子宫内膜样腺癌中PTEN、MDM2表达及临床意义①

徐丽超,吴英杰

(佳木斯大学附属第一医院,黑龙江 佳木斯 154003)



子宫内膜样腺癌中PTEN、MDM2表达及临床意义①

徐丽超,吴英杰

(佳木斯大学附属第一医院,黑龙江 佳木斯 154003)

目的：研究和探索子宫内膜样腺癌中PTENMDM2表达及临床意义。方法：以佳木斯大学附属第一医院2009-11～2014-11存档病例中121例子宫内膜标本为研究对象，根据病变情况分为正常组、异位组、癌变组，采用SP免疫组织化学技术检测正常内膜、异位内膜、癌变内膜组织中的PTEN、MDM2进行检测、比较、分析。结果:PTEN在正常内膜、异位内膜、癌变内膜组织中MOD值分别为0.151 ±0.012；0.032±0.011；0.011±0.007。MDM2在正常组、异位组、癌变组中的阳性表达率为0.00%、42.29%、87.18%，组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：子宫内膜样腺癌MDM2表达明显升高，PTEN的MOD值明显降低，说明PTEN和MDM2异常表达在子宫内膜样腺癌及子宫内膜异位中起重要作用，与宫内膜异位和子宫内膜样腺癌发生发展存在关联。

子宫内膜样腺癌；PTEN；MDM2；表达

子宫内膜癌是较常见的妇科侵袭性肿瘤，子宫内膜样腺癌也被称为雌激素依赖性子宫内膜样子宫内膜癌,是子宫内膜癌的最常见组织学亚型，约占子宫内膜癌的80%。近年来对子宫内膜样腺癌标志物研究更加深入，并取得了多项突破进展[1]。本研究对正常子宫内膜、异位内膜、癌变内膜组织中PTEN、MDM2表达情况进行了检测和分析，旨在探讨子宫内膜样腺癌癌变过程PTEN、MDM2的参与情况。现将相关情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

121例子宫内膜标本均为佳木斯大学附属第一医院2009-11～2014-11存档病例。20例增殖期子宫内膜作为正常对照组，62例子宫内膜异位为异位组，39例子宫内膜样腺癌病例。对照组年龄19～35岁，平均(30.3±5.5)岁；异位组年龄27～49岁，平均(31.5±7.4)岁；癌变组年龄31～62岁，平均(33.4±8.2)岁。各组年龄比较无统计学意义(P>0.05)。将病例标本用10%甲醛固定，并实施石蜡包埋，制作4μm厚连续切片。按实验试剂盒说明实施免疫组化染色，并经病理医师确诊。本研究经院伦理委员会审核批准。

1.2 仪器设备

朝阳恒泰科技发展公司生产的组织芯片制备仪；上海莱卡仪器有限公司生产的切片机；北京天平厂生产的架盘药物天平；上海跃进医疗器械厂生产的调温培养箱；安徽电子科学研究所生产的切片漂烘温控仪；日本Olympus公司生产的 光学显微镜；美国PixeLINK1394Camera图像采集分析仪等。

1.3 实验试剂

北京中杉生物技术有限公司提供鼠抗人MDM2 蛋白单克隆抗体；CellSignalingTechnologyCST公司提供PTEN兔抗人多克隆抗体；福州迈新生物技术开发有限公司提供SP免疫组化染色超敏试剂盒等。

1.4 结果判定

MDM2 蛋白阳性着色定位于细胞核和(或)胞质中, 呈黄色或棕黄色颗粒。在高倍镜下随机选取10个视野，计数 1000 个细胞，根据阳性细胞所占的百分比(0%=0；<10%=1；10%～50%=2；51%～80%=3；>80%=4)及染色强度(无色=0；淡黄色=1；棕黄色=2；棕褐色=3)综合分析判断结果，以两者乘积>3 为阳性标准[2]。

PTEN采用imagepro-plus6.0专业图像分析软件对染色结果进行半定量分析,计算出每张切片蛋白表达的平均光密度值(meanopticaldensity,MOD),MOD=sum(IOD)/sura(area)。MOD值越高,蛋白表达越强。

1.5 统计学方法

采用SPSS软件17.0处理，实验数据以平均值±标准差表示，采用t检验；计数以率表示，采用χ2检验，P<0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1PTEN表达情况

见表1。

表1 三组内膜中PTEN蛋白MOD值

PTEN在正常内膜、异位内膜、癌变内膜组织中MOD值分别为0.151 ±0.012；0.032±0.011；0.011±0.007。(正常组与异位组t=41.15，正常组与癌变组t=72.99，癌变组与异位组t=11.87)组间差异具有统计学意义(P<0.05)。

