三阴性乳腺癌与雄激素的相关性研究

庞华靖

（丹江口市卫生学校附属医院检验科，湖北 442700）

三阴性乳腺癌与雄激素的相关性研究

庞华靖

（丹江口市卫生学校附属医院检验科，湖北 442700）

目的探讨三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌患者间睾酮和雄激素受体（AR）水平的差异及临床意义。方法按照纳入标准选取该院经病理确证为原发性乳腺癌的患者，共92例女性患者，其中三阴性乳腺癌42例，非三阴性乳腺癌50例，统计分析三阴性与非三阴性乳腺组患者年龄、组织学分级、病理分期、血清睾酮水平和AR的差异。结果三阴性乳腺癌组和非三阴性乳腺癌组比较，三阴性乳腺癌组血清睾酮水平低于非三阴性乳腺癌组，差异有统计学意义（P＜0.05）；三阴性乳腺癌组AR阳性率为57%，非三阴性乳腺癌AR阳性率为82%，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论雄激素和AR可能成为三阴性乳腺癌新的治疗突破点。

睾酮； 雄激素； 雄激素受体； 三阴性乳腺癌

乳腺癌是一种激素依赖性肿瘤，多数研究认为其发病率的增加与雌激素有关［1］，雌激素受体（ER），孕激素受体（PR）已成为了临床病理常规检测项目，根据ER，PR，人类表皮生长因子受体2（HER2）的表达水平，将乳腺癌分为了三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌。然而，雄激素和雄激素受体（AR）在乳腺癌生物学中的作用以往一直是临床上和基础研究中被忽略的领域［2］。目前，已有多项研究关注乳腺癌与睾酮的关系［3－6］，而关于睾酮与三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌之间的研究，少见报道。本研究旨在分析三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌之间血清睾酮水平和AR的差异，以发现治疗三阴性乳腺癌新突破点。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011年1月至2013年12月于本院就诊的乳腺癌患者，纳入条件：在本院首次诊断为原发性乳腺癌的患者；未行手术及化疗前检测了血清睾酮水平；无其他伴发疾病；未服用性激素类药物；非少数民族；病理类型为浸润性乳腺癌。共有三阴性乳腺癌患者42例纳入研究，年龄范围29～73岁，平均（45.75±9.24）岁。另外从同期符合纳入条件的非三阴性乳腺癌患者中随机抽取50例作为非三阴性乳腺癌组，年龄范围30～64岁，平均（46.98±8.78）岁。

1.2 方法

1.2.1 血清标本采集 采集空腹静脉血2～3mL，4h内分离血清后置－20℃冰箱保存待测。一次性复融后用化学发光法测定血清睾酮水平，试剂为美国DPC公司提供的原装试剂，仪器为美国DPC公司的Immulite发光仪。

1.2.2 组织学分级方法及病理分期 使用Nottingham联合组织学分级方法进行组织学分级；使用美国癌症联合委员会，乳腺癌TNM分期方法进行病理分期。

1.2.3 免疫组化检测AR 采用免疫组化SP法检测92例乳腺癌石蜡组织中AR的阳性表达情况，并分析三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌的阳性表达的差异。主要免疫组化试剂包括兔抗磷酸化AR（Ser578）多克隆抗体，购自北京博奥森生物技术有限公司。

1.3 统计学处理 采用Excel 2003软件录入三阴性乳腺癌组及非三阴性乳腺组共计92例患者的年龄、组织学分级、病理分期、血清睾酮水平和AR免疫组化结果，导入SPSS17.0统计软件，统计学检验水准ɑ＝0.05。混杂因素控制方法：采用两独立样本t检验检测两组样本年龄总体均数是否存在差异，采用完全随机设计行×列表资料的χ2检验检测两组样本组织学分级，病理分期总体分布是否存在差异。采用完全随机设计两样本资料的秩和检验分析三阴性乳腺癌组和非三阴性乳腺癌组血清睾酮水平总体分布是否存在差异。采用χ2检验分析三阴性乳腺癌组和非三阴性乳腺癌组AR阳性率是否存在差异。

2 结 果

2.1 两组年龄、组织学分级和病理分期的比较 经两独立样本t检验分析，两组年龄总体均数比较，差异无统计学意义（P＝0.966）；两组样本组织学分级构成分布比较，差异无统计学意义（P＝0.390）；两组临床分期构成分布比较，差异无统计学意义（P＝0.293），见表1。

2.2 两组样本血清睾酮水平 三阴性乳腺癌组和非三阴性乳腺癌组血清睾酮水平比较，三阴性乳腺癌组血清睾酮水平低于非三阴性乳腺癌组，差异有统计学意义（P＝0.032＜0.05）。

2.3 两组AR阳性率的比较 显示三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌AR阳性率比较，三阴性乳腺癌组的AR阳性率低于非三阴性乳腺癌组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

