RP-HPLC测定金感胶囊中对乙酰氨基酚的含量

宁恺佳

(三门峡市食品药品检测中心,河南三门峡472000)

RP-HPLC测定金感胶囊中对乙酰氨基酚的含量

宁恺佳

(三门峡市食品药品检测中心,河南三门峡472000)

摘 要:目的建立金感胶囊中对乙酰氨基酚含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,用Hypersil C18柱(5μm,4.6 mm×150 mm)为固定相,以甲醇-水(15∶85)为流动相醋酸调节至p H 3.00,检测波长为320 nm。结果对乙酰氨基酚进样量在0.20～2.00μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.79%(n=6)。结论所建方法简便、准确、灵敏度较高,可用于测定金感胶囊中对乙酰氨基酚的含量。

关键词:反相高效液相色谱;金感胶囊;对乙酰氨基酚;含量测定

金感胶囊由金银花、穿心莲、板蓝根、蒲公英、对乙酰氨基酚、盐酸金刚烷氨、马来酸氯苯那敏等7味药组成;具有清热解毒,疏风解表之功效,用于普通感冒、流行性感冒,外感风热证,头痛,鼻塞、流涕、咳嗽、咽痛等。我们通过实验,采用RP-HPLC,测定对乙酰氨基酚的含量。实验证明,在我们叙述色谱条件下,各成分具有很好的分离效果和较高的理论塔板数,测定方法快速简便、灵敏、准确度较高,可以用于该制剂的质量控制和评价。

1　仪器与试药

1.1仪器

LC-10ATvp高效液相色谱仪(岛津),SPD-l0Avp检测器,浙大智能N2000色谱工作站,超声波清洗器,2010型紫外可见分光光度计,十万分之一分析天平,酸度计。

1.2试药

对乙酰氨基酚对照品(批号10018 200408)由中国药品生物制品检定所提供。金感胶囊(贵州百灵制药有限公司,市售)。甲醇为色谱纯;体积分数36%醋酸为分析纯;水为纯净水。

2　方法与结果

2.1对照品溶液的制备

精密称取对乙酰氨基酚对照品5 mg,加甲醇定容至50 m L,制成每1 m L含对乙酰氨基酚100μg的对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备

取胶囊内容物0.9 g(相当于2粒胶囊内容物重量),精密称定,置100 m L容量瓶中,加入甲醇50 m L,密塞,超声处理(功率80 W,频率60 KHz) 40 min,放冷至室温,用甲醇稀释至刻度,摇匀,0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。

2.3实验条件的选择

色谱条件:依利特Hypersil C18柱(150 mm× 4.6 mm,5μm);流动相:甲醇―水(15∶85)醋酸调酸度至p H 3.00;检测波长:320 nm;柱温为室温;流速1.0 m L/min;进样量:20μL。在此条件下供试品中各物质峰恰能实现基线分离,对乙酰氨基酚的HPLC图谱见图1、图2。

2.4方法学考察[1-2]

2.4.1线性关系 取线性关系下的对照品溶液0.5、1.5、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0 m L,分别定容至5 m L,以0.22μm有机微孔滤膜过滤后,分别进样20μL。按2.3项下的色谱条件进行测定,分别记录色谱图。各进样量重复进样3次,取其3次峰面积平均值,以峰面积Y对进样量X进行线性回归,得回归方程为: Y=1 006.7X+89.863,r=0.999 4(n=6),结果表明对乙酰氨基酚在0.20～2.00μg质量范围内呈良好的线性关系。

2.4.2稳定性实验 取线性关系下对乙酰氨基酚对照品溶液,以0.22μm有机微孔滤膜过滤后,每隔2 h进样1次,考察12 h,所得峰面积RSD为1.56%。实验表明,对乙酰氨基酚的甲醇溶液在放置12 h内基本稳定。

2.4.3重复性实验 取同一批金感胶囊,按2.2项下供试品溶液的制备方法平行制备供试品溶液6份,以0.22μm有机微孔滤膜过滤后,每份取20μL进样,分别记录对乙酰氨基酚的峰面积,计算其RSD为0.51%(n=6),表明重复性良好。

