免疫组化标记物在子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌诊断中的表达及临床意义

黄敬皓

(广西壮族自治区妇幼保健院,南宁 530011)



·论 著·

免疫组化标记物在子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌诊断中的表达及临床意义

黄敬皓

(广西壮族自治区妇幼保健院,南宁 530011)

目的 探讨波形蛋白(Vim)、癌胚抗原(CEA)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和P16蛋白等免疫组化标记物在子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌鉴别诊断中的表达，并分析其临床意义。方法 选取2013年1月至2014年6月广西壮族自治区妇幼保健院收治的子宫内膜样腺癌(A组)与宫颈腺癌(B组)患者各80例。采用免疫组化法检测Vim、CEA、ER和P16 蛋白表达，并比较Vim、CEA、ER三联检测与Vim、CEA、ER和P16蛋白四联检测的各项功能指标。结果 A组的Vim和ER阳性率分别为71.25%、73.75%，均高于B组，差异均有统计学意义(P<0.05)；B组的CEA和P16阳性率分别为73.75%、67.50%，均高于A组，差异均有统计学意义(P<0.05)。A组四联检测的特异度、敏感度及准确度分别为92.43%、56.44%、71.21%，B组分别为98.62%、58.57%、74.62%，均分别高于同组三联检测的特异度、敏感度及准确度，比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 子宫内膜样腺癌组织Vim和ER阳性表达较高，宫颈腺癌组织CEA和P16阳性表达较高，p16蛋白联合传统三联检测可以提高子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌鉴别诊断的准确性。

子宫内膜样腺癌； 宫颈腺癌； 波形蛋白； 癌胚抗原； 雌激素受体

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，其中腺癌约占5%～15%，多发生于宫颈管内膜，呈内生性生长，由于分支较多、结构复杂,病理诊断中漏诊及误诊率较高。子宫内膜癌发生于子宫内膜，大多数为腺癌。子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌可向上向下伸延扩展，宫体下段子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌较难判断和区分。子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌的鉴别诊断对于临床治疗和预后的判断具有重要的临床意义[1-2]。本研究旨在探讨波形蛋白(Vim)、癌胚抗原(CEA)、雌激素受体(ER)和P16蛋白等免疫组化标记物在子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌鉴别诊断中的表达，并分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年1月至2014年6月本院收治的子宫内膜样腺癌(A组)与宫颈腺癌(B组)患者各80例。A组患者年龄34～71岁，平均(49.67±5.13)岁，其中Ⅰ级21例，Ⅱ级33例，Ⅲ级26例。B组患者年龄36～70岁，平均(46.58±4.29)岁，Ⅰ级20例，Ⅱ级35例，Ⅲ级25例。所有患者均知情同意，且研究经本院伦理委员会批准。

1.2 仪器与试剂 鼠抗人Vim、CEA蛋白免疫组化试剂盒和3,3-二氨基联苯(DAB)显色试剂盒均购自武汉博士德公司，ER和P16蛋白免疫组化试剂盒均购自北京中山公司。

1.3 方法

1.3.1 检测方法 Vim、CEA、ER和P16 蛋白检测均采用免疫组化方法，Vim、CEA、ER和P16蛋白工作浓度均为1∶50。所有患者标本均经10% 甲醛液固定后石蜡包埋、脱水、石蜡包埋、切片，根据组化试剂盒步骤应用S-P免疫组化二步法，DAB显色、脱水，透明和封片后在显微镜下进行观察。并将Vim、CEA、ER三联检测作为三联法，Vim、CEA、ER和P16 蛋白四联检测作为四联法。

1.3.2 评定方法 阳性判断标准：Vim以细胞质棕黄色颗粒深染为阳性；CEA以细胞质和(或)细胞膜出现棕黄色颗粒深染为阳性：ER以细胞核棕黄色颗粒深染为阳性；P16 以细胞核和(或)细胞质内出现的棕黄色颗粒为阳性。采用半定量评分法评估阳性结果。阳性细胞计数评分：阳性细胞比例0%～5%记为0分；6%～20%记为1 分；21%～50%记为2 分，51%～80% 记为3分；80%以上记为4 分。细胞染色程度评分标准：细胞核和(或)细胞质的染色程度弱阳性记为1 分；中度强度阳性记为2分；强阳性记为3 分。阳性评分=阳性细胞计数评分×染色程度评分。依据ROC 曲线图定义阳性阈值：阴性为0～3 分，阳性为4～12分[3-4]。

