康瑞琴,苏文辉,张 鑫,王 琪,康舒欣,孙亚茹
(安阳工学院,河南安阳455000)
随着人们对时尚的追求,染发越来越多的被广大消费者所接受。但是由于染发着色的需要,染发剂中通常会添加对苯二胺等有机化学物质,伴随而来的安全性问题也越来越多的引起相关工作者的注意。染发剂中对苯二胺及其衍生物是极为重要的染料中间体,可作为偶带氮分散染料、酸性染料、直接染料和硫化染料的中间体。对苯二胺对毛发中的角蛋白有极强的亲和力,染发时其被氧化的过程就是颜色的固着过程,可将头发着色[1]。有实验证明,长期使用染发剂可引起人体皮肤过敏反应,如接触部位的皮肤发痒、出现红斑、丘疹,甚至水疱、红肿、胀痛、渗液等症状。如果皮肤有外伤或患皮肤病,则更易吸收化学物质,而导致慢性蓄积中毒,孕妇甚至有可能发生胎儿畸形[2]。而染发剂会引发癌症绝非耸人听闻。长期接触染发剂,会使其中一些化学物质同某些细胞结合,引起细胞突变,从而诱发皮肤癌、膀胱癌、白血病等,其中染发剂导致白血病的问题更甚[3]。美国明尼苏达州化妆品基地调查发现,使用染发剂的人群,血液病的发病率明显高于未使用染发剂的人群[4]。
本文利用高效液相色谱法对所采集的染发剂样品进行分离分析,检测了不同种类染发剂中对苯二胺的含量。通过对客观检测数值的分析,为消费者购买使用染发剂时提供参考。
Agilent 1200 高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司);PHS-3E 型pH 计(上海佑科仪器仪表有限公司);SYU-22-6000T 超声波清洗器(生元仪器);FAZ004C 电子天平(上海佑科仪器仪表有限公司);TD24-WS 离心机(湖南湘仪实验仪器开发有限公司);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);SCAA-203 型0.45μm 针式过滤器(上海安谱科学仪器有限公司)。
乙腈(CP 天津赛孚科技有限公司);三乙醇胺,(A.R. 天津市富宇精细化工有限公司);H3PO4,(A.R.北京新光化学试剂厂);对苯二胺标准品(A.R. 天津市光复精细化工研究所)。
染发剂的品牌多种多样,颜色的种类繁多,染发剂的形态有粉末状、液体、膏状,而膏状染发剂是使用最多的。本次所采集的染发剂样品全部为粘稠的膏状染发剂。本实验所检测的染发剂样品均在不同理发店采集,共采集染发剂样品10 种。精确称取事先采集好的不同种类的染发剂样品0.2g,置于标有10mL 刻度线的离心管中,加入流动相定容至10mL,放入超声波清洗器中超声提取20min,使染发剂样品充分溶解于加入的流动相中。再放入离心机中,调节转速至3500r·min-1,离心分离20min,使不溶物与下清液分离。离心分离后,用1mL 注射器多次吸取离心管下部清液,经0.45μm 针式过滤器过滤,所得滤液即为待测样品溶液。用提前准备好的进样瓶盛装待测样品溶液,并依次为待测样品溶液编号,放入冰箱保存待测。
固定相:C18色谱柱,150mm×4.6mm,5μm;流动相:5%的乙腈三乙醇胺水溶液;柱温:35℃;流速:1mL·min-1;检测器:二极管阵列检测器;检测波长:280nm;进样量:10μL。
精确称取对苯二胺0.030g,置于100mL 容量瓶中,加流动相溶解,定容至100mL,混合均匀,即得到0.30g·L-1的对苯二胺标准储备液。分别取对苯二胺标准储备液5、10、15、25mL 于4 个50mL 容量瓶中,依次加入流动相定容至50mL,即得到浓度为0.03、0.06、0.09、0.15、0.30mg·mL-1的对苯二胺标准系列,经0.45μm 针式过滤器过滤,分别取适量的不同浓度的对苯二胺标准系列于进样瓶中,依次编号为1、2、3、4、5,即得到待测的对苯二胺标准系列,放入冰箱保存待测。
分别取质量浓度依次为0.03、0.06、0.09、0.15、0.30g·L-1的标准系列,稀释10 倍后各取10μL,依次进入高效液相色谱仪进行测定,通过高效液相色谱仪的分离以及检测器的检测,得到对苯二胺的峰高、峰面积、保留时间,以保留时间来定性,以质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,计算其回归方程。
精确多次称取事先采集好的1 号染发剂样品0.2g,置于标有10mL 刻度线的离心管中,分别加入低、中、高3 种浓度的标准品溶液,3 种不同的浓度依次为0.03、0.15、0.25g·L-1,定容至10mL,每个不同的浓度6 个平行样。通过高效液相色谱仪的分离以及检测器的检测,分析所得结果经计算,得到加标回收率和标准偏差。
