2011～2012年广州地区儿童腹泻病原菌分布及耐药性分析＊

黄莲芬，刘海英，谢永强，钟华敏，周珍文

（广州市妇女儿童医疗中心/广州市儿童医院检验科，广东广州 510120）

2011～2012年广州地区儿童腹泻病原菌分布及耐药性分析＊

黄莲芬，刘海英，谢永强，钟华敏，周珍文

（广州市妇女儿童医疗中心/广州市儿童医院检验科，广东广州 510120）

目的了解广州地区儿童细菌性腹泻主要病原菌分布及其耐药性。方法对2011～2012年疑似细菌性腹泻患儿大便标本进行细菌培养，分析病原菌分布特征及耐药性。结果2011～2012年共检出儿童腹泻病原菌416株，其中沙门菌属、致病性大肠埃希菌、空肠弯曲菌、白色念珠菌分别占53.61%、37.98%、5.29%、1.68%。主要病原菌对抗菌药物的耐药率分别为氨苄西林85.25%、复方磺胺甲噁唑54.28%、头孢噻肟44.70%、头孢曲松42.53%、氯霉素40.66%、头孢他啶23.55%、氨曲南23.36%、环丙沙星14.88%、头孢吡肟8.07%、头孢哌酮/舒巴坦7.99%、哌拉西林/他唑巴坦7.42%、亚胺培南0.00%。结论广州地区儿童腹泻病原菌以沙门菌属、致病性大肠埃希菌、空肠弯曲菌为主；敏感性排名前5位的抗菌药物为亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、环丙沙星。

腹泻； 病原菌； 耐药性； 儿童

腹泻是由一组多病原、多因素引起的，以腹泻、呕吐为主要症状的胃肠道功能紊乱综合征。在国内，腹泻是小儿常见病，发病率仅次于呼吸道感染［1－2］。根据病因，腹泻分为感染性与非感染性两类；按病原学特点，又可分为病毒性、细菌性、寄生虫性、真菌性。本研究分析了儿童大便细菌培养和药敏实验结果，旨在了解儿童细菌性腹泻主要病原菌及其药敏特征。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院儿童院区2011～2012年分离的腹泻病原菌416株。

1.2 仪器与试剂 致病性大肠埃希菌诊断血清试剂盒、志贺菌诊断血清试剂盒、沙门菌分型血清试剂盒购自宁波天润生物药业有限公司；中国蓝平板、麦康凯平板、SS平板、CV平板购自广州市迪景微生物科技有限公司；MH平板、药敏纸片购自英国Oxoid公司；空肠弯曲菌选择培养基购自英国Oxoid公司，按说明书要求自行配置CCDA平板；转运培养基采用Cary－Blair运送培养基；微需氧产气袋、比浊仪和药敏实验用生理盐水购自法国生物梅里埃公司。

1.2 方法

1.2.1 细菌培养和鉴定 对所有送检大便标本按《全国临床检验操作规程》进行肠道病原菌分离培养和鉴定［3］。大便采集至Cary－Blair运送培养基，在生物安全柜中接种至中国蓝平板、麦康凯平板、SS平板和CCDA平板。CCDA平板置微需氧产气袋中，42℃培养48～72 h，其他平板37℃培养过夜。根据平板上的菌落特征初步判断是否为病原菌，再利用生化实验鉴别到属。采用大肠埃希菌、志贺菌、沙门菌分型血清进行致病性大肠埃希菌、志贺菌、沙门菌血清学分型。空肠弯曲菌采用42℃生长实验及氧化酶实验、触酶实验、生化反应鉴定。

1.2.2 药敏实验 分离获得的致病性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌按《全国临床检验操作规程》进行药敏实验检测，根据美国临床和实验室标准化协会（CLSI）M100－S20文件判断药敏实验结果。空肠弯曲菌和真菌未做药敏实验。

2 结 果

2.1 病原菌病原学分布及血清学分型 416株小儿细菌性腹泻病原菌病原学分布见表1，其中致病性大肠埃希菌和沙门菌属血清型分布见表2～3。2株志贺菌血清学分型分别为宋内和福氏志贺菌。