2 结 果

2.1 两组各项免疫组化标记物阳性率比较 A组Vim、ER均呈较强阳性表达，A组Vim和ER阳性率均高于B组，组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。B组CEA和P16蛋白均呈较强阳性表达，B组CEA和P16阳性率均高于A组，组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组各项免疫组化标记物检测水平比较[n(%)]

注：与A组比较，a:P<0.05。

2.2 两组不同检测方法各功能评价指标比较 A组四联法检测的特异度、敏感度及准确度分别为92.43%、56.44%、71.21%，B组分别为98.62%、58.57%、74.62%，均分别高于同组三联法检测的特异度、敏感度及准确度，比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表2 两组不同检测方法各功能评价指标比较(%)

注：与同组的三联法比较，aP<0.05。

3 讨 论

子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌是妇科较为常见的恶性肿瘤，且患病逐渐趋于年轻化。宫颈腺癌多来源于宫颈腺上皮,有多向分化的特点,其组织学类型较多样化。部分学者认为子宫内膜样腺癌是一种雌激素依赖性相关肿瘤，是女性常见的生殖系统恶性肿瘤之一。临床诊断中当原发于子宫体的子宫内膜样腺癌累及宫颈时，子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌难以鉴别，这将影响患者的治疗及对预后的判断。

Vim是中间丝的一种蛋白质，主要存在于间充质来源的细胞中，与微管及肌动蛋白微细丝等一起维持细胞骨架的完整性。本研究结果显示，子宫内膜样腺癌Vim呈较强阳性表达，而在宫颈腺癌中表达较少，可作为子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌鉴别诊断的指标之一。癌组织中大多存在ER，可通过与核内的雌激素结合实现其生物学功能，子宫内膜癌与性激素有关，ER可能是内膜癌变的一个启动因素或激发因素[5-6]。本研究结果显示，子宫内膜样腺癌患者ER阳性率明显高于宫颈腺癌患者。提示ER与子宫内膜癌的发生、发展及预后密切相关，并能够在一定程度上反映肿瘤的分化程度。这主要是由于雌激素能够促进内膜细胞的增生及血管增殖，ER被诱导从而促进其过度生长或癌变。

CEA是由内胚层分化而来的一种肿瘤相关抗原，在肿瘤组织中有较高的阳性表达率，主要表达于腺上皮来源的腺癌，几乎所有的宫颈来源的腺癌其CEA表达持续阳性[7]。本研究结果显示，CEA在宫颈腺癌的阳性表达率明显高于子宫内膜样腺癌，提示CEA主要表达于宫颈腺癌，呈广泛、较强的阳性表达，而在子宫内膜样腺癌中的表达强度较弱，证实CEA对于子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌的鉴别诊断可起到重要作用。P16蛋白是一种细胞周期蛋白依赖性激酶的抑癌基因，位于染色体9p21，能够调节pRB基因去磷酸化，抑制细胞周期在G1～S期，P16基因的缺失、突变、转录或表达异常可引起细胞增殖的失控[8-9]。本研究结果显示，宫颈腺癌的阳性表达率明显高于子宫内膜样腺癌，提示p16蛋白检测可用于子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌的鉴别。可能由于宫颈腺癌与高危型人类乳头状瘤病毒关系较为密切，可导致p16蛋白过度表达[10]。

此外，本研究结果表明，四联检测对于宫颈原发腺癌和子宫内膜样腺癌的辅助诊断和鉴别诊断的特异性、敏感性和准确度均高于三联检测，更有利于子宫内膜样腺癌和宫颈腺癌的诊断，可以提高诊断的准确性和可靠性，为病理诊断提供更多的依据，且对于宫颈原发腺癌的诊断效果更明显。但四联检测的敏感性依然较低，限制了其在临床中的应用。

综上所述，子宫内膜样腺癌患者组织中Vim和ER阳性表达较高，宫颈腺癌患者CEA和P16蛋白阳性表达较高，p16蛋白联合传统三联检测可以提高子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌鉴别诊断的准确性。

