乳腺癌中CDC6蛋白表达意义

齐攀 曹兴玥 金艳 张冰 谢振斌

乳腺癌中CDC6蛋白表达意义

齐攀 曹兴玥 金艳 张冰 谢振斌

目的探讨乳腺癌组织中细胞分裂周期蛋白6(CDC6)蛋白表达, 分析CDC6蛋白表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体-2(HER-2)、p53蛋白表达的关系和意义。方法采用免疫组化方法检测73例乳腺癌石蜡标本中CDC6蛋白的表达, 分析其与ER、PR、HER-2、p53的关系。结果CDC6主要表达于细胞浆及细胞核中, 阳性表达率：乳腺癌中65.8%, 正常乳腺组织中40.0%, 表达差异具有统计学意义(P＜0.05)。CDC6蛋白表达与HER-2表达呈正相关。结论CDC6蛋白表达与乳腺癌关系密切, 检测其表达对进一步了解乳腺癌的生物学行为及判断预后有一定价值。

乳腺癌; 细胞分裂周期蛋白6；雌激素受体；孕激素受体；人类表皮生长因子受体-2

乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一, 发病率呈逐年上升趋势, 研究发现它已成为危害妇女健康的头号杀手。全世界每年约有120万乳腺癌患者。乳腺是性激素依赖器官, 其生长、发育和细胞的增殖均受雌激素和孕激素的影响[1]。细胞分裂周期蛋白6(cell division cycle6, CDC6)位于人类染色体17q21.3, 它的表达受到转录因子E2F家族的控制, 是人类DNA复制起始物中必不可少的[2]。在G1期如果细胞中CDC6水平下调, 则细胞不能进入S期, 后来发现, 如果CDC6受到干扰, 表达下调, 则会阻滞细胞增殖及促进凋亡。

本文通过免疫组化方法来研究CDC6蛋白在乳腺癌中的表达, 探讨其与已知病理指标的相关性, 从而发现CDC6蛋白在乳腺癌中的意义, 为乳腺癌患者早诊早治及未来的个体化精准治疗寻找适合的靶的。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取新乡市中心医院既往73例乳腺癌石蜡组织块,25例正常乳腺组织标本(来自瘤旁正常乳腺组织)。其中,73例乳腺癌患者中位年龄56岁,65例为浸润性非特殊型癌,6例为浸润性特殊型癌,2例为导管内癌。25例乳腺组织正常者中位年龄45岁, 所取标本距病灶最小距离2.5 cm, 中位距离3.5 cm, 经病理证实均为正常乳腺组织(无肿瘤浸润)。

1.2 实验方法及结果判断方法 采用组织切片免疫组化方法： CDC6(11640-1-AP)兔抗人多克隆抗体为美国PTG.LAB公司生产。免疫组化染色按S-P试剂盒操作说明进行。染色过程中设阳性和阴性对照。每例乳腺癌标本均已有HE染色切片(病理既往存放), 并进行组织学分级(SBR分级标准)。CDC6以胞核和胞浆出现清晰的棕黄色颗粒为阳性, 采用半定量积分法判断结果。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件进行数据分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验；相关性分析采用Spearman相关分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 CDC6在乳腺正常组织及乳腺癌中的表达情况 CDC6在乳腺癌组织中的阳性表达为48例, 阴性为25例, 阳性率65.8%；正常组织中阳性表达为10例, 阴性为15例, 阳性率为40.0%, 两者阳性率相比差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 CDC6表达与乳腺癌临床指标的关系 HER-2阳性及阴性患者CDC6表达差异有统计学意义(P＜0.05), CDC6蛋白与HER-2呈正相关(r=0.737, P＜0.05)；p53阳性表达患者中CDC6阳性率为71.4%(30/42), 阳性及阴性患者CDC6表达差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 CDC6表达与乳腺癌各临床指标的关系(n)

3 讨论

和人类有关的更多的CDC6致瘤作用相继被发现, 最早的在非小细胞肺癌中, 作者发现hCDC6和hCdt1蛋白和p53蛋白在肿瘤的生长中有协同效应。把肿瘤生长的不同阶段通常称为增生, 不典型增生, 恶性肿瘤, 这样就为发现CDC6蛋白在肿瘤的增长中是如何起作用的提供条件, 基因的扩增导致了肿瘤的发生, 过表达hCDC6的细胞DNA发生损伤, 基因重新复制, 阻滞了细胞的衰老和凋亡[3]。CDC6过表达导致老鼠上皮细胞过度增生至癌变, 相同情况在人类上皮细胞中也会发生。作者发现老鼠及人类上皮细胞过度增生至癌变与肿瘤抑制基因EMT有关, 而CDC6蛋白过表达, 诱发EMT基因的沉默及EMT蛋白的减少[4]。这可能就是CDC6与癌症有关的机制。CDC6蛋白在宫颈癌中高表达, 促进了宫颈癌的发生发展, 其可作为宫颈癌检测的标志物[5]。CDC6蛋白在甲状腺癌中也是增高的, 靶向CDC6增殖, 舌癌就有可能根治[6]。本研究中, 乳腺癌组织中CDC6蛋白表达较正常乳腺组织中多, 这验证了CDC6过表达促进癌症发展的机制。

HER-2即人类表皮生长因子受体-2,20世纪80年代, HER-2就已被发现, 该基因位于17号染色体q21上, 编码p185跨膜蛋白, 其对上皮细胞的生长、分化、存活具有调控作用, 在正常体上皮细胞均有表达, 但无扩增。异常扩增的HER-2可以促进存活, 抑制凋亡, 促进肿瘤新生血管的生成, 增强瘤细胞的侵袭力。HER-2蛋白已成为判断肿瘤恶性程度的重要标志物。CDC6基因及HER-2基因同位于17q21, 有协同作用, 本研究发现CDC6与HER-2有正相关性, HER-2蛋白表达增强, CDC6蛋白表达增强。这再次证实CDC6预示不良预后, 其可以成为监测乳腺癌病情、评价疗效的重要分子生物学指标。通过抑制CDC6的表达可以选择性抑制肿瘤细胞的增殖, CDC6有可能成为一种有前景的治疗乳腺癌的突破点。这些意义是与本次实验目的相一致的。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.023

2015-05-04]

453002 新乡市中心医院头颈乳腺科(齐攀)；新乡医学院组胚教研室(曹兴玥 金艳)；新乡市中心医院儿科(张冰)；新乡市中心医院 (谢振斌)