急性脑梗死患者血小板聚集功能、血管性血友病因子、抗凝血酶及D-二聚体测定的临床意义

叶青跃，程鹏飞，周有利，饶汉武，黄承芳，周　立

(1.武汉科技大学附属天佑医院，湖北 武汉　430064；2.武汉大学医院；

3.武汉大学动物实验中心/ABSL-3实验室，湖北 武汉　430072)



急性脑梗死患者血小板聚集功能、血管性血友病因子、抗凝血酶及D-二聚体测定的临床意义

叶青跃1，程鹏飞2，周有利1，饶汉武1，黄承芳1，周立3

(1.武汉科技大学附属天佑医院，湖北 武汉430064；2.武汉大学医院；

3.武汉大学动物实验中心/ABSL-3实验室，湖北 武汉430072)

摘要：目的探讨急性脑梗死患者血小板聚集功能(PAgT)、血管性血友病因子(vWF)、抗凝血酶(AT)和D-二聚体(D-dimer)水平变化及临床意义。方法选用相应的方法和仪器测定112例脑梗死及80例健康对照者血(浆)PAgT、vWF、AT和D-dimer水平变化，同时对部分患者进行治疗前、后的对比分析。结果脑梗死患者血中PAgT、vWF、D-dimer等指标均明显高于健康对照组，AT活性较对照组显著降低，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。选取经治疗效果明显好转的78例脑梗死患者，出院前取空腹静脉血测定PAgT、vWF、AT、D-dimer等指标，并与治疗前对照，结果治疗后PAgT、vWF、D-dimer降低，AT活性升高，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论脑梗死患者体内存在明显的凝血及纤溶功能异常，与血管内皮损伤、血小板聚集功能增强、凝血及纤溶功能亢进、抗凝功能降低等多因素有关。PAgT、vWF、AT、D-dimer可以作为脑梗死患者诊断、治疗监测和预后判断的参考指标。

关键词：脑梗死；血小板聚集功能(PAgT)；血管性血友病因子(vWF)；抗凝血酶(AT)；D-二聚体(D-dimer)

脑梗死是由于脑动脉粥样硬化，血管内皮细胞损坏，导致管腔狭窄，造成局部血栓形成所致。通常发病急骤，病情危急，其高发病率、致残率和致死率已跃居世界前列，引起人们的高度重视。据WHO统计，我国脑梗死的发病率和病死率高居世界首位，每年的新发脑梗死患者人数高达 200万，每年的脑梗死病死患者人数也达到150万，同时，由于脑梗死的高致残性，存活的脑梗死患者大多患有瘫痪等残疾，造成了巨大的社会和家庭负担[1]。

研究发现，脑梗死患者通常会发生血小板，血管内皮细胞系统以及凝血、抗凝与纤溶系统的异常改变。因此通过有关指标的测定以判断患者的高凝状态或血栓形成，对疾病的早期诊断、及时治疗与病情观察具有重要的临床意义。本文对急性脑梗死患者血小板聚集功能(PAgT)、血管性血友病因子(vWF)、抗凝血酶(AT)和D-二聚体(D-dimer)等指标进行测定分析，探讨其临床意义，为临床诊治提供依据。

1材料与方法

1.1研究对象(1)病例组：脑梗死患者112例，男68例，女44例，年龄42～78岁，平均64.5岁，均系起病3 d内入院者，诊断均符合2010年中国脑血管病防治指南制定的诊断标准[2]，并经头颅CT或MRI确诊，且排除脑出血及心、肝、肾及血液系统疾病，近一个月内未服用抗血小板、抗凝及溶栓类药物。根据美国国立卫生院卒中量表(Nat ional Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评估患者神经功能缺损程度并评分[3]，其中经治疗(改善脑循环、抗脑水肿降低颅内压、抗凝及溶栓治疗、营养神经、抗动脉粥样硬化等)4周好转者78例。(2)对照组：同期来我院健康体检正常者80例，男45例，女35例，年龄40～78岁，平均58.5岁。病例组与对照组在年龄、性别等方面具有可比性。

本研究经医院医学伦理委员会批准，所有研究对象均知情同意。

1.2标本采集与处理患者入院24 h内取空腹静脉血3.6 mL ，其中1.8 mL加0.109 mL·L-1枸橼酸钠0.2 mL抗凝，3 000转/分离心15 min，取乏血小板血浆2 h内测定血浆血管性血友病因子(vWF)、抗凝血酶(AT)和D-二聚体(D-dimer)；另1.8 mL加0.109 mL·L-1枸橼酸钠0.2 mL抗凝、混匀2 h内测定PAgT 。

1.3测定方法vWF测定为免疫法，AT测定为发色底物法，D-dimer测定为免疫比浊法，均在SysmexCA7000全自动血凝分析仪上进行，试剂及定标血浆均为与仪器配套的Simense公司产品。用美国CHRMNO-LOG血小板聚集仪测定血小板聚集功能(PAgT)，以浓度为1 μmol·L-1的ADP为诱导剂，全血阻抗法测定。

2结果

对照组与脑梗死组PAgT、vWF、AT、D-dimer测定结果的比较，见表1。

表1对照组与脑梗死组PAgT、vWF、AT、D-dimer

由表1可见，脑梗死患者血中PAgT、vWF、D-dimer等指标均明显高于健康对照组，AT显著低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