2.2 病原菌病区分布 致病性大肠埃希菌158株，其中门诊50株、病房108株。沙门菌属223株，其中门诊103株、病房120株。空肠弯曲菌22株，其中门诊6株、病房16株。检出白色念珠菌7株，其中门诊1株、病房6株。金黄色葡萄球菌1株，分离自皮肤科门诊患儿。嗜水气单胞菌3株，1株来自急诊科门诊患儿，2株来自消化科住院患儿。志贺菌2株，分别来自急诊科门诊和危重综合病区患儿。门诊患儿主要来自内科、消化科、新生儿科及急诊科门诊，住院患儿主要来自消化科、感染区、危重综合病区及急诊留观病区。重症监护病房、内分泌科、呼吸科、肾内科、心脏内科分离到少数致病性大肠埃希菌、沙门菌、空肠弯曲菌、白色念珠菌。

2.3 常见病原菌药敏实验结果 小儿细菌性腹泻常见致泻菌包括致病性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌，其药敏实验结果，见表4。

3 讨 论

腹泻是婴幼儿常见病。据文献报道，全世界每年至少有1.3亿5岁以下儿童发生腹泻，其中350万患儿死亡［2］。小儿腹泻发病年龄多在2岁以下，是导致小儿营养不良的主要原因，治疗不及时或不恰当可导致患儿死亡。0～3岁婴幼儿腹泻的易感性因素:（1）胃肠道发育不够成熟，酶活性较低，但营养需要相对较高，胃肠道负担重；（2）免疫功能不完善；（3）未接受母乳喂养；（4）正常肠道菌群的建立与生理演替；（5）神经、内分泌、循环系统及肝、肾功能发育未成熟，调节功能较差。

本院腹泻患儿多为5岁以下儿童，以2岁以内婴幼儿为主。婴幼儿腹泻肠内感染的常见病原体包括轮状病毒、产毒性大肠埃希菌、空肠弯曲杆菌、沙门菌属、隐孢子虫等。本研究结果显示，广州地区儿童腹泻主要病原菌为沙门菌属，其次是致病性大肠埃希菌和空肠弯曲菌、白色念珠菌等，志贺菌较少，条件病原菌（如白色念珠菌和金黄色葡萄球菌等）引起的腹泻更为少见，病原菌构成与青岛地区有差异［3］，可能与不同地区存在流行病原菌及治疗用药习惯不同有关。本院2011～2012年所有检出肠道致泻菌的患儿，大便多为黏液脓血便，少数已是迁延性腹泻。416株肠道致泻菌中，53.61%为沙门菌属，37.98%为致病性大肠埃希菌，空肠弯曲菌约占5%，病原菌构成与肯尼亚十分类似［4］，而与西非、南亚等地区以志贺菌、产肠毒素性大肠埃希菌、隐孢子虫、肠致病性大肠埃希菌为主有所不同［5］。与成人相比，小儿致病性大肠埃希菌性腹泻的病情相对较重，病程也较长，主要分离的血清型由多到少依次为O125K70、O127aK63、O86K61、O44K74、O126K71、O128K67、O119K69、O114K90、O55K59等。沙门菌属可致结肠炎，导致脓血腹泻，鼠伤寒沙门氏菌几乎占了所有沙门菌属的70%，是广州地区儿童细菌性腹泻的重要病原菌。该血清型流行广泛，传染性强。鼠伤寒沙门氏菌所致腹泻病情轻重不等，年龄越小，病情越重，并发症越多，半数患儿病后排菌约2周，少数达2个月以上，多在6个月消失。在发展中国家，空肠弯曲菌肠炎以5岁以下儿童发病率最高，尤其是1岁以内的婴幼儿，发病率随年龄升高而下降，部分带菌者无症状，但不断排菌，排菌期长达6～7周，甚至15个月之久，临床上应该注意隔离，及时切断传染源，避免交叉或二次感染。