[1]胡维维，陶金华，李广民，等．ER、VIM、CEA和p16四联检测在宫颈原发腺癌和子宫内膜癌诊断和鉴别中的应用[J]．南方医科大学学报，2010，30(3)：526-529．

[2]莫甲光，卢文生，黄家财．TCT联合HPV及肿瘤标志物检测在宫颈癌中的意义[J]．检验医学与临床，2012，9(10)：1213-1214．

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[4]李富亮，杨菲斐，周敬敬，等．免疫组化标记物在子宫内膜样腺癌与宫颈腺癌鉴别诊断中的表达及意义[J]．中国肿瘤临床与康复，2014，21(1)：45-48．

[5]Hirschowitz L，Nucci M，Zaino RJ．Problematic issues in the staging of endometrial,cervical and vulval carcinomas[J]．Histopathology，2013，62(1)：176-202．

[6]赵时梅，罗宇，任传伟，等．子宫内膜样腺癌MUC1表达及其与ER、PR 表达的相关性[J]．临床与实验病理学杂志，2013，29(5)：497-501．

[7]Kim CH，Soslow RA，Park KJ，et al．Pathologic ultrastaging improves micrometastasis detection in sentinel lymph nodes during endometrial cancer staging[J]．Int J Gynecol Cancer，2013，23(5)：964-970．

[8]傅亚均，曾雪影，王以容，等．血清3项检测对子宫肌瘤合并子宫内膜癌患者的术前诊断价值[J]．检验医学与临床，2014，11(6)：809-810．

[9]杨兴杰，张杰，牛娜，等．SATB1与ER、PR在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义[J]．实用医学杂志，2012，28(6)：948-950．

[10]胡春芳，张秀琴，王静，等．宫颈腺癌发生相关蛋白的蛋白质组学初步研究[J]．现代生物医学进展，2013，13(28)：5467-5471．

Expression of immunohistochemical markers in diagnosis of endometrial adenocarcinoma and cervical adenocarcinoma and its clinical significance

HUANGJin-hao

(MaternalandChildHealthCareHospitalofGuangxiZhuangAutonomousRegion,Nanning,Guangxi530011,China)

Objective To explore the expression of immunohistochemical markers vimentin (Vim),carcinoembryonic antigen (CEA),estrogen receptor (ER),progesterone receptor (PR) and P16 protein in the differential diagnosis of endometrioid adenocarcinoma and cervical adenocarcinoma,and to analyze its clinical significanceMethods 80 cases of endometrioid adenocarcinoma (group A) and 80 cases of cervical adenocarcinoma (group B) in our hospital from Jan. 2013 to Jun. 21014 were selected.The expression of Vim,CEA,ER and P16 protein was measured by the immunohistochemical method.The functional indexes were compared between the 3-item combined detection of Vim,CEA and ER and the 4-item combined detection of Vim,CEA,ER and P16 protein. Results The positive rates of Vim and ER in the group A were 71.25% and 73.75% respectively,which were higher than those in the group B,the differences were statistically significant (P<0.05).The positive rates of CEA and P16 protein in the group B were 73.75% and 67.50% respectively,which were higher than those in the group A,the differences were statistically significant (P<0.05).The specificity,sensitivity and accuracy of the 4-item combined detection in the group A and B were 92.43% and 98.62%,56.44% and 58.57%,71.21% and 74.62% respectively,which were higher than those of the 3-item combined detection in the same group,the differences were statistically significant (P<0.05).Conclusion Vim and ER have high positive expression in endometrial adenocarcinoma tissue,while CEA and P16 have high positive expression in cervical adenocarcinoma.p16 protein combined with traditional triple combination detection could improve the differential diagnostic accuracy of endometrial adenocarcinoma and cervical adenocarcinoma.

endometrioid adenocarcinoma； cervical adenocarcinoma; vimentin； carcinoembryonic antigen； estrogen receptor

黄敬皓，男，硕士，研究员，主要从事女性生殖系统病理学研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.06.023

A

1672-9455(2015)06-0778-02

2014-09-12

2014-12-18)