2.2MDM2阳性情况

见表2。

表2 三组内膜中MDM2阳性情况

MDM2在正常组、异位组、癌变组中的表达率为0.00%、42.29%、87.18%，(正常组与异位组χ2=12.99，正常组与癌变组χ2=41.15，癌变组与异位组χ2=19.05)组间差异具有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

PTEN定位于染色体l0q23.3,具有9个外显子和8个内含子,mRNA总长为5.5kb,cDNA序列内含有1209个核苷酸组成的开放阅读框(ORF),编码一个由403个氨基酸组成的蛋白质,分子量约为47Kd,具有脂质磷酸酶和蛋白酸酶双重活性[3]。PTEN蛋白基因主要是通过磷酸酶的活性使3,4,5-三 酸磷脂酰肌醇(PIP3)脱磷酸,降低细胞内PIP3的水平,从而影响PIP3信号传导途径中的一系列激酶,负性调节PI3K/Akt信号传导途径,使细胞G1期阻滞及促使细胞凋亡,达到阻止细胞生长和促进细胞洞亡的目的。PTEN蛋白表达降低或缺失与人类许多恶性肿瘤有关,并与组织学类型、病理分级、临床分期及淋巴转移有关[4]，有研究表明，第10号染色体同源缺失性酸酶_张力蛋白基因(PTEN)在子宫内膜癌中突变率最高,通过抑制细胞有丝分裂,从而诱导细胞凋亡,通过参与调节细胞的分化、黏附和转移等而发挥抑癌作用[5]。PTEN基因通过抑制细胞有丝分裂诱导细胞调亡,参与调节细胞的黏附、转移和分化等各个方面发挥抑癌基因的作用。本研究结果显示，正常内膜PTEN远高于异位内膜和癌变内膜PTEN，组间差异具有统计学意义，说明PTEN与子宫内膜癌呈负向相关。

MDM2作为癌基因，可以增强细胞的生存活力，促进细胞增生和肿瘤生长[6]。MDM2基因常与同样定位于12q14、3—15的具有调节细胞生长功能的基因(如CHOP、GCI、CDK4、SAS)构成同一扩增子，通过刺激S期转录因子E2F1/DPI调节细胞周期[7]。MDM2蛋白可与野生型p53结合，导致p53 抑癌功能丧失，从而参与肿瘤的发生、发展。本研究结果中，MDM2在正常组、异位组、癌变组中的阳性表达率为0.00%、42.29%、87.18%，组间差异具有统计学意义(P<0.05)，说明MDM2与子宫内膜癌呈正向相关。子宫内膜样腺癌MDM2表达明细升高，PTEN的MOD值明显降低，说明PTEN和MDM2异常表达在子宫内膜样腺癌及子宫内膜异位中起重要作用，与宫内膜异位和子宫内膜样腺癌发生发展存在关联。

[1]惠培.子宫内膜癌的二元发病模式及其临床病理意义[J]中华病理学杂志,2006,35(12):705-707

[2]黄受方.刮宫标本中高分化子宫内膜癌的诊断[J].中华病理学杂志,2006,35(12):708-710

[3]SarmadiS,Izadi-MoodN,SotoudehK,etal.AlteredPTENexpression:adiagnosticmarkerfordifferentiatingnormal,hyperplasticandneoplasticendometrium[J].DiagnosticPathol, 2009, 4(1):41

[4]HamadaK,SasakiT,KoniPA,etal.ThePTEN/PI3Kpathwaygovernsnormalvasculardevelopmentandtumorangiogenesis[J].GenesDev,2005,19(17):2054

[5]RisingerJT,HayseK,MaxwellGL,etal.PTENmutationinendometrialcancerisassociatedwithfavorableclinicalandpathologiccharacteristics[J].ClincancerRes,1998，4(12):3005

[6]MomandJ，WuHH，DasguptaG.MDM2-masterregulatorofthep53tumorsuppressorprorion[J].Gene， 2000，242：15-19

[7]Martink，TrouheD，HagemelerC，etal.StimulationofE2F1/DFltranscriptionalactivitybyMDM2oncoprotein[J].Nature，1995，373(11)：691

徐丽超 (1985～)女,黑龙江佳木斯人,在读硕士研究生。

吴英杰(1964～)女,黑龙江佳木斯人,学士,主任医师,硕士研究生导师。E-mail:jjj.jjn@163.com。

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1008-0104(2015)03-0118-02

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