促衰变因子在三阴性乳腺癌中的表达及其对预后的影响*

李铁军 张海燕 姜 伟

促衰变因子在三阴性乳腺癌中的表达及其对预后的影响*

李铁军①张海燕②*姜 伟①

目的：探讨长度促衰变因子(DAF，CD55)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达及与预后的关系。方法：用免疫组化S-P法检测100例TNBC及50例TNBC旁乳腺组织中CD55的表达；结合临床病理和随访资料，建立Cox模型进行预后分析。结果：CD55在TNBC中的表达率为56.0%，在癌旁乳腺中的表达率为8.0%，两者之间差异有统计学意义(x2=32.0，P＜0.05)。CD55的表达与肿瘤大小、临床分期及腋下淋巴结转移均具有显著相关(x2=7.404，x2=8.688，x2=4.802；P＜0.05)，而与年龄和组织学分级无显著相关。多因素分析显示，年龄、临床分期、CD55及腋淋巴结转移情况4项指标是影响患者DFS的独立危险因素；临床分期及腋淋巴结转移情况两项指标是影响患者OS的独立危险因素。结论：CD55的高表达可能参与了TNBC的发生、发展过程，并与预后有相关性，提示CD55的表达可能成为判断TNBC浸润进展及预后的指标之一。

三阴性乳腺癌；促衰变因子；免疫组织化学；预后

[First-author's address]The Department of Education, The Center Hospital of Cangzhou, Cangzhou 061001, China.

三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)是指雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体-2的表达均呈阴性的乳腺癌，其被认为是一种独特的病理类型。TNBC易转移、复发、侵袭性高以及预后差，因此，对于其发生、发展及预后的研究成为热点。促衰变因子(decay accelerating factor，DAF)又称CD55，是一种补体调节蛋白，能够防止补体因子在细胞表面的蓄积，保护宿主细胞免遭补体攻击，在肿瘤中发挥免疫逃避的作用。本研究探讨CD55在TNBC这一特殊类型乳腺癌中的表达，并对CD55与TNBC预后的关系进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2006年8月至2007年10月在沧州市中心医院住院治疗的100例TNBC患者的蜡块及随访资料，患者均为女性；年龄25～72岁，平均41.8岁；临床分期：Ⅰ期23例，Ⅱ期50例，Ⅲ期27例；组织学分级：Ⅰ级20例，Ⅱ级54例，Ⅲ级26例；腋下淋巴结转移患者62例。同时选取50例癌旁乳腺组织作为对照。所有患者均接受手术治疗以及放化疗等综合治疗。

1.2 纳入与排除标准

(1)纳入标准：经病理检测雌激素受体(estrogenreceptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)及人表皮生长因子受体-2(human epidermal receptor-2，HER-2)均为阴性的TNBC女性患者。

(2)排除标准：经病理检测ER、PR及HER-2其中任意一项为阳性的非TNBC女性患者。

1.3 随访

本组所有乳腺癌患者均进行了随访，随访率为100%。随访起始时间为抗癌治疗开始日，观察终止时间为2014年7月。预后评价指标为患者的5年无病生存时间(DFS)及总生存时间(OS)。随访方式为门诊定期复查和电话随访相结合。

1.4 免疫组化

采用免疫组化S-P法，以S-P免疫组化试剂盒说明书为依据操作，鼠抗人CD55单克隆抗体试剂盒购自上海优宁维生物科技有限公司。

1.5 判定指标

CD55的判断：CD55蛋白主要表达于细胞浆及细胞膜，以棕黄色颗粒为特征。采取以每一切片中随机选取10个高倍镜视野及每个高倍镜视野计数100个细胞的方法判定。染色强度等级：浅黄染为1分，中度黄染为2分，强度黄染为3分；阳性细胞的百分率：阳性细胞≤5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，＞50%为3分；将两者的结果综合分析：0分计为阴性(-)，1～2分计为弱阳性(+)，3～4分计为中度阳性(++)，5～6分计为强阳性(+++)；将CD55蛋白的(-)、(+)组计为低表达组，将CD55蛋白的(++)、(+++)组计为高表达组。

1.6 统计学方法

采用统计学分析软件SPSS 17.0软件包进行统计学处理，计数资料应用x2检验，用Kaplan-Meier法描述生存曲线，组间比较采用Log-rank法进行，用Cox模型进行多因素分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD55蛋白在癌旁组织及癌组织中的表达