3 讨 论

乳腺癌的发生发展与体内性激素的水平密切相关。有研究认为雄激素对于乳腺细胞起到一种保护作用，过表达AR明显地抑制雌激素途径引起的乳腺上皮细胞增殖，但乳腺癌MCF－7细胞如转染突变的AR，则没有此现象［7］。Dimitrakakis等［8］在动物实验中发现，正常雌性猴子在接受AR拮抗剂使AR阻断后，乳腺上皮细胞发生两倍以上的增殖，此外在卵巢切除的猴子给予标准剂量的雌激素替代治疗中，生理剂量的雄激素能够减少雌激素引起的乳腺上皮细胞增殖，进一步证实雄激素是通过降低ERa、提高ERI3表达而参与保护乳腺上皮细胞的。

本研究中，为了排除由于三阴性乳腺癌组和非三阴性乳腺癌组两样本之间年龄、组织学分级、病理分期的不同而导致的误差，故做了相应统计学分析，统计分析显示两组之间年龄、组织学分级、病理分期的差异无统计学意义（P＞0.05），两组间血清睾酮水平比较，三阴性乳腺癌组低于非三阴性乳腺癌组，差异有统计学意义（P＜0.05）。免疫组化显示三阴性乳腺癌组AR阳性率低于非三阴性乳腺癌组，差异有统计学意义（P＜0.05）。从三阴性乳腺癌组血清睾酮水平和AR阳性率均低于非三阴性乳腺癌组可推测雄激素对乳腺癌患者而言中是一种有利的因素，与文献报道相符［7－8］。雄激素和AR可能成为三阴性乳腺癌新的治疗突破点。

临床上，雄激素可用于对雌激素治疗失败的乳腺癌，这说明雄激素的作用不单纯是针对垂体促性腺激素的分泌，还可能通过直接的作用抑制肿瘤细胞的生长。雄激素一般与靶器官上的AR结合后方能发挥其作用［9］。已有的文献报道，AR在乳腺癌中的表达率为35%～90%［10－11］，与ER或PR的表达相当甚至高于这两者［12－13］。AR在乳腺癌中多表现为：肿瘤体积小的阳性率高；淋巴结无转移的阳性率高；组织学分级低的阳性率高；ER、PR阳性的阳性率高等［14－17］。这预示着在肿瘤发现越早、恶性程度越低的情况下AR的表达阳性率就越高，AR阳性者可能预示着乳腺癌患者预后较好。Boccuzzi等［18］曾报道大剂量（200nmol/L）双氢睾酮（DHT）有通过ER介导的刺激MCF－7细胞增生的作用，小剂量DHT则起抑制作用。

目前，已有相当部分研究证实了AR在乳腺癌以及在三阴性乳腺癌中的作用。最新研究发现，AR阴性的三阴性乳腺癌能够提示较早复发的可能性［19］，采用最低毒性剂量的雄激素抗体比卡鲁胺治疗AR阳性，雌、孕激素阴性的转移性乳腺癌具有19%的临床获益率［20］，AR可能成为三阴性乳腺癌的一种预后标志物［21］，但是这几项研究均未列入非三阴性乳腺癌或雌、孕激素阳性的乳腺癌患者作为对照。

本研究以非三阴性乳腺癌作为对照，研究了三阴性乳腺癌的睾酮水平和AR阳性率，为将来研究雄激素和AR与三阴性和非三阴性乳腺癌的关系打下基础，探索发现雄激素和AR成为三阴性乳腺癌新的治疗靶点。

［1］Chlebowski RT，Kuller LH，Prentice RL，et al.Breast Cancer after use of estrogen plus progestin in postmenopausal women［J］.N Engl J Med，2009，360（6）：573－587.

［2］Moe RE，Anderson BO.Androgens and androgen receptors：a clinically neglected sector in breast Cancer biology［J］.J Surg Oncol，2007，95（6）：437－439.

［3］Bershten LM，Boriakina MP，Tsyrlina EV，et al.Decrease of testosterone level in blood of breast Cancer patients of reproductive age after neoadjuvant chemotherapy［J］.Vopr Onkol，2012，58（5）：639－643.

［4］Hall SA，Araujo AB，Kupelian V，et al.Testosterone and breast Cancer［J］.J Sex Med，2010，7（2Pt 2）：1035－1036.

［5］Davis SR，Wolfe R，Farrugia H，et al.The incidence of invasive breast Cancer among women prescribed testosterone for low libido［J］.J Sex Med，2009，6（7）：1850－1856.

［6］Guay AT，Traish AM.Testosterone therapy and breast Cancer［J］.Fertil Steril，2008，90（2）：468.

［7］AndòS，De Amicis F，Rago V，et al.Breast Cancer：from estrogen to androgen receptor［J］.Mol Cell Endocrinol，2002，193（1/2）：121－128.