将配制好的浓度依次为0.03、0.06、0.09、0.15、0.30g·L-1的标准系列稀释10 倍后,各取10μL 进入高效液相色谱仪中,得到不同浓度的对苯二胺标准品的色谱图及其相对应的峰高、峰面积和保留时间,具体数值见表1。
表1 标准系列色谱图数据Tab.1 Data of standard series chromatogram
由表1 可以看出,对苯二胺标准系列的保留时间在2.223~2.243min 之间。以保留时间来定性,以质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,建立直角坐标系,将对苯二胺标准系列各浓度对应的峰面积值在所建立的坐标系中标出,得到一系列的点,连接所有的数值点,得到对苯二胺标准曲线,进而得到其线性回归方程。对苯二胺标准系列的线性回归方程为:y=2.9289x+4.5362,线性相关系数为0.9997。对苯二胺标准曲线见图1。
图1 对苯二胺标准曲线Fig.1 Standard curve of para-phenylene diamine
按照回收率和精密度的实验步骤,制备加标样并进入高效液相色谱仪进行检测,得到3 个不同浓度的6 个加标样的色谱峰面积,对照对苯二胺标准曲线,得出每一个加标样的浓度,计算回收率、平均值及相对标准偏差。加标回收率及相对标准偏差结果见表2。
表2 加标回收率和相对标准偏差Tab.2 Standard addition recovery and relative standard deviation
从表2 可以看出,该方法精密度高,回收效果好,可以得到较好的实验效果,可用于染发剂中对苯二胺的日常分离检测分析,对于提高消费者使用染发剂时的安全性有非常实际的意义。
将10 种染发剂样品按编号顺序依次各取10μL 进入高效液相色谱仪中进行检测,得到10 种不同种类的染发剂样品试剂的色谱图及其相对应的峰高、峰面积和保留时间。将10 种染发剂样品所检测到的峰面积数值对照对苯二胺标准曲线中,即得到各个样品试剂中对苯二胺的浓度。由于试剂检测时标准系列与染发剂样品试剂全部都是稀释10倍后才进行进样检测的,所以在0.2g 染发剂样品溶于10mL 流动相后的实际对苯二胺浓度应为所测值的10 倍。得到0.2g 染发剂样品中实际的对苯二胺的量后,经过计算,得出各种染发剂中对苯二胺的含量。结果见表3。
表3 样品检测结果Tab.3 Test results of samples
从表3 中可以看出,所采集的染发剂样品中对苯二胺的量在1.289363~2.801892mg 之间,含量在0.65%~1.50%之间。其中3 号样品HIDEML 中对苯二胺的含量最少,9 号样品中含量最多。根据《化妆品卫生规范(2007 版)》的对苯二胺的限量规定为6%[5],说明此次所采集检测的10 种染发剂样品中对苯二胺的含量均未超过相应的限量值,消费者可以放心使用。据了解,目前市面上的染发剂品种繁多,一些产品标榜“纯中草药制剂”、“无毒副作用不含染发剂”、“纯天然植物精华,治白发放心又健康”,均称能起到快速染发的功效,被广大染发者争相购买和使用。但由于其质量安全问题,引发很多投诉,从而更是加大了广大染发者的担忧。故相关专家建议在染发和使用染发剂时应注意:染发剂应选正规商场或美发店出售的包装完好、标识清楚,具备生产许可、卫生许可、特殊化妆品批准文号及执行产品标准号标识的产品;进口商品应标注进口化妆品卫生批准文号、中文产品名称、制造者名称、地址及经销商注册的名称地址等,拒绝假冒伪劣产品。如果到发廊染发应选择合法、正规、信誉度好,美发师具有从业资格的美发店。染发时要防止将染发剂涂到皮肤上,应先在皮肤上涂一层防护产品。切忌同时使用不同品牌的产品,因为它们之间可能会产生化学反应,生成有毒物质,增大过敏几率[6]。但致癌的有毒物质对苯二胺作为染发剂中的着色剂,虽然含量未超过国家的质量标准,却还会对人体造成伤害,长期使用染发剂染发将会更加的严重。
[1]杨艳伟,朱英.染发类化妆品中染发剂的使用情况分析[J].中国卫生检验杂志,2007,17(2):279-281.
[2]杨兆弘.染发剂的安全性及监管对策[J].日用化学工业,2012,42(4):293-297.
[3]周盟.我国染发剂市场现状[J].日用化学品科学,2008,31(9):6-11.
[4]徐燕英,童建.氧化性染发剂毒性研究进展[J].环境与职业医学,2004,21(5):403-404.
[5]中华人民共和国卫生部.化妆品卫生规范(2007 版)[M].2007.
[6]朱会卷,朱英.染发剂的安全性及其检测研究进展[J].中国卫生检验杂志,2006,16(7):888-890.