CD55蛋白在TNBC组织中的表达率为56.0%，在癌旁乳腺组织中的表达率为8.0%，两者之间差异有统计学意义(x2＝32.0，P＜0.05)，见表1。

表1 CD55在乳腺不同组织类型中的表达

2.2 CD55蛋白表达与TNBC临床病理特征之间的关系

在TNBC中，CD55的表达肿瘤大小、临床分期及腋下淋巴结转移均显著相关，差异有统计学意义(x2=7.404，x2=8.688，x2=4.802；P＜0.05)，而与年龄及组织学分级无显著相关，见表2。

表2 CD55蛋白在TNBC中的表达与临床病理特征的关系

2.3 临床因素对TNBC患者预后的影响

影响DFS的单因素分析显示，年龄、临床分期、腋下淋巴结转移及CD55的蛋白表达与TNBC预后有关，差异有统计学意义。影响OS的单因素分析显示，临床分期、腋下淋巴结转移及CD55的蛋白表达与TNBC预后有关，差异有统计学意义，见表3。

表3 影响TNBC患者预后的单因素分析

表4 影响TNBC患者DFS的多因素分析

表5 影响TNBC患者OS的多因素分析

2.4 多因素分析

将Log-rank检验筛选到的对TNBC生存有影响的各个因素再进行多因素Cox模型分析，入选条件为P＜0.1。结果显示：年龄、临床分期、CD55的蛋白表达及腋淋巴结转移情况指标是影响患者DFS的独立危险因素；临床分期及腋淋巴结转移情况两项指标是影响患者OS的独立危险因素，见表4、表5。

3 讨论

TNBC是具有独特的生物学及临床特征的乳腺癌亚型，其缺乏临床乳腺癌治疗的靶点，不能从内分泌治疗及靶向治疗中获益，其预后差、进展快、生存时间短及易于侵袭转移。目前，手术和化疗是其主要治疗手段，一旦复发预后极差，因此，研究TNBC意义重大。CD55是一种补体衰变加速因子，与C3转化酶结合，阻止了C3b的沉积，并抑制了攻膜复合物的形成，从而使肿瘤细胞逃脱补体的攻击。CD55在保护癌症干细胞免受免疫系统攻击方面可能起到重要作用[1]。Ikeda等[2]采用免疫组化的方法检测到CD55在乳腺癌中高表达，故可作为判断预后的指标。本研究探讨了CD55在TNBC这一特殊类型乳腺癌中的表达及其对预后的影响。

杨超等[3]通过应用免疫组化法检测49例乳腺癌患者，乳腺癌上皮细胞的阳性表达率为65.3%，其阳性率随乳腺癌TNM分期的增高、肿块大小的增大及腋下淋巴结转移数目的增多而增高。徐昶等[4]应用免疫组化方法检测71例直肠癌组织及30例正常结直肠组织中CD55的表达情况，得出直肠癌组织CD55表达水平显著高于正常肠黏膜组织，浸润前沿区域间质CD55高表达患者复发和(或)转移率(64.5%)显著高于低表达患者(32.5%)。何政等[5]应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)，免疫组化及Western blot检测CD55在12例胰腺癌及对应癌旁组织中的表达，三种方法均显示CD55在胰腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织。白雪等[6]检测了CD55蛋白在20例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤组织及60例卵巢上皮性癌组织中的表达，CD55蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达明显高于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织，并且CD55蛋白的表达随组织病理分级及病理分期的升高而升高。本研究中发现50例癌旁乳腺组织CD55阳性率为23.8%，而CD55在TNBC中的表达率为62.5%，与以上结论类似，说明CD55在TNBC中相对高表达，对TNBC的发生及发展可能有重要影响。本研究结果还显示：CD55的表达与肿瘤大小、临床分期及腋下淋巴结转移均显著相关，提示随着肿瘤严重程度进展及侵袭能力的加强，CD55蛋白表达程度随之增加，说明CD55越是高表达，肿瘤恶性度越高，越容易出现浸润和转移。这与张青俊等[7]在喉癌方面的相关性研究相似。

本研究中单因素及多因素分析显示，CD55成为判断TNBC患者不良预后的重要因素。众多研究证明了CD55在胃癌、结直肠癌、甲状腺癌及乳腺癌等癌组织上存在CD55过表达的现象，而且与肿瘤不良的预后有关[8-11]。Ikeda等[2]预后分析结果显示，肿瘤大小和CD55的表达是乳腺癌的独立预后因素，而杨超等[3]生存曲线显示，CD55表达强阳性患者远期生存率明显低于CD55表达阴性患者，且随着CD55表达的增强，患者发生远处转移的概率也随之增大，与本研究在TNBC中的预后分析结论相似。因此提示CD55可能与TNBC的发生及发展密切相关，CD55可能是影响TNBC预后的因素，检测CD55在TNBC组织中的表达可以作为判断患者预后的分子标志。

[1]徐静娴,姚志斌,森井英一,等.乳腺癌中CD55高表达细胞的生物学特性[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2010,19(6):532-536.