［8］Dimitrakakis C，Zhou J，Wang J，et al.A physiologic role for testosterone in limiting estrogenic stimulation of the breast［J］.Menopause，2003，10（4）：292－298.

［9］Schippinger W，Regitnig P，Dandachi N，et al.Evaluation of the prognostic significance of androgen receptor expression in metastatic breast Cancer［J］.Virchows Arch，2006，449（1）：24－30.

［10］Wang W，John EM，Ingles SA.Androgen receptor and prostatespecific antigen gene polymorphisms and breast Cancer in African－American women［J］.Cancer Epidemiol BiomarkersPrev，2005，14（12）：2990－2994.

［11］Spurdle AB，Antoniou AC，Duffy DL，et al.The androgen receptor CAG repeat polymorphism and modification of breast cancer risk in BRCA1and BRCA2mutation carriers［J］.Breast Cancer Res，2005，7（2）：176－183.

［12］Hall RE，Aspinall JO，Horsfall DJ，et al.Expression of the androgen receptor and an androgen－responsive protein，apolipoprotein D，in human breast Cancer［J］.Br J Cancer，1996，74（8）：1175－1180.

［13］Kuenen－Boumeester V，Van der Kwast TH，Claassen CC，et al.The clinical significance of androgen receptors in breast cancer and their relation to histological and cell biological parameters［J］.Eur J Cancer，1996，32（9）：1560－1565.

［14］Ogawa Y，Hai E，Matsumoto K，et a1.Androgen receptor expression in breast cancer：relationship with clinicopathological factors and biomarkers［J］.Int J Clin Oncol，2008，13（5）：431－435.

［15］Moinfar F，Okcu M，Tsybrovskyy O，et al.Androgen receptors frequently are expressed in breast carcinomas：potential relevance to new therapeutic strategies［J］.Cancer，2003，98（4）：703－711.

［16］Agrawal AK，JeleńM，Grzebieniak Z，et al.Androgen receptors as aprognostic and predictive factor in breast Cancer［J］.Folia His－tochem Cytobiol，2008，46（3）：269－276.

［17］Kaaks R，Rinaldi S，Key TJ，et al.Postmenopausal serum androgens，oestrogens and breast Cancer risk：the European prospective investigation into Cancer and nutrition［J］.Endocr Relat Cancer，2005，12（4）：1071－1082.

［18］Boccuzzi G，Brignardello E，Di Monaco M，et al.5－En－androstene－3 beta，17beta－diol inhibits the growth of MCF－7breast cancer cells when oestrogen receptors are blocked by oestradiol［J］.Br J Cancer，1994，70（6）：1035－1039.

［19］Thike AA，Yong－Zheng Chong L，Cheok PY，et al.Loss of androgen receptor expression predicts early recurrence in triple－negative and basal－like breast Cancer［J］.Mod Pathol，2014，27（3）：352－360.

［20］Gucalp A，Tolaney S，Isakoff SJ，et al.PhaseⅡtrial of bicalutamide in patients with androgen receptor－positive，estrogen receptor－negative metastatic Breast Cancer［J］.Clin Cancer Res，2013，19（19）：5505－5512.

［21］Tang D，Xu S，Zhang Q，et al.The expression and clinical significance of the androgen receptor and E－cadherin in triple－negative breast Cancer［J］.Med Oncol，2012，29（2）：526－533.

The correlation between triple negative breast cancer and androgen

Pang Huajing
（Department of Clinical Laboratory，Affiliated Hospital of Health school of Danjiangkou City，Danjiangkou，Hubei 442700，China）

ObjectiveTo investigate the difference of serum testosterone and androgen receptor（AR）concentrations between triple negative breast cancer patients and non－triple negative breast cancer patients and its clinical significance.differences and clinical significance.MethodsAccording to the inclusion criteria，a total of 92female patients were enrolled in the study including 42 patients with triple negative breast cancer and 50patients with non－triple negative breast cancer.The patients recruited all seeked medical advice in hospital and diagnosed with primary breast cancer by using pathological method.Age，histological grade，pathological stage，serum testosterone and AR concentrations were compared between triple negative breast and non－triple－negative group and statistically analyzed.ResultsCompared between triple negative breast and non－triple－negative group，the serum testosterone concentrations of triple negative breast was lower and the difference were statistically different（P＜0.05）；AR－positive rate of triple negative breast cancer group was 57%，AR－positive rate of non－triple－negative breast cancer was 82%，the difference was statistically significant（P＜0.05）.ConclusionAndrogen and AR may be a prognostic therapeutic target in triple negative breast cancer.

testosterone； androgen； androgen receptor； triple negative breast cancer

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.019

A

1673－4130（2015）03－0331－03

2014－10－15）

庞华靖，男，主管检验师，主要从事临床检验研究。