选取经治疗效果明显好转的78例脑梗死患者，出院前取空腹静脉血测定PAgT、vWF、AT、D-dimer等指标，并与治疗前对照，结果见表2。

表2脑梗死患者治疗前、后PAgT、vWF、AT、D-dimer

由表2可见，与治疗前比较，治疗后PAgT、vWF、D-dimer降低，AT活性升高，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。

3讨论

研究表明，脑梗死患者在血栓形成之前，其血管内皮细胞、血小板、凝血与抗凝、纤维蛋白溶解系统，以及血液流变性等各方面均发生了不同程度的改变[4-5]。vWF是血管内皮细胞合成、分泌的一种大分子糖蛋白，可作为血管内皮细胞损伤的分子标志物[4]。当血管内皮细胞受损时，vWF大量释放入血，与血小板表面糖蛋白Ⅱb/Ⅲa结合，有利于血小板活化。同时，vWF作为桥梁使血小板粘附于血管胶原纤维，形成血小板血栓。此外，vWF还可促进纤维蛋白原的合成，使血液黏滞性增大，有利于血栓形成。本研究发现，脑梗死患者血浆vWF的表达水平显著高于对照组，表明脑梗死患者急性期存在着严重的血管内皮细胞损伤，vWF大量释放，活化血小板导致其释放出多种促凝物，引起血液的高凝状态，最终导致血栓形成。因此，检测vWF的表达对急性脑梗死早期溶栓、抗血小板治疗均有重要的临床意义。

血小板聚集功能是通过诱导剂如ADP、凝血酶、胶原等与血小板膜受体结合使血小板发生变形、黏附、释放，反映血小板相互黏附及聚集的能力。血小板释放的多种物质可促进血栓形成。其中神经肽Y(NPY)是一种含36个氨基酸残基的多肽，ADP、胶原、肾上腺素等诱导剂可不同程度地刺激血小板释放NPY，从而使血小板发生聚集，有助于血栓形成。迄今，血小板聚集试验被认为是反映血小板功能最实用的检查方法[6]。本研究的结果表明，脑梗死患者发病期由于血小板活化，导致其聚集率显著性增高；经过有效治疗，血小板的聚集率明显降低。

抗凝血酶为一种丝氨酸蛋白抑制物，可灭活凝血酶、纤溶酶及多种凝血因子，是对抗血栓形成的重要物质。脑血栓形成时，抗凝血酶迅速被激活的凝血酶、纤溶酶、激肽释放酶、因子Ⅹa、Ⅻa、Ⅸa等凝血因子灭活消耗，因而含量明显下降[7]。D-二聚体是纤维蛋白与活化因子ⅩⅢ发生交联后，经纤溶酶水解产生的降解产物。有研究发现血浆D-二聚体水平升高即代表机体内存在继发性的纤溶亢进或有血栓形成，常预示着血栓前状态[8]。有研究认为D-二聚体的水平与脑梗死急性期的分型有关，并发现在心源性脑梗死中的D-二聚体水平最高[9]。本文测定结果表明，脑梗死患者体内凝血功能均处于亢进状态，并伴有继发性纤溶活性的改变。表现为D-二聚体明显高于健康对照组，AT较对照组显著降低，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。脑梗死的主要原因是栓塞和血栓形成，血管内皮损伤、血小板聚集功能增强、凝血功能亢进导致的高凝状态，纤维蛋白原在其中发挥了重要作用；为了维持凝血与纤溶的动态平衡，D-二聚体增高即说明血管内血栓形成的同时出现了继发性纤溶亢进。而AT降低一般认为与消耗有关。脑梗死患者治疗好转后的结果也说明血管内皮损伤、血小板聚集功能增强、凝血及纤溶功能亢进在病情转归中的意义。

参考文献：

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Clinical significance on changes of platelet aggregation test,

von Willebrand factor,antithrombin and D-dimer assayin

acute cerebral infarction patients

YE Qing-yao1，CHENG Peng-fei2，ZHOU You-li1，et al

(1.linicalLaboratoryofTianYouHospitalAffiliatedtoWuhanUniversityofScienceandTechnology，

Wuhan，Hubei430072，China；2.WuhanUniversityHospital，Wuhan，Hubei430072,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the clinical signification of coagulation ,anti-coagulation and fibrinolysis indexes i.e.platelet aggregation test(PAgT),von Willebrand factor(vWF),antithrombin(AT),D-dimer in acute cerebral infarction patients.MethodsvWF was assayed using ELISA method,AT was determined by chromogenic substances assay,and Latex enhanced immune turbidimetry for D-dimer.vWF,AT and D-dimer all the parameters were finished by SysmexCA-7000 automated blood coagulation analyzer.PAgT was measured simultaneously using a whole-blood Lumi-Aggregometer by CHRMNO-LOG platelet aggregation apparatus.ResultsPAgT,vWF,D-dimer were significantly higher in acute cerebral infarction patients group,compared with those in the control group(P<0.05 orP<0.01).while AT was significantly lower(P<0.05).After effective treatment,PAgT,vWF,AT,D-dimer Indicators are all improved.ConclusionThere is significant abnormal in coagulation,anti-coagulation and fibrinolysis system in acute cerebral infarction patients.PAgT,vWF,AT,D-dimer can be as good predictors for the blood coagulation fibrinolysis imbalance state of the disease and the degree of recovery.

Key words:acute cerebral infarction; platelet aggregation test(PAgT); von Willebrand factor(vWF); antithrombin(AT); D-dimer

(收稿日期：2014-05-17，修回日期：2014-08-21)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2015.02.030

基金项目：湖北省卫生厅科研项目(No JX6B93)