冯会
摘要:目的 探讨母血中胎儿DNA、胎盘mRNA对于诊断前置胎盘合并胎盘粘连意义。方法 选取我院自2012年4月~2014年4月收治的60例经B超检查确诊为胎盘前置的单胎孕妇作为本次研究的观察组研究对象,其中胎盘粘连的观察A组孕妇30例,胎盘未粘连的观察B组患者30例,选取同期的30例正常接受身体检查的妊娠期孕妇作为对照组,对比三组患者的母血中胎儿DNA含量以及胎盘内mRNA含量。结果 观察A组患者的母血中胎儿DNA含量明显高于对照组,数据对比差异具有统计学意义,P<0.05;观察A组患者的mRNA含量明显高于观察B组和对照组,三组数据对比差异具有统计学意义,P<0,.05;观察B组的DNA含量明显高于对照组,观察B组中胎盘的mRNA含量与对照组对比差异不具有统计学意义,P>0.05。结论 孕妇外周血中胎儿DNA含量直接影响患者胎盘是否发生粘连情况,胎盘内mRNA含量直接反应胎盘是否出现粘连情况。因此在产前检查中测定母血中胎儿DNA、胎盘mRNA含量情况能够有效的预测胎盘前置以及粘连情况。
关键词:胎儿DNA;胎盘mRNA;前置胎盘;胎盘粘连
前置胎盘是指胎盘的附着位置比较靠子宫下段或者下缘部位,或者覆盖宫颈内口位置,该位置明显低于胎儿的显露部位。前置胎盘孕妇妊娠期比较严重的并发症,一般发病率为0.24%~1.57%,在妊娠晚期很容易导致孕妇大出血,影响母婴的生命安全[1]。我院在是通过实时荧光定量PCR法来测定孕妇外周血液中胎儿DNA含量以及胎盘中mRNA含量来测定前置胎盘以及胎盘粘连情况,现将研究结果报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取我院自2012年4月~2014年4月收治的60例经B超检查确诊为胎盘前置的单胎孕妇作为本次研究的观察组研究对象,其中胎盘粘连的观察A组孕妇30例,年龄在24~33岁,平均年龄为(26.7±1.6)岁,平均妊娠时间为(31.4±1.2)w;胎盘未粘连的观察B组患者30例,孕妇年龄在25~35岁,平均年龄为(31.0±0.4)岁,平均妊娠时间为(32.5±0.3)w;选取同期的30例正常接受身体检查的妊娠期孕妇作为对照组,年龄在27~32岁,平均年龄为(29.7±1.4)岁,平均妊娠时间为(32.3±1.4)w。
1.2试剂和设备的选择 试剂的选择:德国的QLAamp DNAmini Kit、Qiagen Protease、Buffer AL;PCR反应试剂,由上海博亚生物技术有限公司生产的引物SRY-109F: RY-254R5'-CCCCCTAGTACCCTGACAATGTATT-3';探针由上海博雅生物技术有限公司提供,RY-142T:5'-(FAM)AGCAGTAGAGCAGTCAGGGAGGCAGA(TAMRA) -3'设备的选择:由上海医疗器械五厂提供的型号为H.H.S11-2型号的电热恒温水浴锅,由上海医用分析仪器厂制造型号为TGL-16的台式高速离心机;由德国Biometra公司生产的型号为FTC-2000的荧光定量PCR仪。
1.3方法 收集三组研究对象外周血液8ml,胎盘血液8ml,然后分别放入EDTA抗凝管内,经3000g的离心处理10min,将上层的离心出来的血浆取出,然后在进行3000g离心处理10min,再将上层的血浆提取出来,保存于温度在零下20℃的冰箱内;DNA和mRNA的提取,按照DNA和mRNA的提取盒说明进行操作,分别从离心并冷藏处理的血浆中提取50uL的DNA和mRNA提取物[2]。
1.4统计学分析 采用SPSS18.0统计学软件对数据进行处理分析,计数资料用率表示,采用χ2检验,计量资料采用(x±s)表示,用t检验,P<0.05为差异显著,具有统计学意义。
2 结果
观察A组、观察B组和对照组孕妇的外周血液中胎儿DNA含量(copies/ml),胎盘中mRNA含量(copy/ug)对比,观察A组的孕妇胎儿DNA含量明显高于观察B组和对照组孕妇,三组数据对比差异具有统计学意义,P<0.05,见表1。
胎盘位置的不同对于胎盘内mRNA和孕妇外周血液中DNA的含量(copies/ml)变化情况,检测显示孕妇外周血液中胎儿DNA含量(copy/ug),胎盘中mRNA含量与胎盘是否前置影响不大,见表2。
3 讨论
前置胎盘严重影响了母婴在分娩时的生命安全,虽然其发病率较低,同时出现胎盘粘连的情况也较低,但是其危害性较大所以一直是妇产科中非常关注的研究重点,本次研究中观察A组的孕妇外周血液中胎儿DNA含量和胎盘中mRNA含量均明显高于对照组和观察B组,三组数据对比差异具有统计学意义,P<0.05。
前置胎盘合并胎盘粘连的孕妇外周血液中胎儿的DNA来源有3点:①在胎盘粘连的过程中母胎界面需要重新塑造,在重塑的过程中细胞会出现凋亡现象,这样坏死细胞便会释放出胎儿的DNA进入到母体的血液中[3];②胎儿细胞由于胎盘粘连的原因,然后直接进入母体的组织并进行血液循环,但是会出现免疫组织排斥的情况,然后将细胞杀死释放出胎儿的DNA;③胎盘内处于游离状态的DNA沿着粘连组织直接进入母体的血液循环系统。
mRNA即信使核糖核酸,该物质也携带由遗传信息的蛋白质合成物[4],它能够从脱氧核糖核酸(简称DNA)中转录合成携带遗传信息的核糖核酸,本次研究中胎盘组织中基质金属蛋白酶(简称MMP)在胎盘粘连的组织中mRNA的表达水平高于未发生粘连的观察B组和对照组,因此表示胎盘界面的MMP增加了子宫细胞外基质的弹力蛋白以及胶原蛋白的水解,从而导致细胞过度的侵入从而造成组织的粘连现象[5]。
综上所述,孕妇产前检查时一定要详细检查孕产妇外周血液中胎儿DNA含量以及胎盘内组织的mRNA含量,从而预测胎盘发生粘连情况,做好相应的准备工作,尽可能的降低分娩时产妇和婴儿的危险。
参考文献:
[1]徐爱群,边旭明.胎儿游离RNA在产前诊断中的研究进展[J].国际妇产科学杂志, 2010,30(4):442.
[2]段涛,黄一颖.母血中胎儿DNA预测前置胎盘合并粘连的探讨[J].现代妇产科进展,2010,15(11):854-855.
[3]李凌.人工流产与前置胎盘、胎盘粘连及胎盘植入的临床发生率研究[J].医学信息,2013,(18):71-71.
[4]张潇潇,陈廉.前置胎盘的病因研究及分类[J].实用妇产科杂志,2009,25(10):577-578.
编辑/哈涛