黔南州Rh阴性稀有血型冰冻血库的建立及其临床意义

宋飞峰，李竹兰，段书刚，李涛涛，杨 莹

（贵州省黔南州中心血站，贵州都匀558000）

人类红细胞血型由20多种血型系统组成，其中，Rh阴性是稀有血型，少数民族居多，占5%，而汉族人们仅占3‰[1]。临床输血过程中，寻找Rh阴性和AB血型的同型血液概率甚至低于3／10 000[2]。因此，建立Rh阴性稀有血型冰冻血库在临床输血操作中具有重要的意义。2005年以来，在深圳中心血站支持指导下，贵州省黔南自治州中心血站开展了Rh阴性稀有血型冰冻血库的建立工作，并通过引进红细胞冰冻新技术开展红细胞冰冻血库的采集和建立工作。目前，Rh阴性稀有血型冰冻血库基本完成，以往采集的新鲜稀有血型常规-80℃时保存有效期仅为35d，但Rh阴性稀有血型冰冻血库的建立显著增加-80℃时保存有效期至10年[3]。但有关黔南州Rh阴性稀有血型冰冻血库的建立及其临床意义的报道较少，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年1月至2013年12月无偿献血者15 546例，全部研究者符合献血标准[4]。其中，男7 824例，女7 722例，年龄19～38岁，平均（29.62±5.32）岁。

1.2 材料 IgM抗体、IgM抗EeCc抗体、IgG抗体、羊抗人IgG和O型红细胞均购自中国上海生物医药公司；全自动加样器（RS100）、酶标仪（Zenyth 340rt）、离心机（Hettich）。

1.3 方法

1.3.1 确定Rh阴性血型 采用IgM抗体、微板法初步筛检试验检测15 546例无偿献血者Rh血型抗原，无凝集反应者为Rh阴性。对初步筛检Rh阴性的血液样本行IgG抗体、羊抗人、间接抗人球蛋白确定试验检测，全部无凝集反应者为Rh阴性，对Rh阴性者进一步行血液样本的吸收放散试验，结果阳性者为Rh Ddel型。间接抗人球蛋白确定试验结果为：部分出现凝集反应者则评定为Rh弱阳性。全部Rh阴性样本采用IgM抗EeCc抗体、盐水法进行血型鉴定。

1.3.2 建立信息血型库 Rh阴性血型的无偿献血者的详细一般资料、联系电话和EeCc表现型特点等情况全面详细输入计算机，形成信息血型库。

1.3.3 建立冰冻血型库 Rh阴性新鲜（采集时间小于6d，未经临床应用）血液采用冰冻深低温红细胞保存技术保存，加入冰冻保护剂（57%甘油）在-80℃深低温环境下保存，以供临床同型输血时应用。

1.3.4 冰冻血型库解冻 临床同型输血时将有效期内Rh阴性血液放置于37～40℃循环水浴箱中融化，采用9.0%、0.9%生理盐水渗透压梯度差方法洗净甘油，供临床应用。

1.4 统计学处理 采用SPSS 18.0统计软件进行分析处理，多组间的Rh阴性血表现型构成比、ABO血型构成比、临床应用有效率等计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血型鉴定结果 15 546例无偿献血者中，Rh阴性共96例（0.62%），Rh阳性共15 450（99.38%），二者比较差异有统计学意义（P＜0.05），Rh阴性血型鉴定结果见表1。

表1 Rh阴性血型鉴定结果（n＝96）

2.2 Rh阴性ABO血型分布特点 分析ABO血型分布发现，A血型占44.79%（43／96），AB血型占6.25%（6／96），二者比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 Rh阴性ABO血型分布特点（n＝96）

2.3 黔南州2010～2013年期间Rh阴性冷冻制备量和临床应用量 Rh阴性稀有血型冷冻制备量、临床应用量和临床应用有效率逐年上升，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。A、O血型冷冻制备量、临床应用量和临床应用有效率均明显高于B、AB血型，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表3 黔南州2010～2013年期间Rh阴性冷冻制备量和临床应用量比较

