低。

综上所述，本地区细菌性婴幼儿AURI已经出现病原体多样、耐药性上升趋势。在治疗过程中，应尽早确定病原菌及其药物敏感性，帮助临床医生合理选用抗菌药物，这不仅有助于提高临床治疗疗效，也是控制耐药菌株增长的有力措施［14－15］。此外，在本地区开展相关流行病学调查，并深入研究耐药菌株的遗传学特征及其进化规律是制定有效呼吸道感染性疾病预防措施的重要基础。

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10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.050

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