2.4.4精密度实验 取2.1项下对乙酰氨基酚对照品溶液,以0.22μm有机微孔滤膜过滤,每次进样20μL,重复进样6次,分别记录其峰面积,计算相对标准偏差(RSD)为0.67%(n=6),结果表明,该方法精密度较好。

2.4.5回收率实验 采用加样回收法,取同一批已知含量的金感胶囊,精密量取已知含量的供试品溶液5 m L,共6份,定量加入对乙酰氨基酚对照品溶液相当于250μg对乙酰氨基酚的量,以0.22μm微孔滤膜滤过,按2.4.6项下的样品含量测定方法进行检测,每次进样20μL,记录色谱图,计算得平均回收率为99.79%,RSD=1.41%(n=6),结果显示,该方法准确度较好。

2.4.6样品含量测定 按2.2项下所述供试品溶液的制备方法配制6份不同批号金感胶囊供试品溶液,分别用0.22μm滤膜滤过,取续滤液,装入样品瓶中,按2.3项下色谱条件每份进样3次,记录色谱图,测定峰面积,由每个批号峰面积的平均值按外标法分别计算金感胶囊中该成分的含量(mg/粒),结果见表1。

3　讨论

3.1检测波长的确定

对对乙酰氨基酚和绿原酸对照品溶液进行190～400 nm范围扫描,结果对乙酰氨基酚在257 nm处有最大吸收,绿原酸在327 nm处有最大吸收。考虑到该制剂中绿原酸含量较低,参考相关文献[3-4]并进行大量实验,选择绿原酸吸收强度相对较大同时对乙酰氨基酚也有吸收的320 nm处测定(绿原酸的含量测定另文探讨)。

3.2流动相的选择

我们实验采用甲醇―水―醋酸流动相,通过对几种不同比例和酸度的流动相进行比较试验,结果在甲醇-水(15∶85)醋酸调酸度至p H 3.00色谱条件下,待测成分的柱效较高,且分离理想,峰形较好,因而选用该流动相进行待测成分色谱分离与含量测定。

4　结论

我们实验采用RP-HPLC法测定金感胶囊中对乙酰氨基酚含量,结果对乙酰氨基酚进样量分别在0.20～2.00μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.79%(n=6)。实验表明该含量测定方法线性关系和精密度好、准确度高、稳定性及重复性均较好,适于药物中对乙酰氨基酚的含量测定。

参考文献:

[1]付向红,付春华.RP-HPLC测定感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚、绿原酸的含量[J].中国中医药信息杂志,2004,11 (10):878―879.

[2]高光伟,冯向东,黄海欣.HPLC同时测定维C银翘片中绿原酸、对乙酰氨基酚、维生素C、马来酸氯苯那敏的含量[J].中成药,2008,10(2):207―210.

[3]陈述,孟蕾蕾.HPLC同时测定维C银翘片中绿原酸、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏的含量[J].中国药学杂志, 2009,18(1):65―66.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010:234.

[责任编辑李武营]

RP-HPLC Determination of Paracetamol in Gingan Capsules

NING Kaijia
（Sanmenxia food and drug inspection center，Sanmenxia 472000，China）

Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of paracetarnol in Jingan Capsules.MethodsThe RP-HPLC was conducted on a Hypersil C18column（5μm，4.6mm×150 mm）with acetonitrile:water（15∶85）（which was adjusted to p H 3.00 by acetic acid）as mobile phase，and the detection wavelength at 320 nm.ResultsParacetamol showed good linear relationship in the following concentrations of range:0.20～2.00μg.The average recovery was obtained as 99.79%（n=6）.ConclusionThe method is reliable，accurate and specific.It can be used for the content determination of paracetamol in Jingan Capsules.

Key words：RP-HPLC；Jingan Capsules；paracetamol；contented termination

作者简介:宁恺佳(1982―),女,三门峡市人,工程师,从事药品及医疗器戒质量监测工作。

收稿日期:2015-03-12

中图分类号:R927.2

文献标识码:A

文章编号:1672―7606(2015)02―0100―03