3种常见腹泻病原菌（致病性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌）药敏实验结果显示，其对氨苄西林的耐药率最高，为85.25%，其次为复方磺胺甲恶唑（54.28%），头孢类抗菌药物，如头孢噻肟、头孢曲松和氯霉素耐药率为40%～50%，头孢他啶和氨曲南耐药率为23%左右，耐药率较低的药物包括环丙沙星、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦，未检出亚胺培南耐药菌株。由此可见，广州地区儿童腹泻常见病原菌的耐药性较强，对各种抗菌药物的耐药率均高于2013年青岛地区的报道［3］。因此，对于疑似细菌性腹泻患儿，应及时进行大便细菌培养、病原菌分离和药敏实验，根据药敏实验结果合理用药，减少多药耐药菌株的产生。

［1］左素君，胡艳军.我院感染性腹泻患儿病原菌及药敏分析［J］.儿科药学杂志，2008，14（3）:34－36.

［2］Woodward DL，Rodgers BFG.Surveillance of antimicrobial resistance in salmonella，shigella and vibrio cholerae in latin America and Caribbean:A collaborative project［J］.Can J Infect Dis，2000，11（4）:181－186.

［3］薛爱国，李爱燕，宋冬，等.婴幼儿腹泻病原菌分布特点和药敏分析［J］.中国现代药物应用，2014，8（7）:7－8.

［4］Swierczewski BE，Odundo EA，Koech MC，et al.Surveillance for enteric pathogens in a case－control study of acute diarrhea in Western Kenya［J］.Transac Royal Soci Trop Med Hygi，2013，107 （2）:83－90.

［5］Kotloff KL，Nataro JP，Blackwelder WiC，et al.Burden and aetiology of diarrhoeal disease in infants and young children in developing countries（the Global Enteric Multicenter Study，GEMS）:a prospective，case－control study［J］.Lancet，2013，382（9888）:209－222.

Composition and drug resistance of pathogenic bacteria causing infantile diarrhea in Guangzhou from 2011 to 2012＊

Huang Lianfen，Liu Haiying，Xie Yongqiang，Zhong Huamin，Zhou Zhenwen
（Laboratory Department，Guangzhou Children Hospital/Guangzhou Women and Children Medical Center，Guangzhou，Guangdong 510120，China）

ObjectiveTo explore the main pathogenic bacteria and antibiotic resistance patterns in children with bacterial diarrhea from Guangzhou region.MethodsRegular bacterial culture of stool samples from children with suspicious bacterial diarrhea was performed to isolate the pathogen during 2011 to 2012，followed by the analysis of its composition and serum type，ward distribution characteristics and drug resistance to 12 antimicrobacterial drugs.Results416 strains of pathogenic bacteria were isolated from diarrhea children during 2011－2012，in which salmonella，enteropathogenic E.coli，Campylobacter jejuni and Candida albicans isolates accounted for 53.61%，37.98%，5.29%and 1.68%respectively.Drug resistance rate of the main strains to 12 antimicrobial agents was 85.25%to ampicillin，54.28%to compound sulfamethoxazole，44.70%to cefotaxime，42.53%to ceftriaxone，40.66%to chloramphenicol，23.55%to ceftazidime，23.36%to aztreonam，14.88%to ciprofloxacin，8.07%to cefepime，7.99%to cefperazone/sulbactam，7.42%to piperacillin/tazobactam respectively，and no resistance to imipenem was detected.ConclusionThe pathogenic bacteria causing diarrhea mainly includes salmonella，pathogenic e.coli，campylobacter jejuni in children from guangzhou region，the top five sensitive antimicrobial reagents for the main strains includes imipenem，piperacillin/tazobactam，cefperazone/sulbactam，cefepime and ciprofloxacin.

diarrhea； pathogenic bacteria； drug resistance； infant

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.013

A

1673－4130（2015）10－1351－03

2015－03－02）

广东省广州市卫生局基金课题（2013A011040022，201102A213044）。 作者简介:黄莲芬，女，主管技师，主要从事临床微生物检验研究。