[2]Ikeda J,Mofii E,Liu Y,et a1.Prognostic significance of CD55 expression in breast cancer[J]. Clin Cancer Res,2008,14(15):4780-4786．

[3]杨超,李杰,刘运江.乳腺癌组织中CD55的表达及其与预后的关系[J].中国老年学杂志,2013,33(9):2004-2006.

[4]徐昶,韩少良,吴秀玲,等.直肠癌浸润前沿CD97与其配体CD55的表达及预后影响[J].浙江医学,2010, 32(9):1311-1314,1317.

[5]何政,王敏,田锐,等.CD55在胰腺癌中的表达及其意义[J].中国普通外科杂志,2011,20(9):993-995.

[6]白雪,黄可欣,马洪喜,等.卵巢上皮性癌组织中ALDH1和CD55蛋白的表达及其临床意义[J].中国妇幼保健,2013,28(22):3658-3659.

[7]张青俊,胡俊兰,尚小玲,等.CD55在喉癌组织中的表达及其临床意义[J].中国老年学杂志,2010,30(21): 3074-3076.

[8]王芹,张玲,张维东,等.胃癌组织衰变加速因子表达及其临床意义的研究[J].中华肿瘤防治杂志,2008, 15(9):683-686.

[9]Durrant LG,Chapman MA,Buckley DJ,et a1. Enhanced expression of the complement regulatory protein CD55predicts a poor prognosis in colorectal cancer patients[J].Cancer Immunol Immunother,2003,52(10):638-642.

[10]Mustafa T,Klonisch T,Hombach-Klonisch S,et a1. Expression of CD97 and CD55 in human medullary thyroid carcinomas[J].Int J Oncol,2004,24(2):285-294.

[11]张海谱,单保恩,艾军,等.ALDHl和CD55表达在乳腺癌预后评估中的意义[J].解放军医学杂志,2010, 35(1),20-23.

Research on protein expression of CD55 in triple-negative breast cancer and its effect on prognosis/

LI Tie-jun, ZHANG Hai-yan, JIANG Wei// China Medical Equipment,2015,12(12):41-44.

Objective:To investigate the expression of CD55 in triple-negative breast cancer (TNBC) and its correlations with prognosis.Methods:The expressions of CD55 was detected by immunohistochemistry Streptavidin-Peroxidase method in 100 cases of triple-negative breast cancer and 50 cases of adjacent-carcinoma tissues, with clinical and pathological features and follow-up data, the Cox model analysis was established and to analyze the prognostic factors.Results:The positive expression of CD55 was 56.0% in the tissues from triple-negative breast cancer, whereas its positive rate was 8.0% in the corresponding adjacent breast tissues, with statistical significance (x2=32.0, P＜0.05). The expression of CD55 was significantly related with tumor size, clinical stage and axillary lymph node metastases (x2=7.404, x2=8.688, x2=4.802; P＜0.05); the expression of CD55 did not show correlation to age, and histologic grade. Multivariate analysis showed that the age, clinical stage, CD55 protein expression and axillary lymph node metastasis were the independent risk factors affecting the 5-year disease-free rate of patients and that clinical stage and axillary lymph node metastasis were the independent risk factors affecting the 5-year overall rate of patients.Conclusion:The expression of CD55 might be related to the development and prognosis of triple-negative breast cancer. The expression of CD55 may be used as one of the indicators in determining the progress and prognosis of TNBC.

Triple-negative breast cancer; Decay accelerating factor; Immunohistochemistry; Prognosis

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.12.013

1672-8270(2015)12-0041-04

R737.9

A

2015-03-18

沧州市科学技术研究项目(131302105)“凋亡抑制因子Livin与抑癌基因PTEN在三阴性乳腺癌中的表达及其判断乳腺癌预后价值的研究”

①沧州市中心医院教学处 河北 沧州 061001

②沧州医学高等专科学校 河北 沧州 061001

*通讯作者：czyxjy001@163.com

李铁军,男,(1979- ),本科学历，副主任护师。沧州市中心医院教学处，中国医学装备协会会员，河北省护理学会手术室专业委员会委员，研究方向：护理管理、洁净手术部规范化管理及临床教学。