表4 黔南州2010～2013年期间ABO血型Rh阴性冷冻制备量和临床应用量比较

3 讨论

人类Rh血型系统是常见的血液分型系统，其分型依据主要为红细胞抗原物质的差异性[5]。Rh阴性血型较为少见，是导致临床紧急输血治疗困难的重要原因，Rh阴性所占比例较低，被称为稀有血型。本研究发现，Rh阴性血型仅占0.62%，与相关文献报道一致[6]。因此，通过建立Rh阴性稀有血型冰冻血库在解决临床输血问题中具有重要的意义。贵州省黔南自治州通过对无偿献血者Rh阴性血型筛选、血型鉴定，建立完善的Rh阴性稀有血型信息库，采用冰冻深低温保存技术制备冷冻血库，有效延长稀有血型保存有效期，为临床紧急输血治疗提供保障，提高紧急输血救治成功率。因此，Rh阴性稀有血型的建立在输血医学中具有重要的意义。本自治州未开展冰冻新技术前，采集Rh阴性血型在-80℃温度下保存最长仅35d，在Rh阴性和ABO同型血液中的输注应用有效率较低，理论上在超最大保存期前仅能用于Rh阳性患者，但为充分避免输血反应的发生，大部分临床医生对Rh阳性患者通常不应用Rh阴性血液进行临床输血治疗，造成Rh阴性血液逾期报废，导致稀有血型的严重浪费效应[7-8]。与之相比更重要的是，当临床紧急，需要Rh阴性血紧急输注治疗时，则需再次通过Rh阴性血型信息库筛查-通知-采血-血型鉴定等流程，花费时间较长，降低了紧急输血治疗患者的救治成功率，延缓有效救治时间，严重影响患者的预后，甚至导致患者不治身亡等不可挽回的后果[9]。

为解决上述困难，本自治州中心血站自2005年开始逐步建立Rh阴性稀有血型信息库，对无偿献血者或采血者进行稀有血型信息库的建立和完善。15 546例无偿献血者中Rh阴性共96例（0.62%），血型鉴定以ccee表现型为主，占60.42%，明显高于其他表现型（Ccee、CCee、ccEe、ccEE、CcEe、CCEE），血型间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。Rh阴性血型者的ABO血型分布中发现A血型占44.79%（43／96），AB血型仅占6.25%（6／96），B血型占10.43%，O血型占28.13%，血型间比较差异有统计学意义（P＜0.05），与文献报道结果一致[10]。通过稀有血型冷冻技术的进一步完善，Rh阴性稀有血型冷冻制备量、临床应用量和临床应用有效率逐年上升。A、O血型冷冻制备量、临床应用量和临床应用有效率均明显高于B、AB血型，与稀有血型信息库统计数据基本一致[11]。因此，A、O血型冷冻血库中的血液制备量与采集量呈明显的正相关，说明了本自治州Rh阴性冰冻血库的建立在改善临床应用量和应用有效率方面具有重要意义，挽救了需要Rh阴性紧急输血治疗患者的生命。通过加强无偿献血宣教活动，增加预约采集血液量，增加Rh阴性冷冻制备血量和库存血量，在提高Rh阴性大出血性疾病和新生儿溶血性疾病的成功救治率中具有重要的临床价值。Rh阴性血型和A型同型血液的临床应用有效率高达98.64%，一方面说明Rh阴性血型和A型同型血液紧急输注人数较多，另一方面也说明本自治州Rh阴性血型和A型同型血液库存量较为紧缺，应增加采血量以充分缓解血液库存量问题[12]。因此，稀有血型信息库和冰冻血型库的建立可避免稀有血型的资源型浪费，提高临床储备血应用率，为紧急输血治疗患者提供保障。

Rh阴性稀有血型冰冻血库的建立对紧急输血治疗Rh阴性患者具有重要的临床价值，可提高同型输血率，在提高紧急输血治疗患者的救治成功率方面具有重要意义。

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